জৈবিক মাইক্রোস্কোপ ব্যবহার করে টিস্যু ব্লক ভলিউম পরিমাপ
এখন পর্যন্ত, টিস্যু এবং কোষের X-রে মাইক্রোস্কোপির জন্য ক্রায়োফিক্সেশন, হিমায়িত অতি-পাতলা সেকশনিং, এবং ফ্রিজ-শুকানো হল রুটিন পদ্ধতি৷ এই পদ্ধতি সম্পর্কে নিম্নলিখিত বিবরণ প্রদান করুন:
একটি স্পটলাইট সহ একটি জৈবিক মাইক্রোস্কোপ মাঝারি উজ্জ্বলতা অর্জনের জন্য স্পটলাইটকে উপরে এবং নীচে নিয়ে যেতে পারে এবং মাঝারি উজ্জ্বলতা অর্জনের জন্য পরিবর্তনশীল অ্যাপারচারের অ্যাপারচারও পরিবর্তন করা যেতে পারে। যদি আলো সূর্য থেকে হয়, তাহলে স্পটলাইট যথাযথভাবে বাড়ানো যায় এবং পরিবর্তনশীল আলোর অ্যাপারচার যথাযথভাবে বড় করা যায়। আলো খুব শক্তিশালী হলে, স্পটলাইট যথাযথভাবে কমানো যেতে পারে, এবং ছেদটির ছিদ্র যথাযথভাবে হ্রাস করা যেতে পারে। আপনি যদি এই পরিস্থিতিতে এখনও চমকপ্রদ বোধ করেন তবে আপনি স্পটলাইটের নীচে বন্ধনীতে একটি উপযুক্ত ফিল্টার স্থাপন করতে পারেন। এই ওক একটি উজ্জ্বলতা অর্জন করতে পারে যা আপনাকে সন্তুষ্ট করে। অবশ্যই, স্পটলাইটের উপরের এবং নীচের অবস্থানগুলি সামঞ্জস্য করা আলো পড়ার অ্যাপারচারের আকার পরিবর্তন করতে পারে এবং উপযুক্ত ফিল্টারগুলি নির্বাচন করতে পারে, যার জন্য একটি নির্দিষ্ট সময়ের অনুশীলন এবং অভিজ্ঞতা প্রয়োজন।
জৈবিক মাইক্রোস্কোপিতে একটি অত্যন্ত গুরুত্বপূর্ণ বিষয় হল কোষের নমুনা এবং বিচ্ছিন্ন করার প্রক্রিয়া। হিমায়িত-শুকানো এবং রজন এম্বেডিং (FD) করার পরে, হিমায়িত অতি-বিভাগগুলিকে অবশ্যই সাবধানে প্রক্রিয়া করা উচিত যাতে প্রতিটি অংশের 65টি উপাদানের বিষয়বস্তু পর্যবেক্ষণ এবং বিশ্লেষণের সময় ক্ষতিগ্রস্ত না হয়৷ এক্স-এক্স-রে মাইক্রোঅ্যানালাইসিসের সাথে জড়িত অসংখ্য পদক্ষেপ এবং উচ্চ খরচের কারণে, দীর্ঘায়িত এবং বহু-পদক্ষেপ প্রক্রিয়াকরণের পরে বিশ্লেষণ করা কোষগুলি ক্ষতিগ্রস্ত বা মৃত হলে ভুল সিদ্ধান্তে আসা দুঃখজনক। জেলটিনেস চিকিত্সার মাধ্যমে পৃথক করা মায়োকার্ডিয়াল কোষগুলির দুটি রূপ রয়েছে, একটি লম্বা রড-আকৃতির এবং অন্যটি বৃত্তাকার। পরেরটি মৃত কোষকে বোঝায় যেগুলি কোষ বিচ্ছেদ প্রক্রিয়ার সময় ক্ষতিগ্রস্ত হয়।
জৈবিক অণুবীক্ষণ যন্ত্রের অধীনে এই দুই ধরণের কোষে ইলেক্ট্রোলাইটগুলির বিষয়বস্তু এবং বিতরণ খুব আলাদা। বৃত্তাকার কার্ডিওমায়োসাইটগুলিতে Na খুব বেশি এবং K অত্যন্ত কম, এবং লিনিয়ার ডেনড্রাইটে Ca এর ঘনত্ব খুব বেশি। অন্যান্য বিশ্লেষণাত্মক পদ্ধতির সাথে যাচাই করার পরে, এটি প্রমাণিত হয়েছে যে বৃত্তাকার কোষে উচ্চ Na এবং নিম্ন K এবং মাইটোকন্ড্রিয়াতে উচ্চ Ca কোষ বিচ্ছেদের সময় ঝিল্লির ক্ষতির ফলাফল। কোষ এবং টিস্যুগুলির জন্য ঠান্ডা স্থিরকরণ পদ্ধতিতে প্রায়শই প্রথমে নিভিয়ে ফেলা হয় এবং তারপরে তরল নাইট্রোজেনে সংরক্ষণ করা হয়। সংরক্ষণের প্রভাবের জন্য স্থির নির্গমন অত্যন্ত গুরুত্বপূর্ণ। জীবন্ত কোষ বা তাজা টিস্যু পানিতে সমৃদ্ধ, এবং নিভে গেলে, কোষ বা টিস্যুগুলির অংশগুলি যেগুলি রেফ্রিজারেন্টের সাথে সরাসরি সংস্পর্শে আসে (বিশেষত যখন শীতল করার জন্য তরল নাইট্রোজেন ব্যবহার করা হয়) প্রায়শই হিমায়িত হয় এবং প্রথমে স্থির হয়, একটি "শেল" তৈরি করে যা কোষের কেন্দ্রীয় অংশকে চূর্ণ হতে বাধা দেয়। তাই, X-রে মাইক্রোঅ্যানালাইসিস পরিচালনা করার সময়, এটি প্রায়শই পাওয়া যায় যে বৃহত্তর কোষগুলির কেন্দ্রীয় অংশে বরফ স্ফটিক বিদ্যমান। এই পরিস্থিতি যাতে না ঘটে তার জন্য, তরল নাইট্রোজেনের চেয়ে গলনাঙ্ক বেশি কিন্তু 806c কম এমন একটি পদার্থকে রেফ্রিজারেন্ট হিসেবে ব্যবহার করা হয়। এই পদার্থগুলির মধ্যে অনেকগুলি রয়েছে, তবে সেগুলি পাওয়া সহজ এবং সবচেয়ে সাশ্রয়ী হল ঘনীভূত প্রোপেন (স্ফুটনাঙ্ক 42.120c, গলনাঙ্ক 187.10c, আণবিক ওজন 44.1), যার দ্রুত শীতল হওয়ার হারও রয়েছে। কিন্তু এর অসুবিধা হল এটি দাহ্য।
