একটি ফ্লুরোসেন্ট মাইক্রোস্কোপের বিশেষ কাঠামোগত উপাদানগুলি কী কী?
রঙিন ফিল্টার ব্লক একটি ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপের একটি গুরুত্বপূর্ণ অংশ, এবং এর মূল উপাদানগুলি উত্তেজনা আলোর জন্য একটি প্রথম বাধা ফিল্টার, নির্গমন আলোর জন্য একটি দ্বিতীয় বাধা ফিল্টার এবং একটি মরীচি বিভাজনকারী আয়না নিয়ে গঠিত। রঙ ফিল্টার মডেল এবং বিভিন্ন নির্মাতার নাম প্রায়ই বেমানান হয়.
1. উত্তেজনা আলো ফিল্টার এবং নির্গমন আলো ফিল্টার: আলোর উত্স এবং ফ্লুরোসেন্ট পিগমেন্টের বৈশিষ্ট্যের উপর ভিত্তি করে, নিম্নলিখিত তিনটি ধরণের মিল সাধারণত একটি নির্দিষ্ট তরঙ্গদৈর্ঘ্য সীমার মধ্যে উত্তেজনা আলো সরবরাহ করতে নির্বাচন করা হয় এবং নমুনা দ্বারা উত্তেজিত ফ্লুরোসেন্সকে ইমেজিংয়ের জন্য আইপিসে পৌঁছানোর অনুমতি দেয়।
UV উত্তেজনা: উত্তেজনা আলো ফিল্টার UV আলোকে অতিক্রম করতে এবং 400nm এর উপরে দৃশ্যমান আলোকে অতিক্রম করতে বাধা দিতে পারে। সংশ্লিষ্ট নির্গমন আলো ফিল্টারটি নীল আলোকে অতিক্রম করার অনুমতি দেয় এবং দৃশ্যের ক্ষেত্রের আলোটি নীল দেখায়, যেমন DAPI স্টেনিং এ প্রয়োগ করা হলে।
নীল আলোর উত্তেজনা: উত্তেজনা আলোর ফিল্টার নীল আলোকে অন্য তরঙ্গদৈর্ঘ্যের মধ্য দিয়ে যেতে এবং আলোকে ব্লক করতে দেয়। সংশ্লিষ্ট নির্গমন আলো ফিল্টার সবুজ আলোকে যেতে দেয়, যেমন GFP স্টেনিং মার্কার।
সবুজ আলোর উত্তেজনা: উত্তেজনা আলোর ফিল্টার সবুজ আলোকে অতিক্রম করতে দেয় এবং অন্যান্য তরঙ্গদৈর্ঘ্যের আলোকে ব্লক করে। সংশ্লিষ্ট নির্গমন আলো ফিল্টার সাধারণত লাল আলোকে যেতে দেয়, যেমন রোডামাইন স্টেনিং।
2. আধা স্বচ্ছ এবং আধা প্রতিফলিত রঙ ফিল্টার: এটির কাজ হল উত্তেজনা আলোকে সম্পূর্ণভাবে অতিক্রম করা থেকে বাধা দেওয়া এবং এটি প্রতিফলিত করা; এবং সংশ্লিষ্ট তরঙ্গদৈর্ঘ্য সীমার মধ্যে আলো নির্গত করে। এর মডেলটি উত্তেজনা আলো ফিল্টার এবং নির্গমন আলো ফিল্টারের সাথে মিলে যায়।
(2) অবজেক্টিভ লেন্স এবং আইপিস
বিভিন্ন উদ্দেশ্যমূলক লেন্স প্রয়োগ করা যেতে পারে, তবে অতিরিক্ত স্কেল এবং ক্রোম্যাটিক বিকৃতি হ্রাস সহ লেন্সগুলি বেছে নেওয়া সর্বোত্তম, কারণ তাদের সেলফ ফ্লুরোসেন্স অত্যন্ত কম এবং তাদের আলোক সংক্রমণ কর্মক্ষমতা (তরঙ্গদৈর্ঘ্য পরিসীমা) ফ্লুরোসেন্সের জন্য উপযুক্ত। মাইক্রোস্কোপ ক্ষেত্রের একটি চিত্রের ফ্লুরোসেন্স উজ্জ্বলতা বস্তুনিষ্ঠ লেন্সের অ্যাপারচার অনুপাতের বর্গক্ষেত্রের সাথে সরাসরি সমানুপাতিক এবং এর বিবর্ধনের বিপরীতভাবে সমানুপাতিক হওয়ার কারণে, ফ্লুরোসেন্স চিত্রগুলির উজ্জ্বলতা উন্নত করার জন্য, একটি বড় অ্যাপারচার অনুপাত সহ একটি উদ্দেশ্যমূলক লেন্স ব্যবহার করা উচিত। বিশেষত অপর্যাপ্ত ফ্লুরোসেন্স সহ নমুনাগুলির জন্য, একটি উচ্চ অ্যাপারচার অনুপাত এবং উচ্চ আলোর ট্রান্সমিট্যান্স সহ একটি বস্তুনিষ্ঠ লেন্স ব্যবহার করা উচিত, যার সাথে একটি আইপিস সহ সর্বনিম্ন বিবর্ধন সম্ভব।
(3) অন্যান্য অপটিক্যাল ডিভাইস
একটি আয়নার প্রতিফলিত স্তরটি সাধারণত অ্যালুমিনিয়াম দিয়ে লেপা হয় কারণ অ্যালুমিনিয়াম নীল বেগুনি অঞ্চলে কম অতিবেগুনি এবং দৃশ্যমান আলো শোষণ করে, 90% এর বেশি প্রতিফলিত করে (যখন রূপালীর প্রতিফলন মাত্র 70%)। সাধারণত, সমতল আয়না ব্যবহার করা হয়। ফোকাসিং লেন্স, বিশেষভাবে ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপের জন্য ডিজাইন করা এবং তৈরি করা হয়েছে, কোয়ার্টজ গ্লাস বা অন্যান্য কাচ দিয়ে তৈরি যা অতিবেগুনী আলো প্রেরণ করে। একটি ট্রান্সমিসিভ আলোর উত্সের কার্যকারিতা ছাড়াও পতনশীল আলো ডিভাইসটি অস্বচ্ছ এবং আধা স্বচ্ছ নমুনা যেমন পুরু প্লেট, ফিল্টার মেমব্রেন, ব্যাকটেরিয়াল কলোনি, টিস্যু কালচার এবং অন্যান্য নমুনাগুলির সরাসরি পর্যবেক্ষণের জন্য আরও উপযুক্ত। সাম্প্রতিক বছরগুলিতে, একটি পতনশীল আলোর যন্ত্র ব্যবহার করে অনেক নতুন ধরনের ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ তৈরি করা হয়েছে, যা পতনশীল আলো ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ নামে পরিচিত।
(4) আলোর উৎস
আজকাল, 50 বা 100W এর উচ্চ-চাপের পারদ বাতিগুলি সাধারণত আলোর উত্স হিসাবে ব্যবহৃত হয়৷ অপারেশন চলাকালীন, দুটি ইলেক্ট্রোডের মধ্যে স্রাব ঘটে, যার ফলে পারদ বাষ্পীভূত হয় এবং গোলকের ভিতরে চাপ দ্রুত বৃদ্ধি পায় (এই প্রক্রিয়াটি সাধারণত 5-15 মিনিট সময় নেয়)। এই প্রক্রিয়া চলাকালীন, আলোর কোয়ান্টা নির্গত হয় এবং মুক্তিপ্রাপ্ত আলোর তরঙ্গদৈর্ঘ্য বিভিন্ন ফ্লুরোসেন্ট পদার্থকে উত্তেজিত করার জন্য যথেষ্ট। অতএব, এটি ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপগুলিতে ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয়।
পারদ ল্যাম্পের পরিষেবা জীবন অপেক্ষাকৃত ছোট, সাধারণত 200 ঘন্টা। পরিষেবা জীবনের এই সীমাবদ্ধতার প্রতিক্রিয়া হিসাবে, সাম্প্রতিক বছরগুলিতে, একটি নতুন ধরনের ফ্লুরোসেন্ট আলোর উত্স X-সাইট ব্যাপকভাবে ব্যবহার করা হয়েছে একটি সুপার লং বাল্ব 2000 ঘন্টা এবং নমনীয় ব্যবহার - কোন প্রিহিটিং প্রয়োজন নেই, ব্যবহারের জন্য প্রস্তুত৷
