লেজার কনফোকাল মাইক্রোস্কোপির মূলনীতি (LSCM)
একটি লেজার কনফোকাল মাইক্রোস্কোপ আলোর উত্সের পিছনে একটি আলোকসজ্জা পিনহোল এবং বিন্দু আলোকসজ্জা এবং বিন্দু সনাক্তকরণ অর্জনের জন্য ডিটেক্টরের সামনে একটি সনাক্তকরণ পিনহোল ব্যবহার করে। আলোক উৎস থেকে আসা আলো আলোকসজ্জা পিনহোলের মধ্য দিয়ে নির্গত আলোর দ্বারা নমুনার ফোকাল সমতলে একটি বিন্দুতে ফোকাস করা হয় এবং সেই বিন্দু থেকে নির্গত প্রতিপ্রভ সনাক্তকরণ পিনহোলের মধ্যে চিত্রিত হয় এবং সেই বিন্দুর বাইরে যে কোনো নির্গত আলোর দ্বারা অবরুদ্ধ হয়। সনাক্তকরণ পিনহোল। আলোকসজ্জা পিনহোল এবং সনাক্তকরণ পিনহোল আলোকিত বা সনাক্ত করা বিন্দুর জন্য সংযোজক, যাতে সনাক্ত করা বিন্দুটি কনফোকাল পয়েন্ট এবং যে সমতলে সনাক্ত করা বিন্দুটি অবস্থিত সেটি হল কনফোকাল সমতল। কম্পিউটার একটি ইমেজ পয়েন্ট আকারে কম্পিউটার স্ক্রিনে সনাক্ত করা বিন্দু প্রদর্শন করে। একটি সম্পূর্ণ ইমেজ তৈরি করার জন্য, অপটিক্যাল পাথে একটি স্ক্যানিং সিস্টেম নমুনার ফোকাল প্লেনের উপর স্ক্যান করে, এইভাবে একটি সম্পূর্ণ কনফোকাল ইমেজ তৈরি করে। যতক্ষণ পর্যন্ত ক্যারিয়ার পর্যায়টি Z-অক্ষ বরাবর উপরে এবং নীচে সরানো হয়, ততক্ষণ নমুনার একটি নতুন স্তর কনফোকাল সমতলে স্থানান্তরিত হয়, এবং নমুনার নতুন স্তরটি মনিটরে চিত্রিত হয়, কারণ Z-অক্ষটি চলতে থাকে। সরানো, নমুনার বিভিন্ন স্তরের ক্রমাগত আলো-কাট চিত্র পাওয়া যায়।
ঐতিহ্যগত অপটিক্যাল মাইক্রোস্কোপ একটি ক্ষেত্র আলোর উত্স ব্যবহার করে, নমুনার প্রতিটি বিন্দুর চিত্র প্রতিবেশী বিন্দু থেকে আলোর বিচ্ছুরণ বা বিচ্ছুরণ দ্বারা হস্তক্ষেপ করা হবে; লেজার স্ক্যানিং কনফোকাল মাইক্রোস্কোপ আলোকিত পিনহোলের মাধ্যমে একটি লেজার রশ্মি ব্যবহার করে অভ্যন্তরীণ ফোকাল সমতলের প্রতিটি বিন্দুতে স্ক্যান করা নমুনার উপর একটি বিন্দু আলোর উৎস তৈরি করে, বিকিরণ বিন্দুতে নমুনা, সনাক্তকরণ পিনহোলের ইমেজিং, পিনহোল সনাক্তকরণের মাধ্যমে। আলোর গুণিতক টিউব (PMT) বা কোল্ড ইলেক্ট্রোকপল্ড ডিভাইস (cCCD) পয়েন্ট-বাই-পয়েন্ট বা লাইন-বাই-লাইন প্রাপ্ত হওয়ার পরে, কম্পিউটার মনিটরের স্ক্রিনে একটি ফ্লুরোসেন্ট চিত্র দ্রুত তৈরি হয়। অবজেক্টিভ লেন্সের ফোকাল প্লেনের সাপেক্ষে ইলুমিনেশন পিনহোল এবং ডিটেকশন পিনহোল হল কনজুগেট, ফোকাল প্লেনের বিন্দু একই সময়ে আলোকসজ্জা পিনহোল এবং নির্গমন পিনহোলের উপর ফোকাস করে, ফোকাল প্লেনের বাইরের বিন্দুটি সনাক্তকরণে থাকবে না। ইমেজিং এ পিনহোল, যাতে প্রাপ্ত কনফোকাল চিত্রটি নমুনার অপটিক্যাল ক্রস-সেকশন, সাধারণ মাইক্রোস্কোপ চিত্রের অস্পষ্টতার ত্রুটিগুলি অতিক্রম করে।
মৌলিক নীতি থেকে, লেজার কনফোকাল মাইক্রোস্কোপ একটি আধুনিক অপটিক্যাল মাইক্রোস্কোপ, এটি নিম্নোক্ত উন্নতি করতে প্রযুক্তির সাধারণ হালকা মাইক্রোস্কোপ।
1. আলোর উত্স হিসাবে লেজার ব্যবহার করুন কারণ লেজারের একরঙাতা খুব ভাল, আলোর উত্স মরীচির তরঙ্গদৈর্ঘ্য একই, মৌলিকভাবে বর্ণবিকৃতিকে দূর করে৷
2. অবজেক্টিভ লেন্সের ফোকাল প্লেনে কনফোকাল টেকনোলজির ব্যবহার বাফেলের একটি ছোট গর্তের সাথে মাঝখানে স্থাপন করা, বিপথগামী আলো ব্লক করার বাইরে ফোকাল প্লেন, গোলাকার বিকৃতি দূর করে; এবং আরও রঙিন বিকৃতি দূর করুন।
3. লেজার কনফোকাল মাইক্রোস্কোপ পয়েন্ট স্ক্যানিং প্রযুক্তি ব্যবহার করে নমুনাকে দ্বি-মাত্রিক বা ত্রিমাত্রিক স্থানের মধ্যে অগণিত বিন্দুতে পচানোর জন্য, একটি খুব ছোট লেজার রশ্মি (বিন্দু আলোর উৎস) পয়েন্ট বাই পয়েন্ট, লাইন বাই লাইন স্ক্যানিং ইমেজিং এবং তারপরের মাধ্যমে। একটি সম্পূর্ণ সমতল বা ত্রিমাত্রিক চিত্রের মাইক্রোকম্পিউটার সংমিশ্রণ। ঐতিহ্যগত আলো মাইক্রোস্কোপ হল এক-কালীন ইমেজিংয়ের অধীনে একটি ক্ষেত্র আলোর উত্স, চিত্রের প্রতিটি বিন্দুতে নমুনাগুলি বিচ্ছুরিত আলো এবং বিক্ষিপ্ত আলোর হস্তক্ষেপের বিন্দুর সংলগ্ন হবে। এই দুটি চিত্রের স্বচ্ছতা এবং নির্ভুলতার তুলনা করা যায় না।
4. কম্পিউটারের মাধ্যমে অপটিক্যাল সিগন্যাল অধিগ্রহণ ও প্রক্রিয়াকরণ এবং একটি ফটোমাল্টিপ্লায়ার টিউবের সাহায্যে সিগন্যালের পরিবর্ধন
লেজার কনফোকাল মাইক্রোস্কোপে, কম্পিউটার পর্যবেক্ষণ এবং ভিডিও রেকর্ডিংয়ের জন্য মানুষের চোখ বা ক্যামেরা প্রতিস্থাপন করে এবং প্রাপ্ত ছবিগুলিকে ডিজিটাইজ করা হয় এবং চিত্রগুলির স্বচ্ছতাকে আবার উন্নত করতে কম্পিউটারে প্রক্রিয়া করা যেতে পারে। অধিকন্তু, ফটোমাল্টিপ্লায়ার টিউবগুলির ব্যবহার খুব দুর্বল সংকেতগুলিকে প্রসারিত করতে পারে, যা সংবেদনশীলতাকে ব্যাপকভাবে উন্নত করে। উপরোক্ত প্রযুক্তির সম্মিলিত ব্যবহারের ফলে বলা যায় যে LSCM হল বিশ্বের সবচেয়ে উন্নত মাইক্রোস্কোপ। এটা বলা যেতে পারে যে LSCM হল মাইক্রোস্কোপ উৎপাদন প্রযুক্তি, ফটোইলেকট্রিক প্রযুক্তি, কম্পিউটার প্রযুক্তি**, আধুনিক প্রযুক্তির বিকাশের অনিবার্য পণ্য।
