মাল্টিফোটন লেজার-স্ক্যানিং মাইক্রোস্কোপির সুবিধা এবং সীমাবদ্ধতা
সুবিধা
① উত্তেজনা লাল বা ইনফ্রারেড আলো দিয়ে সঞ্চালিত হয়, যার ফলে কম আলো ছড়িয়ে পড়ে। ছোট কণা দ্বারা বিক্ষিপ্ত হওয়া তরঙ্গদৈর্ঘ্যের চতুর্থ শক্তির বিপরীতভাবে সমানুপাতিক।
② কোন পিনহোলের প্রয়োজন নেই, ইমেজিং প্লেন থেকে আরও বিক্ষিপ্ত ফোটন সংগ্রহ করতে সক্ষম করে।
③ একটি পিনহোল ফোকাসের বাইরের অঞ্চল বা ফোকাল পয়েন্ট থেকে নির্গত বিক্ষিপ্ত ফোটনকে আলাদা করতে পারে না। মাল্টিফোটন মাইক্রোস্কোপি গভীর ইমেজিংয়ের জন্য একটি চমৎকার সংকেত-টু-শব্দ অনুপাত অর্জন করে।
④ একক-ফোটন উত্তেজনার জন্য ব্যবহৃত আল্ট্রাভায়োলেট বা দৃশ্যমান আলো বীম ফোকাল প্লেনে পৌঁছানোর আগে নমুনা দ্বারা শোষিত এবং ক্ষয় হয়ে যায়, যা গভীর-স্তর উত্তেজনাকে কঠিন করে তোলে।
⑤ জৈবিক মাইক্রোস্কোপিক পর্যবেক্ষণের জন্য, প্রাথমিক বিবেচনা হল নমুনার জৈবিক কার্যকলাপ সংরক্ষণ করা, আর্দ্রতা বজায় রাখা, আয়নের ঘনত্ব এবং অক্সিজেন ও পুষ্টির সঞ্চালন। অপটিক্যাল পর্যবেক্ষণের জন্য, তাপ এবং ফোটন শক্তি উভয়কেই বিকিরণ মাত্রার মধ্যে রাখতে হবে যা কোষের ক্ষতি করে না।
⑥ মাল্টিফোটন মাইক্রোস্কোপের আরও অনেক গুণ রয়েছে। 3D রেজোলিউশন, গভীর অনুপ্রবেশ, বিক্ষিপ্ত দক্ষতা, পটভূমি আলো, সংকেত থেকে শব্দ অনুপাত এবং নিয়ন্ত্রণযোগ্যতার পরিপ্রেক্ষিতে, তারা প্রচলিত লেজার মাইক্রোস্কোপের অনুপলব্ধ বা অতুলনীয় উচ্চতর বৈশিষ্ট্যের অধিকারী।
মাল্টিফোটন কনফোকাল লেজার-স্ক্যানিং মাইক্রোস্কোপগুলি বিভিন্ন গবেষণা এবং প্রয়োগ ক্ষেত্রে প্রসারিত করা হয়েছে। তারা প্রাকৃতিক অবস্থার অধীনে নমুনাগুলির ত্রি-মাত্রিক অ-আক্রমণাত্মক পর্যবেক্ষণ সক্ষম করে এবং সিস্টেমের রেজোলিউশন এবং সংকেত-টু-শব্দ অনুপাত উন্নত করে। মাল্টিফোটন উত্তেজনা দ্বারা প্রবর্তিত উপাদান বৈশিষ্ট্যের পরিবর্তনগুলিকে কাজে লাগিয়ে, 3D উচ্চ-ঘনত্বের ডেটা সঞ্চয়স্থান এবং নির্বিচারে ত্রিমাত্রিক দিকনির্দেশে মাইক্রোফ্যাব্রিকেশনও উপলব্ধি করা যেতে পারে, উচ্চ প্রয়োগের মান উপস্থাপন করে। এটি প্রত্যাশিত যে মেকানিক্স, উপকরণ, লেজার প্রযুক্তি এবং মাল্টিফোটন কনফোকাল মাইক্রোস্কোপি সম্পর্কিত অন্যান্য ক্ষেত্রের আরও অগ্রগতির সাথে, মাল্টিফোটন কনফোকাল লেজার-স্ক্যানিং মাইক্রোস্কোপগুলি বৃহত্তর বিকাশ এবং ব্যাপক প্রয়োগ অর্জন করবে।
সীমাবদ্ধতা
① এটি শুধুমাত্র ফ্লুরোসেন্স ইমেজিং সমর্থন করে।
② যদি নমুনায় ক্রোমোফোরস থাকে যা উত্তেজনার আলো (যেমন রঙ্গক) শোষণ করে, নমুনার তাপীয় ক্ষতি হতে পারে।
③ রেজোলিউশন কিছুটা কমে গেছে। যদিও এটি একই সাথে একটি কনফোকাল পিনহোল গ্রহণ করে উন্নত করা যেতে পারে, সংকেত ক্ষতি ঘটবে।
④ ব্যয়বহুল আল্ট্রাফাস্ট লেজার দ্বারা সীমাবদ্ধ, মাল্টিফোটন স্ক্যানিং মাইক্রোস্কোপগুলি তুলনামূলকভাবে উচ্চ খরচে আসে।
