ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপি সনাক্তকরণ পদ্ধতি
ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ
ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপি হল ইমিউনোফ্লোরেসেন্স সাইটোকেমিস্ট্রির একটি মৌলিক হাতিয়ার। এটি আলোর উত্স, ফিল্টার প্লেট সিস্টেম এবং অপটিক্যাল সিস্টেমের মতো প্রধান উপাদানগুলির সমন্বয়ে গঠিত। এটি নমুনাকে উত্তেজিত করতে এবং ফ্লুরোসেন্স নির্গত করার জন্য আলোর একটি নির্দিষ্ট তরঙ্গদৈর্ঘ্য ব্যবহার করে, যা নমুনার ফ্লুরোসেন্স চিত্রটি পর্যবেক্ষণ করার জন্য একটি উদ্দেশ্য এবং আইপিস সিস্টেমের মাধ্যমে বড় করা হয় (চিত্র 1)।
(1) আলোর উৎস
আজকাল, একটি 200W অতি-উচ্চ চাপের পারদ বাতি সাধারণত আলোর উত্স হিসাবে ব্যবহৃত হয়। এটি কোয়ার্টজ গ্লাস দিয়ে তৈরি, মাঝখানে একটি গোলাকার আকৃতি এবং ভিতরে একটি নির্দিষ্ট পরিমাণ পারদ ভরা। অপারেশন চলাকালীন, দুটি ইলেক্ট্রোডের মধ্যে স্রাবের কারণে পারদ বাষ্পীভূত হয় এবং গোলকের ভিতরে চাপ দ্রুত বৃদ্ধি পায়। যখন পারদ সম্পূর্ণরূপে বাষ্পীভূত হয়, তখন এটি 50-70 মানক বায়ুমণ্ডলীয় চাপে পৌঁছাতে পারে, যা সাধারণত প্রায় 5-15 মিনিট সময় নেয়। অতি-উচ্চ চাপ পারদ বাতির আলোকসজ্জা হল ইলেক্ট্রোডের মধ্যে স্রাবের ফল, যা ক্রমাগত পারদ অণুগুলিকে বিচ্ছিন্ন করে এবং হ্রাস করে এবং ফোটন নির্গত করে। এটি শক্তিশালী অতিবেগুনী এবং নীল বেগুনি আলো নির্গত করে, যা বিভিন্ন ফ্লুরোসেন্ট পদার্থকে উত্তেজিত করার জন্য যথেষ্ট, তাই এটি ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপে ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয়।
ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ ব্যবহার করার জন্য সতর্কতা
(1) ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ কারখানার নির্দেশাবলী কঠোরভাবে অনুসরণ করুন এবং যথেচ্ছভাবে প্রোগ্রাম পরিবর্তন করবেন না।
(2) একটি অন্ধকার ঘরে পরিদর্শন করা উচিত। অন্ধকার ঘরে প্রবেশ করার পরে, পাওয়ার সংযোগ করুন এবং অতি-উচ্চ চাপের পারদ বাতি 5-15 মিনিটের জন্য জ্বালান৷ আলোর উত্স শক্তিশালী আলো নির্গত করার পরে এবং স্থিতিশীল হওয়ার পরে, নমুনাটি পর্যবেক্ষণ করা শুরু করার আগে চোখগুলিকে অন্ধকার ঘরে পুরোপুরি মানিয়ে নেওয়া উচিত।
(3) চোখের UV ক্ষতি রোধ করতে, আলোর উৎস সামঞ্জস্য করার সময় প্রতিরক্ষামূলক চশমা পরা উচিত।
(4) প্রতিবার পরিদর্শনের সময় 1-2 ঘন্টা হওয়া উচিত। যদি এটি 90 মিনিটের বেশি হয়, অতি-উচ্চ চাপ পারদ বাতির আলোকিত তীব্রতা ধীরে ধীরে হ্রাস পায় এবং প্রতিপ্রভা দুর্বল হয়; 3-5 দিনের জন্য অতিবেগুনী বিকিরণের সংস্পর্শে আসা নমুনাগুলি
মিনিটের পরে, ফ্লুরোসেন্সও উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে; সুতরাং, সর্বোচ্চ সময়কাল 2-3 ঘণ্টার বেশি হওয়া উচিত নয়।
(5) ফ্লুরোসেন্ট মাইক্রোস্কোপ আলোর উৎসের জীবনকাল সীমিত, এবং সময় বাঁচাতে নমুনাটি কেন্দ্রীয়ভাবে পরীক্ষা করা উচিত
সময় বাঁচান এবং আলোর উৎস রক্ষা করুন। আবহাওয়া গরম হলে, তাপ নষ্ট করতে এবং ঠান্ডা করার জন্য একটি বৈদ্যুতিক পাখা যোগ করতে হবে। একটি নতুন লাইট বাল্ব প্রতিস্থাপন করার সময়, ব্যবহারের সময় শুরু থেকে রেকর্ড করা উচিত। যখন আলোটি বন্ধ হয়ে যায় এবং আপনি এটি আবার ব্যবহার করতে চান, তখন আপনাকে আলোর বাল্বটি জ্বালানোর আগে পর্যাপ্ত পরিমাণে ঠান্ডা হওয়ার জন্য অপেক্ষা করতে হবে। দিনে কয়েকবার আলোর উৎস আলো জ্বালানো এড়িয়ে চলুন।
(6) দাগ লাগার পরপরই নমুনাটি পর্যবেক্ষণ করুন, কারণ সময়ের সাথে সাথে ফ্লুরোসেন্স ধীরে ধীরে দুর্বল হয়ে যাবে। যদি নমুনাটি একটি পলিথিন প্লাস্টিকের ব্যাগে 4 ডিগ্রীতে সংরক্ষণ করা হয় তবে এটি ফ্লুরোসেন্স অ্যাটেন্যুয়েশন সময়কে বিলম্বিত করতে পারে এবং মাউন্টিং এজেন্টের বাষ্পীভবন রোধ করতে পারে।
(7) ফ্লুরোসেন্স উজ্জ্বলতার বিচারের মানদণ্ডকে সাধারণত চারটি স্তরে বিভক্ত করা হয়, যথা "এক" - নেই বা দৃশ্যমান দুর্বল ফ্লুরোসেন্স। "+" - শুধুমাত্র দৃশ্যমান ফ্লুরোসেন্স দৃশ্যমান। ++- উজ্জ্বল ফ্লুরোসেন্স সহ দৃশ্যমান। "+++" - দৃশ্যমান এবং ঝলমলে ফ্লুরোসেন্স।
