অণুজীবের জন্য মাইক্রোস্কোপিক সরাসরি গণনা পদ্ধতি
অণুবীক্ষণ যন্ত্রের নিচে হিমোসাইটোমিটার ব্যবহার করে সরাসরি গণনা অণুজীব গণনার একটি সাধারণ পদ্ধতি। এই পদ্ধতিতে স্বজ্ঞাত এবং দ্রুত হওয়ার সুবিধা রয়েছে। একটি সঠিকভাবে মিশ্রিত ব্যাকটেরিয়া সাসপেনশন (বা স্পোর সাসপেনশন) হিমোসাইটোমিটার স্লাইড এবং মাইক্রোস্কোপিক গণনার জন্য কভারস্লিপের মধ্যে গণনা চেম্বারে লোড করা হয়। যেহেতু কাউন্টিং চেম্বারের আয়তন স্থির (0.1 mm³), অণুবীক্ষণ যন্ত্রের নীচে পর্যবেক্ষণ করা অণুজীবের সংখ্যার উপর ভিত্তি করে প্রতি ইউনিট আয়তনে মোট অণুজীবের সংখ্যা গণনা করা যেতে পারে। যেহেতু এই পদ্ধতিটি জীবিত এবং মৃত জীবাণু কোষ উভয়কেই গণনা করে, এটি মোট গণনা পদ্ধতি হিসাবেও পরিচিত।
একটি হেমোসাইটোমিটার হল একটি বিশেষ কাচের স্লাইড যা চারটি খাঁজ দ্বারা গঠিত তিনটি প্ল্যাটফর্ম নিয়ে গঠিত। মাঝখানের প্ল্যাটফর্মটি একটি তির্যক খাঁজ দ্বারা আরও দুটি ভাগে বিভক্ত। প্ল্যাটফর্মের প্রতিটি অর্ধেক একটি গ্রিড খোদাই করা হয়। প্রতিটি গ্রিড নয়টি বড় স্কোয়ারে বিভক্ত, এবং কেন্দ্রীয় বৃহৎ বর্গক্ষেত্র গণনা চেম্বার হিসাবে কাজ করে, যেখানে জীবাণু গণনা করা হয়। হিমোসাইটোমিটারের গঠন চিত্র Ⅷ‑1 এ দেখানো হয়েছে।
কাউন্টিং চেম্বারগুলির জন্য দুটি সাধারণ ধরণের স্নাতক স্পেসিফিকেশন রয়েছে। এক প্রকারের একটি বড় বর্গক্ষেত্র রয়েছে 16টি মাঝারি স্কোয়ারে বিভক্ত, এবং প্রতিটি মাঝারি বর্গক্ষেত্রকে আরও 25টি ছোট স্কোয়ারে বিভক্ত করা হয়েছে (চিত্র Ⅷ‑2)। অন্য ধরনের একটি বড় বর্গক্ষেত্র 25টি মাঝারি স্কোয়ারে বিভক্ত এবং প্রতিটি মাঝারি বর্গক্ষেত্র 16টি ছোট স্কোয়ারে বিভক্ত (চিত্র Ⅷ‑1C)। কাউন্টিং চেম্বারের স্পেসিফিকেশন যাই হোক না কেন, প্রতিটি বড় বর্গক্ষেত্রের মধ্যে ছোট বর্গক্ষেত্রের মোট সংখ্যা একই থাকে: 16 × 25=400 ছোট বর্গ, যেমন চিত্র Ⅷ‑2 এ দেখানো হয়েছে।
প্রতিটি বড় বর্গক্ষেত্রের দৈর্ঘ্য 1 মিমি, যার ক্ষেত্রফল 1 মিমি²। কভারস্লিপ রাখার পরে, স্লাইড এবং কভারস্লিপের মধ্যে উচ্চতা 0.1
মিমি; অতএব, গণনা চেম্বারের আয়তন হল 0.1 মিমি³।
গণনার জন্য, পাঁচটি মাঝারি বর্গক্ষেত্রে মোট অণুজীবের সংখ্যা সাধারণত গণনা করা হয়। প্রতিটি মাঝারি বর্গক্ষেত্রের গড় মান তারপর গণনা করা হয় এবং একটি বড় বর্গক্ষেত্রের মধ্যে মোট গণনা পেতে 16 বা 25 দ্বারা গুণ করা হয়। অবশেষে, এই মানটি ব্যাকটেরিয়াল সাসপেনশনের 1 এমএল অণুজীবের মোট সংখ্যায় রূপান্তরিত হয়।
