ফেজ কন্ট্রাস্ট মাইক্রোস্কোপির জন্য ডিবাগিং পদ্ধতি এবং পদক্ষেপ
ক কুহলার লাইটিং সিস্টেম সামঞ্জস্য করার ভিত্তিতে, নমুনা পরিষ্কারভাবে ফোকাস করতে উজ্জ্বল ক্ষেত্রের পদ্ধতি ব্যবহার করুন;
খ. স্পটলাইটটিকে Ph1 এ ঘুরিয়ে দিন এবং টার্নটেবলের স্কেল লাইনের সাথে সারিবদ্ধ করুন। একটি 10 x ফেজ বৈপরীত্য উদ্দেশ্য নির্বাচন করুন এবং এটিকে স্বচ্ছ নমুনার সাথে প্রতিস্থাপন করুন যা পর্যবেক্ষণ করা হবে;
গ. আইপিসগুলির একটি সরান, এটিকে একটি কেন্দ্রীভূত টেলিস্কোপ দিয়ে প্রতিস্থাপন করুন এবং দৃশ্যের ক্ষেত্রের দুটি কনট্রাস্ট রিংগুলিতে ফোকাস করুন (অবজেক্টিভ লেন্সের কালো কনট্রাস্ট রিং এবং কনডেনসার লেন্সের ট্রান্সমিটেন্স কনট্রাস্ট রিং);
d দৃশ্যের ক্ষেত্রে দুটি পার্থক্য রিং অগত্যা মিলিত নাও হতে পারে। স্পটলাইটে দুটি সামঞ্জস্য ডিভাইস সামঞ্জস্য করুন (সামনের এবং পিছনের অবস্থানগুলি সামঞ্জস্য করার জন্য সামঞ্জস্য রড এবং ঘর্ষণ প্রকারের নবগুলির সাথে পার্থক্য রিংগুলির বাম এবং ডান অবস্থানগুলি সামঞ্জস্য করা), যাতে স্বচ্ছ রিংটি কালো রিংয়ের সাথে মিলে যাওয়ার জন্য পিছনে পিছনে চলে যায়। ;
e সামঞ্জস্য করার পরে, পর্যবেক্ষণ আইপিসে ফিরে যান এবং নমুনার ফেজ পার্থক্য চিত্রটি পর্যবেক্ষণ করতে অপটিক্যাল পথে সবুজ ফিল্টার টিপুন;
চ 20 x এবং 40 x অবজেক্টিভ লেন্স দিয়ে পর্যবেক্ষণ করার সময়, স্পটলাইটটি Ph2 অবস্থানে সেট করা উচিত এবং 100 x অবজেক্টিভ লেন্স ব্যবহার করার সময়, স্পটলাইটটি Ph3 অবস্থানে সেট করা উচিত।
প্রয়োগের সুযোগ: স্বচ্ছ, দাগহীন বা দাগহীন নমুনা যেমন বিভিন্ন কোষ, জীবন্ত টিস্যু, দাগহীন বা দাগহীন টিস্যু স্লাইস, জলজ জীব ইত্যাদি পর্যবেক্ষণের জন্য উপযুক্ত।
ফেজ কনট্রাস্ট মাইক্রোস্কোপের মূল নীতি
আলো যখন অপেক্ষাকৃত স্বচ্ছ নমুনার মধ্য দিয়ে যায়, তখন আলোর তরঙ্গদৈর্ঘ্য (রঙ) এবং প্রশস্ততা (উজ্জ্বলতা) কোন উল্লেখযোগ্য পরিবর্তন হয় না। তাই, নিয়মিত অপটিক্যাল মাইক্রোস্কোপের অধীনে দাগহীন নমুনা (যেমন জীবন্ত কোষ) পর্যবেক্ষণ করার সময়, তাদের অঙ্গসংস্থানবিদ্যা এবং অভ্যন্তরীণ গঠন পার্থক্য করা প্রায়শই কঠিন হয়। যাইহোক, কোষের বিভিন্ন অংশের প্রতিসরণ সূচক এবং পুরুত্বের পার্থক্যের কারণে, এই নমুনার মধ্য দিয়ে যাওয়ার সময় প্রত্যক্ষ এবং বিচ্ছুরিত আলোর অপটিক্যাল পথে পার্থক্য থাকবে। অপটিক্যাল পথ যত বাড়বে বা কমবে, আলোক তরঙ্গের ত্বরান্বিত বা পিছিয়ে যাওয়ার পর্যায় পরিবর্তন হবে (ফজ পার্থক্যের ফলে)। আলোর ফেজ পার্থক্য খালি চোখে অনুভব করা যায় না, তবে ফেজ ডিফারেন্স মাইক্রোস্কোপ তার বিশেষ ডিভাইস - একটি বৃত্তাকার অ্যাপারচার এবং একটি ফেজ প্লেট ব্যবহার করতে পারে এবং আলোর ফেজ পার্থক্যকে একটি প্রশস্ততা পার্থক্যে রূপান্তর করতে আলোর হস্তক্ষেপের ঘটনা ব্যবহার করতে পারে। (আলো এবং অন্ধকার পার্থক্য) যা মানুষের চোখ দ্বারা সনাক্ত করা যেতে পারে। এটি মূলত স্বচ্ছ বস্তুটিকে সুস্পষ্ট আলো এবং অন্ধকারের পার্থক্য দেখায়, বৈসাদৃশ্য বাড়ায় এবং আমাদেরকে পরিষ্কারভাবে জীবিত কোষ এবং কোষের অভ্যন্তরে নির্দিষ্ট সূক্ষ্ম কাঠামো পর্যবেক্ষণ করতে দেয় যা সাধারণ অপটিক্যাল মাইক্রোস্কোপ এবং অন্ধকার ক্ষেত্রের মাইক্রোস্কোপের অধীনে দেখা যায় না বা স্পষ্টভাবে দেখা যায় না।
একটি ফেজ কন্ট্রাস্ট মাইক্রোস্কোপের ইমেজিং নীতি: অপটিক্যাল উত্স শুধুমাত্র একটি বৃত্তাকার অ্যাপারচারের একটি স্বচ্ছ বলয়ের মধ্য দিয়ে যেতে পারে, যা পরে আলোর মরীচিতে ফোকাস করা হয়। যখন আলোর এই রশ্মি পরীক্ষা করা বস্তুর মধ্য দিয়ে যায়, তখন প্রতিটি অংশের বিভিন্ন অপটিক্যাল পাথের কারণে এটি বিভিন্ন মাত্রার বিচ্যুতি (বিচ্যুতি) অতিক্রম করে। এই কারণে যে স্বচ্ছ রিং দ্বারা গঠিত চিত্রটি ফেজ প্লেটের কনজুগেট পৃষ্ঠ এবং উদ্দেশ্য লেন্সের পিছনে ফোকাল সমতলের সাথে মিলে যায়। অতএব, প্রত্যক্ষ আলো যা বিচ্যুত হয়নি তা সংযোগকারী পৃষ্ঠের মধ্য দিয়ে যায়, অন্যদিকে বিচ্যুত আলো ক্ষতিপূরণকারী পৃষ্ঠের মধ্য দিয়ে যায়। ফেজ প্লেটে কনজুগেট পৃষ্ঠ এবং ক্ষতিপূরণ পৃষ্ঠের বিভিন্ন বৈশিষ্ট্যের কারণে, তারা যথাক্রমে একটি নির্দিষ্ট ফেজ পার্থক্য এবং এই দুটি অংশের মধ্য দিয়ে যাওয়া আলোর তীব্রতা হ্রাস করবে। আলোর দুটি সেট তখন পিছনের লেন্সের মাধ্যমে একত্রিত হবে এবং একই অপটিক্যাল পথে ভ্রমণ করবে, যার ফলে প্রত্যক্ষ এবং বিচ্ছুরিত আলোর মধ্যে হস্তক্ষেপ ঘটবে, ফেজ পার্থক্যকে প্রশস্ততার পার্থক্যে পরিবর্তন করবে। এইভাবে, ফেজ কন্ট্রাস্ট মাইক্রোস্কোপির সময়, ফেজ পার্থক্য যা মানুষের চোখ দ্বারা আলাদা করা যায় না তা একটি প্রশস্ততা পার্থক্য (উজ্জ্বলতার পার্থক্য) এ রূপান্তরিত হয় যা একটি বর্ণহীন স্বচ্ছ দেহের আলোর মাধ্যমে মানুষের চোখ দ্বারা আলাদা করা যায়।
