মাল্টিফোটন লেজার স্ক্যানিং মাইক্রোস্কোপগুলির সুবিধা এবং অসুবিধাগুলির জন্য একটি নির্দেশিকা৷
1. লাল বা ইনফ্রারেড আলো দ্বারা উত্তেজিত, হালকা বিচ্ছুরণ ছোট, এবং ছোট কণার বিক্ষিপ্ততা তরঙ্গদৈর্ঘ্যের চতুর্থ শক্তির বিপরীতভাবে সমানুপাতিক।
2. ইমেজিং ক্রস-বিভাগ থেকে আরও বিক্ষিপ্ত ফোটন পিনহোলের প্রয়োজন ছাড়াই সংগ্রহ করা যেতে পারে।
3. পিনহোলগুলি ডিফোকাসড বা ফোকাল এলাকাগুলি থেকে নির্গত বিক্ষিপ্ত ফোটনগুলিকে আলাদা করতে পারে না এবং গভীর ইমেজিংয়ে মাল্টিফোটনগুলির আরও ভাল সংকেত-থেকে-শব্দ অনুপাত থাকে৷
4. একক ফোটন উত্তেজনার জন্য ব্যবহৃত অতিবেগুনি বা দৃশ্যমান আলো সহজেই শোষিত হয় এবং নমুনা দ্বারা বীম ফোকাল সমতলে পৌঁছানোর আগেই ক্ষীণ হয়ে যায়, যা গভীর স্তরগুলিকে উত্তেজিত করা কঠিন করে তোলে।
5. জৈবিক মাইক্রোস্কোপি পর্যবেক্ষণের ক্ষেত্রে, প্রথম বিবেচনা হল জীবের সক্রিয় অবস্থার ক্ষতি না করা, জল, আয়নের ঘনত্ব, অক্সিজেন এবং পুষ্টির সঞ্চালন বজায় রাখা। আলো পর্যবেক্ষণের ক্ষেত্রে, তাপ এবং ফোটন শক্তি উভয়ই বিকিরণ মাত্রা এবং হালকা শক্তির মধ্যে থাকতে হবে যা কোষের ক্ষতি করে না।
6. মাল্টিফোটন মাইক্রোস্কোপির অনেক সুবিধা রয়েছে। ত্রিমাত্রিক রেজোলিউশন, গভীরতা আক্রমণ, বিক্ষিপ্ত দক্ষতা, পটভূমি আলো, সংকেত-থেকে-শব্দ অনুপাত, নিয়ন্ত্রণ ইত্যাদির ক্ষেত্রে, এমন বৈশিষ্ট্য রয়েছে যা পূর্ববর্তী লেজার মাইক্রোস্কোপের অধিকারী নয় বা অতিক্রম করতে পারে না
মাল্টিফোটন লেজার স্ক্যানিং মাইক্রোস্কোপের অসুবিধা:
1. শুধুমাত্র ফ্লুরোসেন্স ইমেজিং জন্য.
2. যদি নমুনায় ক্রোমোফোরস থাকে যা উত্তেজনার আলো শোষণ করতে পারে, তাহলে নমুনাটি তাপীয় ক্ষতির শিকার হতে পারে।
3. রেজোলিউশনটি সামান্য হ্রাস করা হয়েছে, যদিও এটি একই সাথে কনফোকাল ছোট গর্ত ব্যবহার করে উন্নত করা যেতে পারে, সেখানে সংকেত ক্ষতি রয়েছে।
4. ব্যয়বহুল আল্ট্রাফাস্ট লেজারের সীমাবদ্ধতার কারণে, মাল্টিফোটন স্ক্যানিং মাইক্রোস্কোপের খরচ তুলনামূলকভাবে বেশি।
