ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপগুলি তাদের অপটিক্যাল পাথের উপর ভিত্তি করে দুটি প্রকারে শ্রেণীবদ্ধ করা হয়েছে:
1. ট্রান্সমিশন ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ: উত্তেজনা আলোর উত্সটি একটি কনডেনসার লেন্সের মাধ্যমে নমুনা উপাদানের মধ্য দিয়ে যাওয়ার মাধ্যমে ফ্লুরোসেন্সকে উত্তেজিত করতে ব্যবহৃত হয়। সাধারণভাবে ব্যবহৃত অন্ধকার ক্ষেত্রের ঘনীভূতকরণগুলিও ব্যবহার করা যেতে পারে, এবং সাধারণ ঘনীভূতকারীগুলিকে নমুনার উপরে উত্তেজনা আলোকে পুনঃনির্দেশিত করতে এবং সাইডলোব করার জন্য প্রতিফলককে সামঞ্জস্য করতে ব্যবহার করা যেতে পারে। এটি একটি অপেক্ষাকৃত পুরানো-ফ্যাশনের ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ। এর সুবিধা হল কম ম্যাগনিফিকেশনে শক্তিশালী ফ্লুরোসেন্স, কিন্তু এর অসুবিধা হল এর ফ্লুরোসেন্স ক্রমবর্ধমান ম্যাগনিফিকেশনের সাথে কমে যায়। অতএব, বৃহত্তর নমুনা উপকরণ পর্যবেক্ষণের জন্য এটি ভাল।
2. ফোলিং লাইট ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ আধুনিক সময়ে বিকশিত একটি নতুন ধরনের ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ। উপরের থেকে ভিন্ন, উত্তেজনা আলো বস্তুনিষ্ঠ লেন্স থেকে নিচের দিকে নমুনার পৃষ্ঠে পড়ে, একই উদ্দেশ্যমূলক লেন্স ব্যবহার করে ইলুমিনেশন কনডেনসার এবং ফ্লুরোসেন্স সংগ্রহের জন্য উদ্দেশ্যমূলক লেন্স ব্যবহার করে। একটি দ্বৈত রঙের মরীচি স্প্লিটার অপটিক্যাল পাথে যোগ করতে হবে, যা হালকা ইউরেনিয়াম থেকে 45 ডিগ্রি দূরে। কোণ, উত্তেজনা আলো বস্তুনিষ্ঠ লেন্সে প্রতিফলিত হয় এবং নমুনার উপর দৃষ্টি নিবদ্ধ করে। নমুনা দ্বারা উত্পন্ন ফ্লুরোসেন্স, সেইসাথে অবজেক্টিভ লেন্স এবং কভার গ্লাসের পৃষ্ঠ থেকে প্রতিফলিত উত্তেজনা আলো, উদ্দেশ্য লেন্সে প্রবেশ করে এবং দ্বৈত রঙের বিম স্প্লিটারে ফিরে আসে, উত্তেজনা আলো এবং ফ্লুরোসেন্সকে আলাদা করে। অবশিষ্ট উত্তেজনা আলো তারপর ব্লকিং ফিল্টার দ্বারা শোষিত হয়। যদি উত্তেজনা ফিল্টার/দ্বৈত রঙের মরীচি বিভাজক/ব্লকিং ফিল্টারগুলির বিভিন্ন সংমিশ্রণ ব্যবহার করা হয়, তবে তারা বিভিন্ন ফ্লুরোসেন্ট প্রতিক্রিয়া পণ্যগুলির চাহিদা মেটাতে পারে। এই ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপের সুবিধাগুলি হল অভিন্ন ক্ষেত্রের আলোকসজ্জা, পরিষ্কার ইমেজিং এবং বৃহত্তর বিবর্ধন সহ শক্তিশালী প্রতিপ্রভ।
(2) ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ ব্যবহারের জন্য নির্দেশাবলী
1. আলোর উৎস চালু করুন। অতি-উচ্চ চাপের পারদ বাতিকে তার সর্বোচ্চ উজ্জ্বলতায় পৌঁছানোর জন্য কয়েক মিনিটের জন্য প্রিহিট করা দরকার।
2. ট্রান্সমিশন ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপির জন্য ল্যাম্প উত্স এবং কনডেনসারের মধ্যে প্রয়োজনীয় উত্তেজনা ফিল্টার এবং উদ্দেশ্য লেন্সের পিছনে সংশ্লিষ্ট ব্লকিং ফিল্টার ইনস্টল করা প্রয়োজন। পতনশীল হালকা ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপকে অপটিক্যাল পাথের স্লটে প্রয়োজনীয় উত্তেজনা ফিল্টার/ডুয়াল কালার বিম স্প্লিটার/ব্লকিং ফিল্টার ব্লক ঢোকাতে হবে।
3. একটি কম-শক্তির মাইক্রোস্কোপ দিয়ে পর্যবেক্ষণ করুন এবং বিভিন্ন ধরনের ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপের সমন্বয় ডিভাইস অনুযায়ী আলোর উৎসের কেন্দ্রকে সামঞ্জস্য করুন, যাতে এটি সম্পূর্ণ আলোকসজ্জার স্থানের কেন্দ্রে অবস্থিত।
4. নমুনা রাখুন এবং পর্যবেক্ষণের জন্য ফোকাস করুন। ব্যবহারের সময় মনোযোগ দেওয়া উচিত: চোখের ক্ষতি এড়াতে ফিল্টার ইনস্টল করার আগে আপনার চোখ দিয়ে সরাসরি পর্যবেক্ষণ করবেন না; একটি তেল মাইক্রোস্কোপ দিয়ে নমুনা পর্যবেক্ষণ করার সময়, একটি বিশেষ অ ফ্লুরোসেন্ট তেল মাইক্রোস্কোপ ব্যবহার করা আবশ্যক; উচ্চ চাপের পারদ বাতি-টি বন্ধ হয়ে যাওয়ার পরে, এটি অবিলম্বে আবার চালু করা যায় না। এটি পুনরায় চালু করতে 5 মিনিট সময় নেয়, অন্যথায় এটি অস্থির হবে এবং পারদ বাতির জীবনকালকে প্রভাবিত করবে।
(3) একটি নীল বেগুনি আলো ফিল্টার ব্যবহার করে একটি শিক্ষণ প্ল্যাটফর্মে একটি ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপের নীচে পর্যবেক্ষণ করলে, 0.01% অ্যাক্রিডিন কমলা ফ্লুরোসেন্ট রঞ্জক দ্বারা দাগযুক্ত কোষগুলি দেখা যায়। নিউক্লিয়াস এবং সাইটোপ্লাজম দুটি ভিন্ন রঙের ফ্লুরোসেন্স (গাঢ় সবুজ এবং কমলা লাল) তৈরি করতে উত্তেজিত হয়।
