দুটি সাধারণ মাইক্রোস্কোপ পর্যবেক্ষণ পদ্ধতি
1. অন্ধকার-ক্ষেত্র পর্যবেক্ষণ
অন্ধকার-ক্ষেত্র পর্যবেক্ষণ অন্ধকার-ক্ষেত্র আলোকসজ্জা নিয়োগ করে। উজ্জ্বল-ক্ষেত্র পর্যবেক্ষণের বিপরীতে, আলোকিত আলো সরাসরি দেখা যায় না; শুধুমাত্র নমুনা দ্বারা প্রতিফলিত বা বিচ্ছুরিত আলো সনাক্ত করা হয়। ফলস্বরূপ, দেখার ক্ষেত্রের একটি অন্ধকার পটভূমি রয়েছে যখন নমুনাটি উজ্জ্বল দেখায়।
অন্ধকার-ক্ষেত্র পর্যবেক্ষণ অপটিক্সে টিন্ডাল প্রভাবের উপর ভিত্তি করে। আলোর বিচ্ছুরণের কারণে ধূলিকণাগুলি সরাসরি তীব্র আলোর অধীনে মানুষের চোখে অদৃশ্য। আলো যখন তির্যকভাবে কণাগুলিকে আঘাত করে, তখন আলোর প্রতিফলন কণাগুলিকে প্রসারিত এবং দৃশ্যমান করে তোলে।
অন্ধকার-ক্ষেত্র পর্যবেক্ষণের জন্য প্রয়োজনীয় বিশেষ আনুষঙ্গিক হল একটি অন্ধকার-ক্ষেত্র কনডেন্সার। এটি নমুনার মধ্য দিয়ে উল্লম্বভাবে ঊর্ধ্বগামী হওয়া থেকে আলোর রশ্মিকে বাধা দেয়। পরিবর্তে, এটি একটি তির্যক কোণে নমুনাকে আলোকিত করতে আলোকে পুনর্নির্দেশ করে। আলোকিত আলো বস্তুনিষ্ঠ লেন্সে সরাসরি প্রবেশ করে না, এবং উজ্জ্বল চিত্রগুলি নমুনা পৃষ্ঠ থেকে প্রতিফলিত এবং বিচ্ছুরিত আলো দ্বারা গঠিত হয়। অন্ধকার-ক্ষেত্র পর্যবেক্ষণের রেজোলিউশন উজ্জ্বল-ক্ষেত্র পর্যবেক্ষণের তুলনায় অনেক বেশি, 0.02-0.004 μm পর্যন্ত পৌঁছেছে।
2. ফেজ-কনট্রাস্ট মাইক্রোস্কোপি
অপটিক্যাল মাইক্রোস্কোপের বিকাশে, ফেজ-কনট্রাস্ট মাইক্রোস্কোপির আবিষ্কার আধুনিক মাইক্রোস্কোপিতে একটি বড় অর্জনের প্রতিনিধিত্ব করে। মানুষের চোখ শুধুমাত্র আলোক তরঙ্গের তরঙ্গদৈর্ঘ্য (রঙ) এবং প্রশস্ততা (উজ্জ্বলতা) পার্থক্য করতে পারে। বর্ণহীন এবং স্বচ্ছ জৈবিক নমুনাগুলির জন্য, আলো তরঙ্গদৈর্ঘ্য বা প্রশস্ততার সামান্য পরিবর্তনের মধ্য দিয়ে যায়, যা উজ্জ্বল ক্ষেত্রের অবস্থার অধীনে পর্যবেক্ষণ করা কঠিন করে তোলে।
ফেজ-কনট্রাস্ট মাইক্রোস্কোপি নমুনার অপটিক্যাল পাথ পার্থক্যের উপর ভিত্তি করে পরিদর্শন করে। এটি কার্যকরভাবে আলোর হস্তক্ষেপ ব্যবহার করে ফেজ পার্থক্যকে (মানুষের চোখে অদৃশ্য) পার্থক্যযোগ্য প্রশস্ততার পার্থক্যে রূপান্তর করে। এমনকি বর্ণহীন স্বচ্ছ পদার্থ স্পষ্টভাবে কল্পনা করা যেতে পারে। এটি জীবন্ত কোষগুলির পর্যবেক্ষণকে ব্যাপকভাবে সহজতর করে, তাই ফেজ-কনট্রাস্ট মাইক্রোস্কোপি উল্টানো মাইক্রোস্কোপের সাথে ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয়।
ফেজ-কনট্রাস্ট মাইক্রোস্কোপের মূল নীতি হল নমুনার মাধ্যমে প্রেরিত দৃশ্যমান আলোর অপটিক্যাল পাথের পার্থক্যকে একটি প্রশস্ততা পার্থক্যে রূপান্তর করা, যার ফলে বিভিন্ন কাঠামোর মধ্যে বৈসাদৃশ্য উন্নত করা এবং তাদের স্পষ্টভাবে দৃশ্যমান করা। নমুনার মধ্য দিয়ে যাওয়ার পরে, আলো প্রতিসরণ করে, তার মূল পথ থেকে বিচ্যুত হয় এবং তরঙ্গদৈর্ঘ্যের 1/4 দ্বারা বিঘ্নিত হয়। 1/4 তরঙ্গদৈর্ঘ্যের একটি অতিরিক্ত প্রতিবন্ধকতা বা অগ্রগতির ফলে 1/2 তরঙ্গদৈর্ঘ্যের মোট অপটিক্যাল পাথ পার্থক্য হয়। দুটি বিম সুপারইম্পোজড এবং হস্তক্ষেপ করে, বৈসাদৃশ্য বাড়ানোর জন্য প্রশস্ততা বৃদ্ধি বা হ্রাস করে। কাঠামোগতভাবে, ফেজ-কনট্রাস্ট মাইক্রোস্কোপের দুটি বিশেষ বৈশিষ্ট্য রয়েছে যা এটিকে সাধারণ অপটিক্যাল মাইক্রোস্কোপ থেকে আলাদা করে।
