ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপির উজ্জ্বল এবং অন্ধকার ক্ষেত্রের জন্য ইমেজিং পদ্ধতি
(1) ব্রাইট ফিল্ড ইমেজিং (BFI), যা শুধুমাত্র প্যারাক্সিয়াল অঞ্চলে প্রেরিত ইলেক্ট্রনগুলিকে উদ্দেশ্যমূলক অ্যাপারচারের মধ্য দিয়ে যেতে দেয়, একটি উজ্জ্বল পটভূমিতে একটি অন্ধকার চিত্র তৈরি করে। অবজেক্টিভ লেন্সের অ্যাপারচার যত ছোট হবে, উজ্জ্বল ফিল্ড ইমেজের কন্ট্রাস্ট তত বেশি হবে; (2) ডার্ক ফিল্ড ইমেজিং (DFI), যা শুধুমাত্র একটি বৃহৎ কোণ বিক্ষিপ্ত রশ্মির একটি অংশ বা একটি স্ফটিকের একটি বিচ্ছুরণ রশ্মিকে উদ্দেশ্যমূলক লেন্স অ্যাপারচারের মধ্য দিয়ে যেতে দেয়, যখন প্রেরণ করা মরীচিকে ব্লক করে। এটি একটি অন্ধকার পটভূমিতে একটি উজ্জ্বল গ্রাফিক চিত্র তৈরি করে। এই অন্ধকার ক্ষেত্রের ইমেজিং পদ্ধতিটি ছবির বৈসাদৃশ্য উন্নত করতে পারে এবং এটি একটি গুরুত্বপূর্ণ ইমেজিং পদ্ধতি।
ডার্ক ফিল্ড ইমেজিং অর্জনের জন্য ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপির জন্য মোটামুটি চারটি পদ্ধতি রয়েছে: (1) অবজেক্টিভ অ্যাপারচার সরানোর সময় অপটিক্যাল অক্ষ বরাবর উল্লম্ব আলোকসজ্জা বজায় রাখা; (2) অপটিক্যাল অক্ষের দিকে বিক্ষিপ্ত বিম পেতে তির্যক আলোকসজ্জার ব্যবহারকে বলা হয় সেন্টার ডার্ক ফিল্ড ইমেজিং (CDFI); (3) একটি কেন্দ্রীয় মরীচি ব্লকিং এবং একটি বৃত্তাকার স্বচ্ছ এলাকা সহ একটি উদ্দেশ্যমূলক লেন্স অ্যাপারচার; (4) আলো সনাক্ত করতে একটি বৃত্তাকার স্বচ্ছ স্পটলাইট ব্যবহার করুন এবং একটি কেন্দ্রীয় বৃত্তাকার গর্ত সহ একটি বস্তুনিষ্ঠ অ্যাপারচার। এখানে * পদ্ধতিগুলি সহজ এবং সুবিধাজনক, কিন্তু তারা দূর হাতা অঞ্চলে ইলেকট্রনিক ইমেজিং ব্যবহার করে, যার ফলে বড় বিকৃতি এবং চিত্রের গুণমান খারাপ হয়। দ্বিতীয় পদ্ধতিটি উপরের ত্রুটিগুলি এড়াতে পারে, কিন্তু লাইকা ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপের উদ্দেশ্যমূলক অ্যাপারচার শুধুমাত্র বিক্ষিপ্ত বিচ্ছুরিত ইলেকট্রনের একটি ছোট অংশ গ্রহণ করে, যার ফলে কার্যক্ষমতা কম হয়। অ্যাপারচারের পাশে প্রায়শই প্রচুর পরিমাণে ইলেকট্রন দ্বারা বোমাবর্ষণ করা হয়, যা সহজেই অপ্রতিসম দূষণের কারণ হতে পারে এবং ছবির গুণমানকে প্রভাবিত করতে পারে। এই বিষয়ে বৃত্তাকার উদ্দেশ্য উন্নত করা হয়েছে, কিন্তু অসুবিধা হল এটি তৈরি করা কঠিন এবং সম্পূর্ণ অক্ষীয় প্রতিসাম্য অর্জন করা কঠিন। আলোক ব্যবস্থার জন্য অপেক্ষাকৃত শিথিল প্রয়োজনীয়তার প্রেক্ষিতে, পরবর্তী সমাধানটি গ্রহণ করা যেতে পারে, যার মধ্যে নমুনার জন্য ফাঁপা আলোকসজ্জা প্রদানের জন্য কনডেনসারে একটি বৃত্তাকার অ্যাপারচার যোগ করা জড়িত। এই ডিভাইসের প্রভাব। এর ইমেজ রেজোলিউশন উজ্জ্বল ফিল্ড ইমেজের কাছাকাছি হতে পারে, যখন বৈসাদৃশ্যটি ব্যাপকভাবে উন্নত হয়।
