মাইক্রোবিয়াল পরিমাণ পরিমাপ - মাইক্রোস্কোপিক সরাসরি গণনা পদ্ধতি!
ব্যাকটেরিয়া জনসংখ্যার বৃদ্ধি কোষের সংখ্যা বৃদ্ধি বা সেলুলার উপাদান বৃদ্ধি দ্বারা চিহ্নিত করা হয়। প্রত্যক্ষ মাইক্রোস্কোপিক গণনা, প্লেট গণনা, স্পেকট্রোফটোমিটার দ্বারা টার্বোমেট্রি, সর্বাধিক সম্ভাব্য সংখ্যা MPN, এবং ঝিল্লি পরিস্রাবণ সহ কোষ সংখ্যা পরিমাপের জন্য বিভিন্ন পদ্ধতি রয়েছে। সেলুলার পদার্থ পরিমাপের পদ্ধতির মধ্যে রয়েছে কোষের শুষ্ক ওজন পরিমাপ করা, কোষের নির্দিষ্ট কিছু উপাদান যেমন নাইট্রোজেন, আরএনএ এবং ডিএনএ এর বিষয়বস্তু পরিমাপ করা এবং বিপাকীয় পণ্য পরিমাপ করা। সংক্ষেপে, মাইক্রোবিয়াল বৃদ্ধি পরিমাপের জন্য অনেকগুলি পদ্ধতি রয়েছে, যার প্রত্যেকটির নিজস্ব সুবিধা এবং অসুবিধা রয়েছে এবং নির্বাচনটি কাজের নির্দিষ্ট প্রয়োজনীয়তার উপর ভিত্তি করে হওয়া উচিত। এই পরীক্ষাটি প্রধানত উত্পাদন এবং বৈজ্ঞানিক গবেষণার কাজে সাধারণত ব্যবহৃত মাইক্রোস্কোপ সরাসরি গণনা পদ্ধতি প্রবর্তন করে।
উদ্দেশ্য প্রয়োজনীয়তা
1. গণনার জন্য রক্তের কোষ গণনা বোর্ড ব্যবহার করার নীতিটি স্পষ্ট করুন।
2. মাইক্রোবিয়াল গণনার জন্য একটি রক্ত কোষ গণনা বোর্ড ব্যবহার করার পদ্ধতি আয়ত্ত করুন।
2, মৌলিক নীতি
মাইক্রোস্কোপিক ডাইরেক্ট কাউন্টিং পদ্ধতি হল একটি সহজ, দ্রুত এবং স্বজ্ঞাত পদ্ধতি যা একটি নির্দিষ্ট এলাকা এবং আয়তনের সাথে একটি বিশেষ কাচের স্লাইডে স্থাপন করে একটি মাইক্রোস্কোপের নীচে একটি নমুনার অল্প পরিমাণ সাসপেনশন সরাসরি গণনা করে (এটি ব্যাকটেরিয়াল কাউন্টার নামেও পরিচিত)। বর্তমানে, দেশে এবং বিদেশে সাধারণত ব্যবহৃত ব্যাকটেরিয়া গণনা ডিভাইসগুলির মধ্যে রয়েছে রক্তের কোষ গণনা প্লেট, Peteroff Hauser ব্যাকটেরিয়া গণনা ডিভাইস, এবং Hawksley ব্যাকটেরিয়া গণনা ডিভাইস, যার সবকটিই খামির, ব্যাকটেরিয়া, ছত্রাকের স্পোর ইত্যাদির সাসপেনশন গণনার জন্য ব্যবহার করা যেতে পারে। একই মৌলিক নীতির সাথে। পরবর্তী দুই ধরনের ব্যাকটেরিয়া কাউন্টারে একটি কভার গ্লাস দিয়ে আচ্ছাদিত হওয়ার পর মোট আয়তন {{0}}.02mm3 এবং কভার গ্লাস এবং ক্যারিয়ার স্লাইডের মধ্যে দূরত্ব মাত্র 0.02mm। অতএব, একটি তেল নিমজ্জন উদ্দেশ্য ব্যাকটেরিয়া যেমন ছোট কোষ পর্যবেক্ষণ এবং গণনা ব্যবহার করা যেতে পারে। এই ব্যাকটেরিয়া কাউন্টারগুলি ব্যবহার করার পাশাপাশি, একটি অনুবীক্ষণ যন্ত্রের নীচে স্মিয়ার এরিয়া থেকে ফিল্ড এরিয়ার অনুপাত সরাসরি পর্যবেক্ষণ করার জন্য একটি অনুমান পদ্ধতিও রয়েছে, যা সাধারণত দুধের ব্যাকটেরিয়া পরীক্ষা করার জন্য ব্যবহৃত হয়। একটি অণুবীক্ষণ যন্ত্রের সাহায্যে সরাসরি গণনার সুবিধাগুলি স্বজ্ঞাত, দ্রুত এবং পরিচালনা করা সহজ। কিন্তু এই পদ্ধতির অসুবিধা হল মাপা ফলাফল সাধারণত মৃত এবং জীবিত কোষের যোগফল। বর্তমানে, এমন কিছু পদ্ধতি রয়েছে যা এই ত্রুটিটি কাটিয়ে উঠতে পারে, যেমন লাইভ সেল স্টেনিং চেম্বার কালচারের সংমিশ্রণ (স্বল্প সময়) এবং শুধুমাত্র জীবিত কোষ গণনা করার লক্ষ্য অর্জনের জন্য কোষ বিভাজন ইনহিবিটার যোগ করা।
একটি অণুবীক্ষণ যন্ত্রের অধীনে সরাসরি গণনার জন্য একটি উদাহরণ হিসাবে একটি রক্ত কোষ গণনা বোর্ড ব্যবহার করে। অন্য দুটি ব্যাকটেরিয়া কাউন্টারের ব্যবহার পদ্ধতি বিভিন্ন নির্মাতাদের ম্যানুয়ালগুলিতে পাওয়া যাবে। ব্লাড সেল কাউন্টিং প্লেট ব্যবহার করে মাইক্রোস্কোপের নিচে সরাসরি গণনা মাইক্রোবিয়াল গণনার জন্য একটি সাধারণভাবে ব্যবহৃত পদ্ধতি। গণনা বোর্ড হল একটি বিশেষভাবে তৈরি কাচের স্লাইড যার চারটি খাঁজ যার উপর তিনটি প্ল্যাটফর্ম তৈরি করে; মাঝখানে প্রশস্ত প্ল্যাটফর্মটি একটি ছোট অনুভূমিক খাঁজ দ্বারা দুটি ভাগে বিভক্ত এবং প্ল্যাটফর্মের প্রতিটি পাশে একটি গ্রিড রয়েছে। প্রতিটি গ্রিড নয়টি বড় গ্রিডে বিভক্ত, এবং মাঝখানে বড় গ্রিডটি গণনা ঘর। রক্তকণিকা গণনা প্লেটের গঠন l{{0}} চিত্রে দেখানো হয়েছে। গণনা কক্ষের স্কেল সাধারণত দুটি নির্দিষ্টকরণ আছে. একটি হল একটি বড় বর্গক্ষেত্রকে 25টি মধ্য বর্গক্ষেত্রে বিভক্ত করা হয়েছে এবং প্রতিটি বর্গকে আরও 16টি ছোট বর্গক্ষেত্রে বিভক্ত করা হয়েছে (চিত্র 15-2); আরেকটি পদ্ধতি হল একটি বড় বর্গকে 16টি মধ্য বর্গক্ষেত্রে বিভক্ত করা এবং প্রতিটি বর্গকে আরও 25টি ছোট বর্গক্ষেত্রে বিভক্ত করা হয়। যাইহোক, গণনা বোর্ডের আকার নির্বিশেষে, প্রতিটি বড় বর্গক্ষেত্রে 400টি ছোট বর্গ রয়েছে৷ প্রতিটি বর্গক্ষেত্রের বাহুর দৈর্ঘ্য 1 মিমি হলে, প্রতিটি বড় বর্গক্ষেত্রের ক্ষেত্রফল হবে lmm2। একটি কভার গ্লাস দিয়ে আচ্ছাদন করার পরে, কভার গ্লাস এবং স্লাইডের মধ্যে উচ্চতা 0.1 মিমি, তাই গণনা ঘরের আয়তন 0.1 মিমি 3 (এক মিলিলিটারের এক হাজার ভাগ)। চিত্র 15-1 ব্লাড সেল কাউন্টিং বোর্ডের গঠন (I) চিত্র 15-2 ব্লাড সেল কাউন্টিং বোর্ডের গঠন (II) একটি সামনের দৃশ্য; B. উল্লম্ব বিভাগ দৃশ্য; বর্ধিত গ্রিডের মাঝখানে গণনা কক্ষ হিসাবে একটি বড় বর্গক্ষেত্র রয়েছে 1. রক্তের কোষ গণনা বোর্ড; 2. কভার গ্লাস; গণনা কক্ষে গণনা করার সময়, মোট ব্যাকটেরিয়া গণনা সাধারণত পাঁচটি বর্গক্ষেত্রের জন্য গণনা করা হয়, তারপর প্রতিটি বর্গক্ষেত্রের গড় মান প্রাপ্ত হয়, 25 বা 16 দ্বারা গুণ করে একটি বড় বর্গক্ষেত্রে মোট ব্যাকটেরিয়া গণনা পাওয়া যায়, যা তারপরে রূপান্তরিত হয় এলএমএল ব্যাকটেরিয়া দ্রবণে মোট ব্যাকটেরিয়া গণনা। পাঁচটি বর্গাকার গ্রিডে মোট ব্যাকটেরিয়ার সংখ্যা হল A এবং ব্যাকটেরিয়া দ্রবণের তরলীকরণ ফ্যাক্টর হল B৷ যদি বর্গাকার গ্রিডে 25টি গণনা প্লেট থাকে, তাহলে ব্যাকটেরিয়া দ্রবণের 1mL-এ মোট ব্যাকটেরিয়ার সংখ্যা A/5 × 25 × 104 × B=50000A · B. একইভাবে, বর্গাকার গ্রিডে 16টি গণনা প্লেট থাকলে, ব্যাকটেরিয়া দ্রবণের 1mL মধ্যে মোট ব্যাকটেরিয়ার সংখ্যা A/5 × 16 × 104 × B=32000A · খ
