ট্রান্সমিশন ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপি এবং রিফ্লেকশন ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপির মধ্যে পার্থক্য
1. ট্রান্সমিশন ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ: উত্তেজনা আলোর উত্স নমুনা উপাদানের মাধ্যমে একটি কনডেন্সারের মাধ্যমে ফ্লুরোসেন্সকে উত্তেজিত করার জন্য প্রেরণ করা হয়। সাধারণত ব্যবহৃত ডার্ক ফিল্ড কনসেনট্রেটর, বা সাধারণ ঘনীভূত, প্রতিফলককে সামঞ্জস্য করতে ব্যবহার করা যেতে পারে উত্তেজনা আলো এবং পার্শ্ব আলোকে নমুনায় রূপান্তর করতে। এটি একটি অপেক্ষাকৃত পুরানো ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ। এর সুবিধা হল কম ম্যাগনিফিকেশনে শক্তিশালী ফ্লুরোসেন্স, অন্যদিকে এর অসুবিধা হল এর ফ্লুরোসেন্স ক্রমবর্ধমান বৃদ্ধির সাথে দুর্বল হয়ে যায়। অতএব, বৃহত্তর নমুনা উপকরণ পর্যবেক্ষণের জন্য এটি ভাল।
2. ফলিং বিম ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ: এটি একটি নতুন ধরনের ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ যা আধুনিক সময়ে বিকশিত হয়েছে। আগেরটির থেকে ভিন্ন, উত্তেজনা আলো বস্তুনিষ্ঠ লেন্স থেকে নমুনার পৃষ্ঠে নিচে পড়ে, একই উদ্দেশ্যমূলক লেন্স ব্যবহার করে ইলুমিনেশন কনডেনসার এবং ফ্লুরোসেন্স সংগ্রহের জন্য উদ্দেশ্যমূলক লেন্স ব্যবহার করে। একটি দ্বৈত রঙের রশ্মি বিভাজক অপটিক্যাল পাথে যোগ করতে হবে, যা ফোটোরেনিয়ামের সাথে একটি 45 ডিগ্রি কোণ গঠন করে। উত্তেজনা আলো বস্তুনিষ্ঠ লেন্সে প্রতিফলিত হয় এবং নমুনায় জড়ো হয়। নমুনা দ্বারা উত্পন্ন ফ্লুরোসেন্স এবং অবজেক্টিভ লেন্স এবং কভার গ্লাসের পৃষ্ঠ থেকে প্রতিফলিত উত্তেজনা আলো একই সাথে উদ্দেশ্য লেন্সে প্রবেশ করে এবং দ্বৈত রঙের রশ্মি বিভাজক-এ ফিরে আসে, উত্তেজনা আলো এবং ফ্লুরোসেন্সকে আলাদা করে। অবশিষ্ট উত্তেজনা আলো তারপর ব্লকিং ফিল্টার দ্বারা শোষিত হয়। যদি উত্তেজনা ফিল্টার, ডুয়াল কালার বিম বিভাজক এবং ব্লকিং ফিল্টারগুলির বিভিন্ন সংমিশ্রণ ব্যবহার করা হয় তবে তারা বিভিন্ন ফ্লুরোসেন্ট প্রতিক্রিয়া পণ্যগুলির চাহিদা মেটাতে পারে। এই ফ্লুরোসেন্ট অণুবীক্ষণ যন্ত্রের সুবিধাগুলি হল অভিন্ন ক্ষেত্র, দৃশ্যের আলোকসজ্জা, পরিষ্কার ইমেজিং এবং উচ্চতর বিবর্ধন সহ শক্তিশালী প্রতিপ্রভ।
ট্রান্সমিশন ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপির সুবিধা এবং অসুবিধা
আলোর উত্স: উচ্চ চাপ পারদ বাতি বা হ্যালোজেন বাতি।
স্পটলাইট মিরর: উত্তেজনা এবং ফ্লুরোসেন্স আলাদা করতে একটি অন্ধকার ক্ষেত্রের স্পটলাইট ব্যবহার করে।
অবজেক্টিভ লেন্সঃ যে কোন ধরনের অবজেক্টিভ লেন্স ব্যবহার করা যায়।
নমুনা: পাতলা নমুনাগুলি সংক্রমণ পর্যবেক্ষণের জন্য আরও উপযুক্ত।
সুবিধা: ① একটি অন্ধকার ক্ষেত্রের কনডেন্সার ব্যবহারের কারণে, উত্তেজনা আলো বস্তুনিষ্ঠ লেন্সে প্রবেশ করতে পারে না, এটি একটি অন্ধকার পটভূমি তৈরি করা এবং ভাল বৈসাদৃশ্য অর্জন করা সহজ করে তোলে এবং পর্যবেক্ষণের জন্য যে কোনও উদ্দেশ্যমূলক লেন্স ব্যবহার করা যেতে পারে। ② কম ম্যাগনিফিকেশন উদ্দেশ্য ব্যবহার করার সময়, এটি একটি প্রতিফলিত ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপের চেয়ে উজ্জ্বল।
অসুবিধা: স্পটলাইটের কেন্দ্র এবং উচ্চতা অবশ্যই সঠিকভাবে সামঞ্জস্য করা উচিত, অন্যথায় একটি উজ্জ্বল ফ্লুরোসেন্ট চিত্র পাওয়া যাবে না। অন্ধকার ক্ষেত্রের স্পটলাইটের ফোকাল দৈর্ঘ্য সীমাবদ্ধতার কারণে, ঘন কাচের স্লাইডগুলি ব্যবহার করা যাবে না। দৃশ্যের ক্ষেত্রের আলোকসজ্জার ক্ষেত্রটি খুব বড় হওয়া উচিত নয়, অন্যথায় এটি ফ্লুরোসেন্ট নমুনার ফ্লুরোসেন্স রঙকে বিবর্ণ হতে পারে। পুরু বা অস্বচ্ছ নমুনা উপযুক্ত নয়।
