কিভাবে ডান ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ চয়ন করুন
ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ ল্যাবরেটরি এবং প্যাথলজি বিভাগের জন্য একটি আদর্শ মাইক্রোস্কোপিক ইমেজিং সরঞ্জাম। এটি পর্যবেক্ষণ এবং ইমেজিংয়ের জন্য ফ্লুরোসেন্স বৈশিষ্ট্য ব্যবহার করে। এটি সেল বায়োলজি, নিউরোবায়োলজি, বোটানি, মাইক্রোবায়োলজি, প্যাথলজি, জেনেটিক্স এবং অন্যান্য ক্ষেত্রে ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয়। ফ্লুরোসেন্স ইমেজিংয়ের উচ্চ সংবেদনশীলতা এবং উচ্চ নির্দিষ্টতার সুবিধা রয়েছে এবং এটি টিস্যু এবং কোষে নির্দিষ্ট প্রোটিন এবং অর্গানেলের বিতরণ পর্যবেক্ষণ, সমষ্টিকরণ এবং মিথস্ক্রিয়া অধ্যয়ন, আয়ন ঘনত্বের পরিবর্তনের মতো জীবন গতিশীল প্রক্রিয়াগুলির ট্র্যাকিংয়ের জন্য খুব উপযুক্ত। , ইত্যাদি
মাইক্রোস্কোপের পছন্দ
ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপগুলি প্রধানত তিনটি বিভাগে বিভক্ত: খাড়া ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ (বিভাগ করার জন্য উপযুক্ত), ইনভার্টেড ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ (জীবন্ত কোষের জন্য উপযুক্ত, বিভাগ বিবেচনা করে), স্টেরিওস্কোপিক ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ (বৃহত্তর নমুনার জন্য উপযুক্ত, যেমন গাছপালা, আল্ট জেব্রাফ)। ভ্রূণ), মেদাকা, মাউস/ইঁদুরের অঙ্গ ইত্যাদি)।
ফ্লুরোসেন্স ফিল্টার কিউব নির্বাচন
ফ্লুরোসেন্ট প্রোবের উত্তেজনা এবং নির্গমন তরঙ্গদৈর্ঘ্য বিবেচনা করার পাশাপাশি, ফিল্টার ব্লকের নির্বাচনকেও বিবেচনা করতে হবে যে মাল্টি-কালার লেবেলযুক্ত নমুনার জন্য অ-নির্দিষ্ট উত্তেজনা এবং ক্রস-কালার আছে কিনা। পরীক্ষায়, আমরা উত্তেজনার জন্য উত্তেজনা শিখরের নিকটতম তরঙ্গদৈর্ঘ্য বেছে নেওয়ার চেষ্টা করব, এবং প্রাপ্তির পরিসরে অবশ্যই নির্গমনের শিখর অন্তর্ভুক্ত থাকতে হবে। উদাহরণস্বরূপ, অ্যালেক্সা ফ্লুর 488 এর উত্তেজনা শিখর হল 500nm, এবং একটি 480/40 উত্তেজনা ফিল্টার একটি ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপে নির্বাচন করা যেতে পারে। সাধারণত ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপে ব্যবহৃত ফ্লুরোসেন্স ফিল্টার কিউবগুলিকে দুই প্রকারে ভাগ করা যায়: লং পাস (সংক্ষেপে এলপি) এবং ব্যান্ড পাস (সংক্ষেপে বিপি), যেগুলিকে প্রয়োজন অনুসারে নির্বাচন করতে হবে।
ফ্লুরোসেন্ট আলোর উৎসের পছন্দ
বর্তমানে সাধারণত ব্যবহৃত ফ্লুরোসেন্ট আলোর উত্সগুলির মধ্যে রয়েছে পারদ ল্যাম্প, ধাতব হ্যালাইড ল্যাম্প এবং এলইডি আলোর উত্স যা সাম্প্রতিক বছরগুলিতে দ্রুত বিকাশ লাভ করেছে। ফ্লুরোসেন্ট আলোর উৎসের বর্ণালী অবিচ্ছিন্ন এবং অবিচ্ছিন্ন এবং বিভিন্ন ব্যান্ডে শক্তি ভিন্ন হবে। তুলনামূলকভাবে সংকীর্ণ বর্ণালী ব্যান্ড, আরও স্থিতিশীল শক্তি আউটপুট, দীর্ঘ জীবনকাল, নিরাপত্তা এবং পরিবেশগত সুরক্ষা এবং অন্যান্য অনেক সুবিধার কারণে, LED আলোর উত্সটি ধীরে ধীরে ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপের প্রধান আলোর উত্স হয়ে উঠছে।
কনফোকাল মাইক্রোস্কোপ
প্রথাগত ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ পর্যবেক্ষণে, ফ্লুরোসেন্ট মার্কার পদার্থ এবং অটোফ্লুরোসেন্স স্ট্রাকচারের ওভারল্যাপিংয়ের কারণে, তারা ঘনিষ্ঠভাবে একত্রিত হয়, যখন ঐতিহ্যগত এপি-ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ অবজেক্টিভ লেন্স শুধুমাত্র ফোকাল প্লেন থেকে আলো সংগ্রহ করে না, বরং উপরে এবং নীচে বিক্ষিপ্ত আলো সংগ্রহ করে। ফোকাল প্লেন, যার ফলে ইমেজ রেজোলিউশন এবং বৈসাদৃশ্য অনেক কমে যায়।
কনফোকাল ইমেজিং শুধুমাত্র ফোকাল প্লেন থেকে প্রতিফলিত আলোর অংশ সনাক্ত করে এই সমস্যার সমাধান করে। আলোর উৎসটি একটি পিনহোলের মধ্য দিয়ে যায় যাতে ফোকাল প্লেনে একটি ছোট এবং সূক্ষ্ম আলোর স্পট তৈরি হয়। ফোকাল সমতল থেকে নির্গত আলো বস্তুনিষ্ঠ লেন্স দ্বারা সংগ্রহ করা হয়। অবজেক্টিভ লেন্সের ফোকাল প্লেনের উপরে বা নীচের বিন্দু থেকে নির্গত বেশিরভাগ ফ্লুরোসেন্স ছোট গর্তে একত্রিত হতে পারে না। শুধুমাত্র ফোকাল প্লেনে অবস্থিত ফ্লুরোসেন্স এবং অফ-ফোকাস ফ্লুরোসেন্সের একটি ছোট অংশ পিনহোলের মধ্য দিয়ে যেতে পারে, যখন ফোকাল প্লেনের বাইরের আলোক রশ্মিগুলি পিনহোল প্লেটের সামনে বা পিছনে একত্রিত হয় এবং ডিটেক্টরে প্রবেশ করতে বাধা দেয়। পিনহোল সনাক্ত করা ছবি হল ফোকাল প্লেন থেকে তোলা ছবি, তাই চূড়ান্ত ছবির গুণমান অনেক উন্নত হয়েছে।
লেজার স্ক্যানিং কনফোকাল অণুবীক্ষণ যন্ত্রের কার্যাবলীর সুবিধা এবং ব্যবহারযোগ্যতার কারণে, কনফোকাল মাইক্রোস্কোপ উচ্চ-নির্ভুল কোষ জীববিজ্ঞান, উদ্ভিদবিদ্যা এবং কোষ গবেষণার ক্ষেত্রে একটি অপরিহার্য পরীক্ষামূলক সহকারী। একই সময়ে, ভবিষ্যতে বৈজ্ঞানিক গবেষণা কেন্দ্রে, এটি হবে সবচেয়ে মৌলিক এবং মূল বৈজ্ঞানিক গবেষণার হাতিয়ার।
