আলোক পথের নীতি অনুসারে ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপগুলিকে দুই প্রকারে ভাগ করা যায়:
1. ট্রান্সমিশন ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ
পুরানো ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপগুলিতে, উত্তেজনা আলোর উত্সটি ফ্লুরোসেন্সকে উত্তেজিত করার জন্য একটি কনডেন্সারের মাধ্যমে নমুনা উপাদানের মধ্য দিয়ে যায়। সুবিধা হল যে ফ্লুরোসেন্স কম ম্যাগনিফিকেশনে শক্তিশালী, কিন্তু অসুবিধা হল যে ম্যাগনিফিকেশন বাড়লে ফ্লুরোসেন্স দুর্বল হয়ে যায়। তাই এটি শুধুমাত্র বৃহত্তর নমুনা উপকরণ পর্যবেক্ষণের জন্য উপযুক্ত।
2.এপিফ্লুরেসেন্স মাইক্রোস্কোপি
উদ্দীপনা আলো বস্তুনিষ্ঠ লেন্স থেকে নমুনা পৃষ্ঠের উপর নিচের দিকে পড়ে, অর্থাৎ, একই উদ্দেশ্যমূলক লেন্স আলোকসজ্জা কনডেন্সার এবং প্রতিপ্রভ সংগ্রহের জন্য উদ্দেশ্যমূলক লেন্স হিসাবে ব্যবহৃত হয়।
অপটিক্যাল পাথে একটি ডাইক্রোয়িক বিম স্প্লিটার (ডাইক্রোইক মিরর) যোগ করতে হবে, যা অপটিক্যাল অক্ষের 45o কোণে থাকে। উত্তেজনা আলো বস্তুনিষ্ঠ লেন্সে প্রতিফলিত হয় এবং নমুনার উপর কেন্দ্রীভূত হয়। নমুনা দ্বারা উত্পন্ন ফ্লুরোসেন্স অবজেক্টিভ লেন্স এবং কভারের পৃষ্ঠ দ্বারা প্রতিফলিত হয়। কাচের স্লাইডের পৃষ্ঠে প্রতিফলিত উত্তেজনা আলো একই সময়ে উদ্দেশ্যমূলক লেন্সে প্রবেশ করে এবং উত্তেজনা আলো এবং প্রতিপ্রভাকে আলাদা করতে ডিক্রোয়িক বিম স্প্লিটারে ফিরে আসে। অবশিষ্ট উত্তেজনা আলো তারপর ব্লকিং ফিল্টার দ্বারা শোষিত হয়। আপনি যদি বিভিন্ন উত্তেজনা ফিল্টার/ডুয়াল-কালার বিম স্প্লিটার/ব্লকিং ফিল্টার কম্বিনেশন ইনসার্ট ব্যবহার করেন, আপনি বিভিন্ন ফ্লুরোসেন্স প্রতিক্রিয়া পণ্যের চাহিদা পূরণ করতে পারেন।
এই ধরণের ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপের সুবিধা হল যে দৃশ্যের ক্ষেত্রটি সমানভাবে আলোকিত, চিত্রটি পরিষ্কার এবং বৃহত্তর বিবর্ধন, ফ্লুরোসেন্স তত শক্তিশালী।
অপটিক্যাল মাইক্রোস্কোপের প্রধান শ্রেণী কি কি?
1. সাধারণ অপটিক্যাল মাইক্রোস্কোপ
সাধারণ অপটিক্যাল মাইক্রোস্কোপগুলি প্রধানত নিম্নলিখিত অংশগুলি নিয়ে গঠিত: আলোকসজ্জা ব্যবস্থা, যা আলোর উত্স এবং কনডেনসারকে জড়িত করে; অপটিক্যাল ম্যাগনিফিকেশন সিস্টেম, যা অবজেক্টিভ লেন্স এবং আইপিস নিয়ে গঠিত। এটি অণুবীক্ষণ যন্ত্রের সবচেয়ে গুরুত্বপূর্ণ অংশ এবং অত্যধিক গোলাকার বিকৃতি এবং ক্রোম্যাটিক বিকৃতি এড়াতে আইপিস এবং অবজেক্টিভ লেন্স উভয়ই জটিল লেন্স গ্রুপের সমন্বয়ে তৈরি করা হয়েছে।
2. লেজার কনফোকাল স্ক্যানিং মাইক্রোস্কোপ
লেজার কনফোকাল স্ক্যানিং মাইক্রোস্কোপ খুব উচ্চ-সম্পন্ন এবং জটিল শোনাচ্ছে। প্রকৃতপক্ষে, এটি সহজভাবে একটি স্ক্যানিং আলোর উত্স হিসাবে লেজার ব্যবহার করে দ্রুত স্ক্যান করতে এবং ইমেজ অবজেক্টগুলিকে বিন্দু দ্বারা, লাইন দ্বারা লাইন এবং পৃষ্ঠ দ্বারা পৃষ্ঠকে নির্দেশ করে।
লেজার রশ্মির সংক্ষিপ্ত তরঙ্গদৈর্ঘ্যের উপর ভিত্তি করে, মরীচিটি নিজেই খুব পাতলা, যা নির্ধারণ করে যে কনফোকাল লেজার স্ক্যানিং মাইক্রোস্কোপের উচ্চ রেজোলিউশন রয়েছে, যা একটি সাধারণ অপটিক্যাল মাইক্রোস্কোপের প্রায় তিনগুণ। এই ধরনের অণুবীক্ষণ যন্ত্রটি কোষের আকারবিদ্যা পর্যবেক্ষণ করতে এবং অন্তঃকোষীয় জৈব রাসায়নিক উপাদানগুলি পরিমাণগতভাবে বিশ্লেষণ করতে এবং কোষের রূপবিদ্যা পরিমাপ করতে ব্যবহৃত হয়।
3. ডার্ক ফিল্ড মাইক্রোস্কোপ
একটি অন্ধকার-ক্ষেত্র মাইক্রোস্কোপের কনডেন্সারের কেন্দ্রে একটি হালকা প্লেট রয়েছে, যা আলোকসজ্জার আলোকে উদ্দেশ্যমূলক লেন্সে সরাসরি প্রবেশ করতে বাধা দেয়। শুধুমাত্র নমুনা দ্বারা প্রতিফলিত এবং বিচ্ছুরিত আলোই বস্তুনিষ্ঠ লেন্সে প্রবেশ করতে পারে। অতএব, দেখার ক্ষেত্রের পটভূমি কালো এবং বস্তুর প্রান্ত উজ্জ্বল।
