ইলেক্ট্রন অণুবীক্ষণ যন্ত্রের জন্য জৈবিক নমুনা প্রস্তুত ও পর্যবেক্ষণ
একটি অণুবীক্ষণ যন্ত্রের রেজোলিউশন এটি ব্যবহার করা আলোর তরঙ্গদৈর্ঘ্যের উপর নির্ভর করে। ইলেক্ট্রন মাইক্রোস্কোপ, যা 1933 সালে আবির্ভূত হয়েছিল, তার আলোর উত্স হিসাবে দৃশ্যমান আলোর চেয়ে অনেক ছোট তরঙ্গদৈর্ঘ্যের ইলেকট্রন বিম ব্যবহার করে। অতএব, এটি অপটিক্যাল মাইক্রোস্কোপের চেয়ে অনেক বেশি রেজোলিউশন অর্জন করে। আলোর উত্সের পার্থক্য ইলেক্ট্রন মাইক্রোস্কোপ এবং অপটিক্যাল মাইক্রোস্কোপের মধ্যে পার্থক্যের একটি সিরিজ নিয়ে আসে।
ইলেক্ট্রন রশ্মি ইমেজিং নীতি এবং নমুনার সাথে মিথস্ক্রিয়া করার উপায়গুলির পার্থক্যের উপর ভিত্তি করে, আধুনিক ইলেক্ট্রন মাইক্রোস্কোপগুলি অনেক প্রকারে বিবর্তিত হয়েছে। সর্বাধিক ব্যবহৃত ট্রান্সমিশন ইলেক্ট্রন মাইক্রোস্কোপ (TEM) এবং স্ক্যানিং ইলেক্ট্রন মাইক্রোস্কোপ (SEM)। আগেরটির মোট বর্ধিতকরণ 1000 থেকে 1,000,000 বার পর্যন্ত, যখন শেষেরটি 20 থেকে 300,000 বার পর্যন্ত। এই পরীক্ষাটি মূলত ট্রান্সমিশন ইলেক্ট্রন মাইক্রোস্কোপ এবং স্ক্যানিং ইলেক্ট্রন মাইক্রোস্কোপের জন্য নমুনা প্রস্তুতির প্রবর্তন করে।
২. যন্ত্রপাতি এবং বিকারক
① ব্যাকটেরিয়া স্ট্রেন:Escherichia coliতির্যক সংস্কৃতি। ② সমাধান বা বিকারক: অ্যামাইল অ্যাসিটেট, ঘনীভূত সালফিউরিক অ্যাসিড, পরম ইথানল, জীবাণুমুক্ত জল, 2% সোডিয়াম ফসফোটাংস্টেট জলীয় দ্রবণ (pH 6.5–8.0), 0.3% পলিভিনাইল ফর্মাল (ক্লোরোফর্মে দ্রবীভূত) দ্রবণ, অ্যামাইল অ্যাসিটেট, প্লামোনিয়াম, সিবিআর 2% অ্যাসিটেট। ③ যন্ত্র এবং সরবরাহ: সাধারণ অপটিক্যাল মাইক্রোস্কোপ, কপার গ্রিড, সিরামিক ফানেল, বীকার, পেট্রি ডিশ, জীবাণুমুক্ত ড্রপার, জীবাণুমুক্ত ফোর্সেপস, বিচ্ছেদকারী সুই, গ্লাস স্লাইড, কাউন্টিং চেম্বার, ভ্যাকুয়াম ইভাপোরেটর, ক্রিটিক্যাল পয়েন্ট ড্রায়ার ইত্যাদি।
III. অপারেটিং পদ্ধতি
(ক) ট্রান্সমিশন ইলেক্ট্রন মাইক্রোস্কোপের জন্য নমুনা প্রস্তুতি এবং পর্যবেক্ষণ
① ধাতব গ্রিডের চিকিত্সা অপটিক্যাল মাইক্রোস্কোপির নমুনাগুলি কাচের স্লাইডে পর্যবেক্ষণ করা হয়। যাইহোক, ট্রান্সমিশন ইলেক্ট্রন মাইক্রোস্কোপির জন্য, ইলেকট্রনগুলি কাচের স্লাইডগুলিকে ভেদ করতে পারে না, তাই সমর্থন গ্রিড নামক জাল পদার্থগুলি নমুনা বাহক হিসাবে ব্যবহৃত হয়। সাপোর্ট গ্রিড উপাদান এবং আকৃতি অনুযায়ী বিভিন্ন স্পেসিফিকেশন পাওয়া যায়; 200-400 জালের তামার গ্রিড সবচেয়ে বেশি ব্যবহৃত হয়। কপার গ্রিডগুলি অবশ্যই দূষক অপসারণের জন্য ব্যবহারের আগে প্রাক-পরিষ্কার করা আবশ্যক, অন্যথায় সহায়ক ফিল্মের গুণমান এবং নমুনা মাইক্রোগ্রাফের স্বচ্ছতা প্রভাবিত হবে। এই পরীক্ষায় একটি 400-জালের কপার গ্রিড গৃহীত হয়, এবং চিকিত্সার পদক্ষেপগুলি নিম্নরূপ: প্রথমে তামার গ্রিডটিকে অ্যামিল অ্যাসিটেটে কয়েক ঘন্টা ভিজিয়ে রাখুন, এটি পাতিত জল দিয়ে কয়েকবার ধুয়ে ফেলুন, তারপরে এটিকে পরম ইথানলে ডিহাইড্রেট করুন। যদি উপরের চিকিত্সার পরেও তামার গ্রিড এখনও নোংরা থাকে তবে এটিকে 1-2 মিনিটের জন্য মিশ্রিত ঘনীভূত সালফিউরিক অ্যাসিডে (1:1) ভিজিয়ে রাখুন, বা 1% NaOH দ্রবণে কয়েক মিনিটের জন্য সিদ্ধ করুন। পাতিত জল দিয়ে বারবার ধুয়ে ফেলার পরে, স্ট্যান্ডবাই ব্যবহারের জন্য এটিকে পরম ইথানলে ডিহাইড্রেট করুন।
