তেলের লেন্সের ম্যাগনিফিকেশন সাধারণ অবজেক্টিভ লেন্সের চেয়ে বড় কেন?
মাইক্রোবায়োলজিক্যাল পরীক্ষা-নিরীক্ষায় দাগ দেওয়ার আগে ব্যাকটেরিয়া ঠিক করা দরকার কেন:
1: কোষগুলিকে মেরে ফেলে, রঞ্জক দিয়ে দাগ করা সহজ।
2: ব্যাকটেরিয়াগুলিকে কাচের স্লাইডে আনুগত্য করুন এবং জল দ্বারা ধুয়ে ফেলা সহজ নয়।
ঠিক করার সময়, এটি ধীরে ধীরে শুকানো উচিত। আপনি যদি সত্যিই গতি বাড়াতে চান তবে আপনি অ্যালকোহল ল্যাম্পের শিখার উপরে দূরত্বে কয়েকবার শুকাতে পারেন। গ্লাস স্লাইড গরম হতে দেবেন না, অন্যথায় এটি ব্যাকটেরিয়ার জীবন গঠনকে ধ্বংস করতে পারে।
গ্রাম স্টেনিং এবং ব্যাকটেরিয়া মাইক্রোস্কোপিক পর্যবেক্ষণ
1. পরীক্ষামূলক নীতি
গ্রাম স্টেনিং নীতি: ব্যাকটেরিয়া তাদের কোষের দেয়ালের গঠন এবং গঠনের কারণে গ্রাম দাগের প্রতি ভিন্নভাবে প্রতিক্রিয়া জানায়। গ্রাম-পজিটিভ ব্যাকটেরিয়ার কোষ প্রাচীর মূলত পেপটিডোগ্লাইকান দ্বারা গঠিত একটি নেটওয়ার্ক গিঁট। ইথানল দিয়ে চিকিত্সা করা হলে, ডিহাইড্রেশনের কারণে নেটওয়ার্ক কাঠামোর ছিদ্রের আকার ছোট হয়ে যায়, এবং ব্যাপ্তিযোগ্যতা হ্রাস পায়, যার ফলে ক্রিস্টাল ভায়োলেট-আয়োডিনের জটিল পদার্থটি কোষে নির্গত এবং ধরে রাখা সহজ হয় না এবং নীল- প্রাথমিক স্টেনিং এজেন্টের বেগুনি রঙ এখনও বিবর্ণকরণ এবং কাউন্টারস্টেইনিংয়ের পরেও বজায় থাকে। গ্রাম-নেগেটিভ ব্যাকটেরিয়ার কোষ প্রাচীরের পেপটিডোগ্লাইকান স্তরটি পাতলা এবং লিপিডের পরিমাণ বেশি, তাই যখন বিবর্ণকরণ চিকিত্সা করা হয়, তখন লিপিডটি ইথানল (বা অ্যাসিটোন) দ্বারা দ্রবীভূত হয় এবং কোষ প্রাচীরের ব্যাপ্তিযোগ্যতা বৃদ্ধি পায়। যে ক্রিস্টাল ভায়োলেট-আয়োডিনের কমপ্লেক্স এটি নির্গত করা সহজ, এবং একটি কাউন্টারস্টেইন দিয়ে কাউন্টারস্টেইন করার পরে, কোষগুলি কাউন্টারস্টেইনের লাল রঙে দাগযুক্ত হয়। মাইক্রোস্কোপ ইমেজিং নীতি: আধুনিক সাধারণ অপটিক্যাল মাইক্রোস্কোপগুলি আইপিস এবং অবজেক্টিভ লেন্সের দুটি লেন্স সিস্টেম ইমেজকে বড় করার জন্য ব্যবহার করে, তাই এগুলিকে প্রায়শই যৌগিক মাইক্রোস্কোপ বলা হয়। অণুবীক্ষণ যন্ত্রের অপটিক্যাল সিস্টেমে, উদ্দেশ্যমূলক লেন্সের কর্মক্ষমতা সবচেয়ে গুরুত্বপূর্ণ, এবং তেল লেন্সের বিবর্ধন সবচেয়ে বড়, যা মাইক্রোবায়োলজিক্যাল গবেষণার জন্য সবচেয়ে গুরুত্বপূর্ণ। গ্লাস স্লাইড এবং লেন্সের মধ্যে নিমজ্জন তেল যোগ করার মূল উদ্দেশ্য হল আলোকসজ্জার উজ্জ্বলতা বৃদ্ধি করা এবং মাইক্রোস্কোপের রেজোলিউশন বৃদ্ধি করা। আলোর প্রতিসরণ বা সম্পূর্ণ প্রতিফলন কমাতে এবং পর্যবেক্ষিত চিত্রটিকে আরও পরিষ্কার করতে আলোক সংক্রমণ মাধ্যম হিসাবে বাতাসের পরিবর্তে তেল ব্যবহার করা হয়।
2. পরীক্ষামূলক সরঞ্জাম
1. উপনিবেশ:
Escherichia coli 24h পুষ্টির আগর তির্যক সংস্কৃতি,
স্ট্যাফিলোকক্কাস অরিয়াস প্রায় 24 ঘন্টা পুষ্টির আগর তির্যক সংস্কৃতি, ব্যাসিলাস সাবটিলিস 12-18ঘণ্টা পুষ্টিকর আগার তির্যক সংস্কৃতি।
2. সমাধান বা বিকারক:
পাতিত জল, আয়োডিন দ্রবণ, ক্রিস্টাল ভায়োলেট স্টেনিং দ্রবণ, 95 শতাংশ অ্যালকোহল, সাফরানিন স্টেনিং দ্রবণ, সিডার তেল। 3. যন্ত্র:
মাইক্রোস্কোপ, গ্লাস স্লাইড, ইনোকুলেশন লুপ, অ্যালকোহল ল্যাম্প, টুইজার, লেন্স টিস্যু।
3. পরীক্ষামূলক পদক্ষেপ
a:
1. স্মিয়ার
স্লাইডটি বের করুন, স্লাইডটি প্রজ্বলিত করুন, স্লাইডে অ্যালকোহলটি পুড়িয়ে ফেলুন এবং এটিকে জীবাণুমুক্ত করুন, মাঝখানে পাতিত জলের একটি ছোট ফোঁটা রাখুন, পরীক্ষার তির্যক মাধ্যমে অল্প পরিমাণ ব্যাকটেরিয়া বাছাই করতে ইনোকুলেশন লুপ ব্যবহার করুন টিউব, পুরো প্রক্রিয়া চলাকালীন, টেস্ট টিউবের মুখ অ্যালকোহল বাতির উপরে থাকা উচিত এবং সংস্কৃতি মাধ্যমের দূষণ রোধ করতে গতি দ্রুত হওয়া উচিত। তারপর বৃত্তাকার গতিতে কাচের স্লাইডে ছোট জলের ফোঁটাগুলিকে স্মিয়ার করুন, জলের ফোঁটাগুলি মেঘলা হয়ে গেলে থামুন এবং সেগুলি শুকিয়ে যাওয়ার জন্য অপেক্ষা করুন।
2. প্রাথমিক রঞ্জনবিদ্যা
কলোনির উপর ক্রিস্টাল ভায়োলেট (শুধু ব্যাকটেরিয়া ফিল্ম ঢেকে রাখা উপযুক্ত) ফেলে দিন, 1-2 মিনিটের জন্য দাগ দিন, স্টেনিং দ্রবণটি ঢেলে দিন এবং স্লাইডের উপরে থেকে সূক্ষ্ম জল দিয়ে ধুয়ে ফেলুন যতক্ষণ না এলুয়েট বর্ণহীন হয়, এবং স্লাইডে দাগ রাখুন। স্লাইসের উপর জল ঝেড়ে ফেলুন।
3. মর্ডান্ট
অবশিষ্ট জল ধুয়ে ফেলতে ড্রপওয়াইজে আয়োডিন দ্রবণ যোগ করুন, প্রায় 1 মিনিটের জন্য ঢেকে রাখুন এবং জল দিয়ে ধুয়ে ফেলুন।
4. বিবর্ণকরণ
গ্লাস স্লাইডে জল ঝেড়ে ফেলুন, গ্লাস স্লাইডটি কাত করুন এবং সাদা পটভূমির নীচে এটিকে বিবর্ণ করতে 95 শতাংশ অ্যালকোহল যোগ করুন, যতক্ষণ না বের হওয়া অ্যালকোহলটি নীল দেখায় না, অবিলম্বে জল দিয়ে অ্যালকোহলটি ধুয়ে ফেলুন এবং গ্লাস স্লাইডটি ঝাঁকান। স্লাইস উপর জল বন্ধ.
5. কাউন্টারস্টেইনিং
প্রায় 1-2 মিনিট সাফরানিন দ্রবণ দিয়ে কাউন্টারে স্টেন করুন, জল দিয়ে ধুয়ে ফেলুন এবং তারপরে শোষক কাগজ দিয়ে শুকিয়ে নিন
6. মাইক্রোস্কোপিক পরীক্ষা:
লো ম্যাগনিফিকেশন লেন্সের অধীনে পর্যবেক্ষণ করা ব্যাকটেরিয়া কলোনিটি দেখুন (স্লাইডটি নাড়তে থাকুন, যদি আপনি একটি লাল ছায়া অনুভব করেন, অবিলম্বে থামুন, ম্যাগনিফিকেশন সামঞ্জস্য করুন, যদি এটি একটি উপনিবেশ না হয়, অনুসন্ধান চালিয়ে যান), লেন্স ব্যারেল বাড়ান, এবং তারপর তেল আয়না সুইচ. নমুনা এলাকায় সিডার তেলের এক ফোঁটা যোগ করুন এবং মোটা অ্যাডজাস্টার দিয়ে লেন্সের ব্যারেলটি সাবধানে কম করুন যাতে তেলের লেন্সটি তেলে নিমজ্জিত হয় এবং নমুনাটিকে প্রায় স্পর্শ করে। কনডেন্সারটিকে সর্বোচ্চ অবস্থানে তুলুন এবং অ্যাপারচারটি সম্পূর্ণভাবে খুলুন, অবজেক্টের চিত্রটি দৃশ্যের ক্ষেত্রে প্রদর্শিত না হওয়া পর্যন্ত লেন্স ব্যারেলটি ধীরে ধীরে বাড়াতে মোটা অ্যাডজাস্টার ব্যবহার করুন এবং এটি পরিষ্কার এবং ফোকাস করতে সূক্ষ্ম অ্যাডজাস্টার ব্যবহার করুন।
