একটি মাইক্রোস্কোপ ব্যবহার করে অণুজীবের জন্য সরাসরি গণনা পদ্ধতি
একটি অণুবীক্ষণ যন্ত্রের নীচে অণুজীবগুলিকে সরাসরি গণনা করার জন্য একটি হিমোসাইটোমিটার ব্যবহার করা অণুজীব গণনার জন্য একটি সাধারণভাবে ব্যবহৃত পদ্ধতি। এই পদ্ধতির সুবিধা হল এর স্বজ্ঞাততা এবং গতি। হিমোসাইটোমিটার স্লাইড এবং কভার স্লাইডের মধ্যে গণনা চেম্বারে যথাযথভাবে মিশ্রিত ব্যাকটেরিয়া সাসপেনশন (বা স্পোর সাসপেনশন) রাখুন এবং একটি মাইক্রোস্কোপের নীচে গণনা করুন। গণনা কক্ষের ধ্রুবক আয়তনের কারণে (0.1 মিমি 2), মাইক্রোস্কোপের নীচে পর্যবেক্ষণ করা অণুজীবের সংখ্যার উপর ভিত্তি করে প্রতি ইউনিট আয়তনে মোট অণুজীবের সংখ্যা রূপান্তরিত করা যেতে পারে। এই পদ্ধতিটি জীবিত এবং মৃত ব্যাকটেরিয়া কোষের যোগফল গণনা করার কারণে, এটি মোট ব্যাকটেরিয়াল গণনা পদ্ধতি হিসাবেও পরিচিত।
একটি রক্ত কোষ গণনা প্লেট সাধারণত একটি বিশেষভাবে ডিজাইন করা কাচের স্লাইড যার চারটি খাঁজ তিনটি প্ল্যাটফর্ম তৈরি করে। মাঝের প্ল্যাটফর্মটি একটি ছোট অনুভূমিক খাঁজ দ্বারা অর্ধেক ভাগে বিভক্ত এবং প্ল্যাটফর্মের প্রতিটি পাশে একটি গ্রিড দিয়ে খোদাই করা হয়েছে। প্রতিটি গ্রিড নয়টি বড় স্কোয়ারে বিভক্ত, এবং মাঝখানে বড় বর্গক্ষেত্রটি গণনা কক্ষ, যেখানে জীবাণু গণনা করা হয়। রক্তকণিকা গণনা প্লেটের গঠন চিত্র VIII-1-এ দেখানো হয়েছে।
গণনা ঘরের স্কেলের জন্য সাধারণত দুটি নির্দিষ্টকরণ রয়েছে। একটি হল একটি বড় বর্গক্ষেত্রকে 16টি মধ্যম বর্গক্ষেত্রে বিভক্ত করা হয়েছে এবং প্রতিটি মধ্যম বর্গক্ষেত্রকে আরও 25টি ছোট বর্গক্ষেত্রে বিভক্ত করা হয়েছে (চিত্র VIII-2); আরেকটি পদ্ধতি হল একটি বড় বর্গক্ষেত্রকে 25টি মধ্য বর্গক্ষেত্রে ভাগ করা এবং প্রতিটি মধ্যম বর্গক্ষেত্রকে আরও 16টি ছোট বর্গক্ষেত্রে বিভক্ত করা হয় (চিত্র VIII -1, C)। কিন্তু গণনা বোর্ডের আকার নির্বিশেষে, প্রতিটি বড় বর্গক্ষেত্রে ছোট বর্গক্ষেত্রের সংখ্যা একই, অর্থাৎ 16 × 25=400 ছোট বর্গক্ষেত্র, যেমন চিত্র VIII-2 এ দেখানো হয়েছে।
প্রতিটি বড় বর্গক্ষেত্রের বাহুর দৈর্ঘ্য 1 মিমি হলে, প্রতিটি বড় বর্গক্ষেত্রের ক্ষেত্রফল 1 মিমি 2। একটি কভার গ্লাস দিয়ে আচ্ছাদন করার পরে, স্লাইড এবং কভার গ্লাসের মধ্যে উচ্চতা 0.1 মিমি, তাই গণনা ঘরের আয়তন 0.1 মিমি 3।
গণনা করার সময়, পাঁচটি বর্গক্ষেত্রে মোট ব্যাকটেরিয়ার সংখ্যা সাধারণত গণনা করা হয় এবং তারপর প্রতিটি বর্গক্ষেত্রের গড় মান পাওয়া যায়। এটিকে 16 বা 25 দ্বারা গুণ করলে একটি বড় বর্গক্ষেত্রে ব্যাকটেরিয়ার মোট সংখ্যা পাওয়া যায়, যা ব্যাকটেরিয়া দ্রবণের 1ml ব্যাকটেরিয়ার মোট সংখ্যায় রূপান্তরিত হয়।
