মাল্টিফোটন লেজার স্ক্যানিং মাইক্রোস্কোপি (এমএলএসএম) এর সুবিধা এবং অসুবিধা
মাল্টিফোটন লেজার স্ক্যানিং মাইক্রোস্কোপি হল লেজার স্ক্যানিং মাইক্রোস্কোপি প্রযুক্তির উপর ভিত্তি করে একটি পরীক্ষামূলক পদ্ধতি, যা ত্রিমাত্রিক পর্যবেক্ষণের জন্য আরও ভাল অপটিক্যাল সেকশনিং ক্ষমতা প্রদান করে। মাল্টি-ফোটন ফ্লুরোসেন্স উত্তেজনা পদ্ধতিটি নমুনার উচ্চ-রেজোলিউশন ফ্লুরোসেন্স চিত্র সংগ্রহ করতে দীর্ঘ-তরঙ্গদৈর্ঘ্যের লাল আলো বা কাছাকাছি-ইনফ্রারেড আলো ব্যবহার করে, যা জীবিত নমুনার ন্যূনতম ক্ষতি করে। অতএব, এটি লাইভ সেল ইমেজিংয়ের জন্য উপযুক্ত, বিশেষ করে পুরু জীবন্ত টিস্যু যেমন মস্তিষ্কের টুকরো, ভ্রূণ ইত্যাদি। সমগ্র অঙ্গ বা এমনকি সমগ্র দেহের ইমেজিং অধ্যয়ন।
সুবিধাগুলো নিম্নরূপ:
1. উত্তেজিত করার জন্য লাল আলো বা ইনফ্রারেড আলো ব্যবহার করুন এবং আলোর বিচ্ছুরণ ছোট (ছোট কণার বিক্ষিপ্ততা তরঙ্গদৈর্ঘ্যের চতুর্থ শক্তির বিপরীতভাবে সমানুপাতিক)।
2. কোন পিনহোলের প্রয়োজন নেই, এবং ইমেজিং ক্রস-সেকশন থেকে আরও বিক্ষিপ্ত ফোটন সংগ্রহ করা যেতে পারে।
3. পিনহোল ডিফোকাস এলাকা বা ফোকাস এলাকা থেকে নির্গত বিক্ষিপ্ত ফোটনকে আলাদা করতে পারে না এবং গভীর স্তরে মাল্টি-ফোটন ইমেজিংয়ের সংকেত-টু-শব্দ অনুপাত ভাল।
4. একক-ফোটন উত্তেজনার জন্য ব্যবহৃত অতিবেগুনী বা দৃশ্যমান আলো রশ্মি ফোকাল সমতলে পৌঁছানোর আগে নমুনা দ্বারা সহজেই শোষিত এবং ক্ষয়প্রাপ্ত হয় এবং গভীর স্তরগুলিকে উত্তেজিত করা কঠিন।
5. জৈবিক অণুবীক্ষণ যন্ত্রের পর্যবেক্ষণের ক্ষেত্রে, প্রথম বিবেচনা হল জীবের সক্রিয় অবস্থার ক্ষতি না করা এবং জলের প্রবাহ, আয়ন ঘনত্ব, অক্সিজেন এবং পুষ্টি বজায় রাখা। আলো পর্যবেক্ষণের ক্ষেত্রে, তাপ এবং ফোটন শক্তি উভয়ই অবশ্যই বিকিরণ পরিমাণ এবং আলোক শক্তির মধ্যে থাকতে হবে যাতে কোষগুলি ক্ষতিগ্রস্ত হবে না।
6. মাল্টিফোটন মাইক্রোস্কোপিরও অনেক সুবিধা রয়েছে। উদাহরণস্বরূপ, ত্রিমাত্রিক রেজোলিউশন, গভীরতা অনুপ্রবেশ, বিক্ষিপ্ত দক্ষতা, ব্যাকগ্রাউন্ড লাইট, সিগন্যাল-টু-নয়েজ রেশিও, কন্ট্রোল ইত্যাদির ক্ষেত্রে এমন ট্রান্সসেন্ডেন্ট বৈশিষ্ট্য রয়েছে যা পূর্ববর্তী লেজার মাইক্রোস্কোপগুলিতে ছিল না বা মেলেনি।
মাল্টি-ফোটন কনফোকাল লেজার স্ক্যানিং মাইক্রোস্কোপি বিভিন্ন গবেষণা এবং প্রয়োগ ক্ষেত্রে প্রসারিত করা হয়েছে। এটি তাদের প্রাকৃতিক অবস্থায় নমুনাগুলির ত্রি-মাত্রিক অ-ধ্বংসাত্মক পর্যবেক্ষণ পরিচালনা করতে পারে এবং সিস্টেমের রেজোলিউশন এবং সংকেত-থেকে-শব্দ অনুপাতকে উন্নত করতে পারে। মাল্টি-ফোটন উত্তেজনা উপকরণ ব্যবহার করে বৈশিষ্ট্যের পরিবর্তনগুলিও ত্রি-মাত্রিক উচ্চতা ডেটা সঞ্চয়স্থান এবং ত্রি-মাত্রিক মাইক্রো-মেশিনিং যে কোনো দিকে উপলব্ধি করতে পারে, যার উচ্চ প্রয়োগের মান রয়েছে। এটা বিশ্বাস করা হয় যে মাল্টি-ফোটন কনফোকাল মাইক্রোস্কোপির সাথে সম্পর্কিত যন্ত্রপাতি, উপকরণ, লেজার প্রযুক্তি ইত্যাদির আরও বিকাশের সাথে, আরও ফোটোনিক কনফোকাল লেজার স্ক্যানিং মাইক্রোস্কোপি বৃহত্তর বিকাশ এবং ব্যাপক প্রয়োগ পাবে।
অসুবিধাগুলি নিম্নরূপ:
1. এটি শুধুমাত্র ফ্লুরোসেন্স ইমেজ করতে পারে.
2. যদি নমুনায় ক্রোমোফোরস থাকে যা উত্তেজনার আলো শোষণ করতে পারে, যেমন রঙ্গক, নমুনা তাপ দ্বারা ক্ষতিগ্রস্ত হতে পারে।
3. রেজোলিউশন সামান্য হ্রাস করা হয়. যদিও এটি একই সময়ে কনফোকাল গর্ত ব্যবহার করে উন্নত করা যেতে পারে, তবে সংকেত ক্ষতি হবে।
4. ব্যয়বহুল আল্ট্রাফাস্ট লেজার দ্বারা সীমিত, মাল্টিফোটন স্ক্যানিং মাইক্রোস্কোপের খরচ তুলনামূলকভাবে বেশি।
