অপটিক্যাল পাথ নীতি অনুসারে ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপগুলি দুটি প্রকারে বিভক্ত করা যেতে পারে:
1। ট্রান্সমিশন ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ
পুরানো ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপগুলি নমুনা উপাদানের মাধ্যমে উত্তেজনার আলো উত্সটি পাস করে ফ্লুরোসেন্সকে উত্তেজিত করতে স্পটলাইট ব্যবহার করে। এর সুবিধা হ'ল কম ম্যাগনিফিকেশনে শক্তিশালী ফ্লুরোসেন্স, তবে এর অসুবিধা হ'ল এর প্রতিপ্রভ ক্রমবর্ধমান ম্যাগনিফিকেশনের সাথে হ্রাস পায়। সুতরাং এটি কেবল বৃহত্তর নমুনা উপকরণ পর্যবেক্ষণের জন্য উপযুক্ত।
2। পতন হালকা ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ
উত্তেজনার আলো আলোকসজ্জা কনডেনসার হিসাবে একই উদ্দেশ্যমূলক লেন্স এবং ফ্লুরোসেন্স সংগ্রহের জন্য উদ্দেশ্যমূলক লেন্স ব্যবহার করে নমুনার পৃষ্ঠের দিকে উদ্দেশ্যমূলক লেন্স থেকে নেমে আসে।
একটি দ্বৈত রঙের মরীচি স্প্লিটার (ডাইক্রাইক মিরর) অপটিক্যাল পথে যুক্ত করা দরকার, যা অপটিক্যাল অক্ষের সাথে 45 ডিগ্রি কোণ তৈরি করে। উত্তেজনা আলো উদ্দেশ্যমূলক লেন্সে প্রতিফলিত হয় এবং নমুনায় ফোকাস করে। নমুনা দ্বারা উত্পাদিত প্রতিপ্রভ, পাশাপাশি উত্তেজনা আলো উদ্দেশ্য লেন্স এবং কভার কাচের পৃষ্ঠ থেকে প্রতিফলিত হয়, একই সাথে উদ্দেশ্যমূলক লেন্স প্রবেশ করে এবং উত্তেজনার আলো এবং প্রতিপ্রভাকে পৃথক করতে দ্বৈত রঙের মরীচি বিভক্তিতে ফিরে আসে। অবশিষ্ট উত্তেজনা আলো ফিল্টার শোষণ দ্বারা অবরুদ্ধ করা হয়। যদি উত্তেজনা ফিল্টারগুলির বিভিন্ন সংমিশ্রণ, দ্বৈত রঙের মরীচি বিভাজক এবং ব্লকিং ফিল্টার ব্যবহার করা হয় তবে তারা বিভিন্ন ফ্লুরোসেন্ট প্রতিক্রিয়া পণ্যগুলির চাহিদা পূরণ করতে পারে।
এই ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপের সুবিধাগুলি হ'ল অভিন্ন ক্ষেত্র আলোকসজ্জা, পরিষ্কার ইমেজিং এবং বৃহত্তর ম্যাগনিফিকেশন সহ শক্তিশালী প্রতিপ্রভ।
3। ফেজ কনট্রাস্ট মাইক্রোস্কোপ
ফেজ কনট্রাস্ট মাইক্রোস্কোপ হ'ল একটি মাইক্রোস্কোপ যা হালকা প্রশস্ততা (আলোর তীব্রতা) পরিবর্তনে কোনও বস্তুর মধ্য দিয়ে যায় যখন উত্পন্ন পর্যায়ের পার্থক্য (বা অপটিক্যাল পাথের পার্থক্য) রূপান্তর করতে পারে। মূলত লাইভ সেলগুলি, আনস্টেইনড টিস্যু বিভাগগুলি বা দাগযুক্ত নমুনাগুলির বিপরীতে অভাবের জন্য ব্যবহৃত হয়।
মানুষের চোখ কেবল তরঙ্গদৈর্ঘ্য (রঙ) এবং দৃশ্যমান আলোর প্রশস্ততা পরিবর্তন করতে পারে তবে পর্যায়ে পরিবর্তনগুলি আলাদা করতে পারে না। বেশিরভাগ জৈবিক নমুনাগুলি অত্যন্ত স্বচ্ছ, এবং হালকা তরঙ্গগুলির প্রশস্ততা কেবলমাত্র পর্যায়ের পরিবর্তনের সাথে মধ্য দিয়ে যাওয়ার পরে মূলত অপরিবর্তিত থাকে।
ফেজ কনট্রাস্ট মাইক্রোস্কোপটি মূলত দৃশ্যমান আলোর অপটিক্যাল পাথ পার্থক্যকে নমুনার মধ্য দিয়ে প্রশস্ততা পার্থক্যে রূপান্তরিত করে, যার ফলে বিভিন্ন কাঠামোর মধ্যে বৈসাদৃশ্যকে উন্নত করে এবং এগুলি পরিষ্কার এবং দৃশ্যমান করে তোলে। নমুনার মধ্য দিয়ে যাওয়ার পরে, আলোটি মূল অপটিক্যাল পাথ থেকে বিচ্যুত হয়ে 1/4 λ (তরঙ্গদৈর্ঘ্য) দ্বারা বিলম্বিত হয়ে রিফ্রাকশন সহ্য করে। যদি অপটিক্যাল পাথের পার্থক্যটি অন্য 1/4 λ দ্বারা বৃদ্ধি বা হ্রাস করা হয় তবে অপটিক্যাল পাথের পার্থক্যটি 1/2 λ হয়ে যায় এবং দুটি হালকা বিমের মধ্যে হস্তক্ষেপ অক্ষটি একত্রিত হওয়ার পরে বৃদ্ধি বা হ্রাস পায়, বৈসাদৃশ্যকে উন্নত করে।
