পিএইচ মিটার - মাঝারি পিএইচ নির্ধারণ এবং সমন্বয়
সমস্ত অণুজীব তারা যে পরিবেশে বাস করে তার pH দ্বারা প্রভাবিত হয়। প্রায়শই, নির্বাচনী প্রজাতির উপস্থিতি পিএইচ পরিসরকে সংকুচিত করে যেখানে তারা বৃদ্ধি পায়। কখনও কখনও, মাধ্যমের অম্লতা বা ক্ষারত্ব একটি বৃদ্ধি নির্বাচন ফ্যাক্টর হিসাবে কাজ করতে পারে। জৈব রাসায়নিক পরীক্ষার মিডিয়ার জন্য, তবে, pH পরিসর যেখানে অণুজীবগুলি সাবস্ট্রেটে tk কার্যকলাপ প্রদর্শন করে তা বৃদ্ধির জন্য প্রয়োজনীয় pH পরিসরের তুলনায় সংকীর্ণ: তাই, মিডিয়ার pH প্রত্যাশিত পরিসরে সামঞ্জস্য করা গুরুত্বপূর্ণ। যখন ল্যাবরেটরি মাঝারি কম্পোজিশন অনুযায়ী মাধ্যম প্রস্তুত করে, তখন pH চেক করতে হবে এবং সামঞ্জস্য করতে হবে। এটি অবশ্যই উল্লেখ করা উচিত যে প্রস্তুতকারকের দ্বারা প্রদত্ত রেডিমেড সিন্থেটিক ডিহাইড্রেটেড মাধ্যমের জন্যও (বিশেষত কিছু স্টক ডিহাইড্রেটেড মাধ্যমের জন্য), পরীক্ষামূলক মাধ্যম তৈরি করার পরে চূড়ান্ত pH পরিমাপ করা প্রয়োজন।
একটি মাধ্যমের pH পরিমাপ করার সবচেয়ে সঠিক উপায় হল একটি pH মিটার। ব্যবহারের আগে, এটি পরিচিত পিএইচ (সাধারণত পিএইচ 4 থেকে 7) এর একটি স্ট্যান্ডার্ড বাফার দ্রবণ দিয়ে ক্রমাঙ্কিত করা আবশ্যক। পিএইচ মিটারের ইলেক্ট্রোডটি পাতিত জল দিয়ে ধুয়ে ফেলুন এবং বিকারে সংস্কৃতি মাধ্যমের মধ্যে ডুবিয়ে দিন এবং তারপরে pH মিটারের স্কেল থেকে সংস্কৃতি মাধ্যমের pH পড়ুন। প্রতিটি প্রস্তুতকারক প্রতিটি ধরনের pH মিটারের জন্য বিস্তারিত অপারেটিং নির্দেশাবলী প্রদান করে।
সংস্কৃতির মাধ্যম প্রস্তুত করার সময়, যান্ত্রিক আলোড়ন সহ একটি pH মিটার ব্যবহার করে PH সহজেই সামঞ্জস্য করা যায়। সংস্কৃতির মাধ্যমটি একটি পাত্রে (যেমন একটি বড় বীকার) প্রস্তুত করা উচিত যা ক্রমাগত নাড়তে পারে। বা টেফলন-মোড়ানো চুম্বক। আগর-ধারণকারী মাধ্যমের pH গলানোর পরে সামঞ্জস্য করা প্রয়োজন, যা সহজেই একটি উত্তাপযোগ্য চৌম্বকীয় আলোড়ন দিয়ে করা হয়। পিএইচ সামঞ্জস্য করার সময়, প্রথমে পিএইচ মিটারটি ক্যালিব্রেট করতে পরিচিত পিএইচের একটি স্ট্যান্ডার্ড বাফার দ্রবণ ব্যবহার করুন। তারপর কম্পোজিট ইলেক্ট্রোড এবং রেজিস্ট্যান্স থার্মোমিটার (যদি থাকে) মাঝারিতে রাখুন, ধীরে ধীরে ইলেক্ট্রোড থেকে দূরে বীকারের শেষ থেকে যথাযথ পরিমাণে হাইড্রোক্লোরিক অ্যাসিড এবং সোডিয়াম হাইড্রক্সাইড যোগ করুন, যাতে মাধ্যমটি প্রয়োজনীয় পিএইচে পৌঁছাতে এবং বজায় রাখতে পারে।
পিএইচ মিটারের তাপমাত্রার ক্ষতিপূরণটি ইলেক্ট্রোড সিস্টেমে তাপমাত্রার প্রভাবকে বিবেচনায় নেওয়া উচিত: কিছু dilutions এবং মিডিয়াতে, তাপমাত্রার সাথে pH উল্লেখযোগ্যভাবে পরিবর্তিত হয়। তরল মিডিয়া এবং dilutions জন্য, pH সাধারণত 25 ডিগ্রী বা তাপমাত্রা যে তারা ব্যবহার করা হয় সমন্বয় এবং পরিমাপ করা যেতে পারে।
আগর মাধ্যমের pH দ্রবীভূত করার পরে সামঞ্জস্য করতে হবে, এবং দ্রবীভূত করার তাপমাত্রা 45 ডিগ্রির উপরে: তাই, কঠিন মাধ্যমের pH এর ব্যবহার তাপমাত্রায় নির্ধারণ করা উচিত। এই সময়ে, একটি ফ্ল্যাট-হেড কম্পোজিট ইলেক্ট্রোড ব্যবহার করা উচিত এবং পিএইচ মিটারের তাপমাত্রা ক্ষতিপূরণ ম্যানুয়ালি ক্যালিব্রেট করা উচিত। সংস্কৃতি মাধ্যম প্রস্তুত করার সময়, যদি এটি নির্ধারণ করা হয় যে সংস্কৃতি মাধ্যমের pH গলে যাওয়া অবস্থা এবং ঘনীভূত অবস্থার মধ্যে আলাদা, এর অর্থ হল pH সামঞ্জস্য করার ক্ষেত্রে একটি ত্রুটি রয়েছে।
একইভাবে, যখন প্রস্তুত মাধ্যমটি তাপ-জীবাণুমুক্ত হয় (যেমন, অটোক্লেভড), তখন এটি pH পরিবর্তনও হতে পারে। ডিহাইড্রেটেড মিডিয়ামের জন্য, প্রস্তুতকারক এটিকে বিবেচনায় নিয়েছেন এবং সাধারণত পিএইচ সামঞ্জস্য করার প্রয়োজন নেই, তবে ব্যবহার করা মাধ্যমটির পিএইচ সাবধানে পরীক্ষা করা উচিত। যদি ডিহাইড্রেটেড আগর মাধ্যমের pH পুনরায় দ্রবীভূত করা বা প্রস্তুতির সময় সামঞ্জস্য করা আবশ্যক, তবে জীবাণুমুক্তকরণ পদক্ষেপের পরে এটিকে ফিল্টার-জীবাণুমুক্ত হাইড্রোক্লোরিক অ্যাসিড এবং সোডিয়াম হাইড্রোক্সাইড দ্রবণ দিয়ে সামঞ্জস্য করা ভাল। বিভিন্ন কাঁচামাল বা ফার্মাসিউটিক্যালস দিয়ে মিডিয়া প্রস্তুত করার সময়, অটোক্লেভিংয়ের পরে মিডিয়ার pH অবশ্যই পরীক্ষা করা উচিত। উপরন্তু, যদি প্রতিটি অটোক্লেভের পরে মাধ্যমটির pH একই পরিবর্তন করতে দেখা যায়, তাহলে মাধ্যমটি প্রস্তুত করার সময় pH যথাযথভাবে সামঞ্জস্য করা যেতে পারে। যাইহোক, জীবাণুমুক্তকরণের পরে মাঝারিটির চূড়ান্ত পিএইচ নির্ধারণ করা এখনও প্রয়োজন।
