মাল্টিফোটন লেজার স্ক্যানিং মাইক্রোস্কোপের সুবিধা এবং সীমাবদ্ধতা
① উত্তেজনা লাল বা ইনফ্রারেড আলো দিয়ে সঞ্চালিত হয়, যার ফলে কম আলো ছড়িয়ে পড়ে। ছোট কণা দ্বারা বিক্ষিপ্ত হওয়া তরঙ্গদৈর্ঘ্যের চতুর্থ শক্তির বিপরীতভাবে সমানুপাতিক।
② একটি পিনহোল ছাড়া, ইমেজিং প্লেন থেকে আরও বিক্ষিপ্ত ফোটন সংগ্রহ করা যেতে পারে।
③ পিনহোলগুলি ফোকাসের বাইরের অঞ্চল বা ফোকাল পয়েন্ট থেকে নির্গত বিক্ষিপ্ত ফোটনগুলিকে আলাদা করতে পারে না। মাল্টিফোটন মাইক্রোস্কোপি গভীর-টিস্যু ইমেজিংয়ের জন্য ভাল সংকেত-থেকে-শব্দ অনুপাত সরবরাহ করে।
④ একক-ফোটন উত্তেজনায় ব্যবহৃত অতিবেগুনি বা দৃশ্যমান আলো বীম ফোকাল সমতলে পৌঁছানোর আগে নমুনা দ্বারা শোষিত এবং ক্ষয়প্রাপ্ত হতে থাকে, যা গভীর-স্তর উত্তেজনাকে কঠিন করে তোলে।
⑤ জৈবিক মাইক্রোস্কোপিক পর্যবেক্ষণের জন্য, প্রাথমিক বিবেচনা হল নমুনার জৈবিক কার্যকলাপ সংরক্ষণ করা, জলের উপাদান, আয়নের ঘনত্ব বজায় রাখা এবং অক্সিজেন ও পুষ্টির সঞ্চালন। অপটিক্যাল পর্যবেক্ষণের জন্য, তাপ এবং ফোটন শক্তি উভয়কেই বিকিরণ মাত্রার মধ্যে রাখতে হবে যা কোষের ক্ষতি করে না।
⑥ মাল্টিফোটন অণুবীক্ষণ যন্ত্রের অনেক সুবিধা রয়েছে। 3D রেজোলিউশন, গভীর অনুপ্রবেশ, বিক্ষিপ্ত দক্ষতা, পটভূমি আলো, সংকেত থেকে শব্দ অনুপাত এবং নিয়ন্ত্রণযোগ্যতার পরিপ্রেক্ষিতে, তারা উচ্চতর বৈশিষ্ট্যগুলি প্রদর্শন করে যা প্রচলিত লেজার মাইক্রোস্কোপগুলি মেলে বা অর্জন করতে পারে না।
মাল্টিফোটন লেজার স্ক্যানিং মাইক্রোস্কোপের অসুবিধা
① এটি শুধুমাত্র ফ্লুরোসেন্স ইমেজিং করতে পারে।
② যদি নমুনায় ক্রোমোফোরস থাকে যা উত্তেজনার আলো শোষণ করে, তাহলে নমুনার তাপীয় ক্ষতি হতে পারে।
③ রেজোলিউশন কিছুটা কমে গেছে। যদিও এটি একই সাথে কনফোকাল পিনহোল ব্যবহার করে উন্নত করা যেতে পারে, তবে সংকেত ক্ষতি হবে।
④ ব্যয়বহুল আল্ট্রাফাস্ট লেজার দ্বারা সীমাবদ্ধ, মাল্টিফোটন স্ক্যানিং মাইক্রোস্কোপগুলির তুলনামূলকভাবে উচ্চ মূল্য রয়েছে।
