ফ্লুরোসেন্স টোটাল ইন্টারনাল রিফ্লেকশন ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপির প্রয়োগ
TIRFM (টোটাল ইন্টারনাল রিফ্লেকশন ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ), মোট অভ্যন্তরীণ প্রতিফলন ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ, যখন আলো একটি উচ্চ প্রতিসরণ সূচক সহ একটি মাধ্যম থেকে একটি নিম্ন প্রতিসরণ সূচক সহ একটি মাধ্যম প্রবেশ করে, যদি ঘটনা কোণ যথেষ্ট বড় হয়, সমস্ত আলো প্রতিসরণ ছাড়াই প্রতিফলিত হয়, কিন্তু দুটি মিডিয়ার ইন্টারফেসে অস্পষ্ট তরঙ্গ উৎপন্ন করে যা বস্তুর পৃষ্ঠের পর্যবেক্ষণ উপলব্ধি করার জন্য ইন্টারফেসের কাছাকাছি 100nm এর মধ্যে প্রতিপ্রভাকে উত্তেজিত করতে পারে। উত্তেজনা আলো একটি প্রচলিত ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ বা একটি বিশেষ আলোকযন্ত্রের মাধ্যমে প্রেরণ করা যেতে পারে এবং লেজারের ঘটনা কোণ নিয়ন্ত্রণ করা যেতে পারে। তাত্ক্ষণিক ক্ষেত্রের উত্তেজনা পদ্ধতিটি উত্তেজনা আলোকে ডিটেক্টরে প্রবেশ করতে বাধা দিতে ব্যবহৃত হয়। গ্লাস এবং জলের মধ্যে ইন্টারফেসে উত্তেজনা আলো প্রতিফলন দ্বারা বাস্তবায়িত একটি সম্পূর্ণ অভ্যন্তরীণ উত্পাদন করে। উত্তেজনা আলোর সূচকীয় ক্ষরণের কারণে, মোট প্রতিফলন পৃষ্ঠের খুব কাছাকাছি শুধুমাত্র নমুনা এলাকা ফ্লুরোসেন্স প্রতিফলন তৈরি করবে, যা পর্যবেক্ষণ লক্ষ্যে পটভূমি আলোর শব্দের হস্তক্ষেপকে ব্যাপকভাবে হ্রাস করে, তাই এই প্রযুক্তিটি গতিশীল পর্যবেক্ষণে ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয়। কোষ পৃষ্ঠ পদার্থের.
মোট অভ্যন্তরীণ প্রতিফলন ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপির পরিকল্পিত চিত্র (TIRFM)
①নমুনা ②ইভেনেসেন্ট ওয়েভ রেঞ্জ ③কভার গ্লাস ④তেল নিমজ্জন ⑤লক্ষ্য ⑥নির্গমন মরীচি (সংকেত) ⑦উত্তেজনা মরীচি
মোট অভ্যন্তরীণ প্রতিফলন অর্জনের জন্য, একটি বড় ঘটনা কোণ প্রয়োজন, উদাহরণস্বরূপ, গ্লাস-জল ইন্টারফেসে ঘটনা কোণটি 61 ডিগ্রির বেশি। এটি একটি প্রিজম দ্বারা অর্জন করা যেতে পারে, যাকে প্রিজম-ভিত্তিক TIRFM বলা হয়, বা একটি উচ্চ সংখ্যাসূচক অ্যাপারচার সহ একটি উদ্দেশ্যমূলক লেন্স দ্বারা, যাকে বলা হয় অবজেক্টিভ-টাইপ টিআইআরএফএম। বর্তমান বাণিজ্যিকীকৃত মোট অভ্যন্তরীণ প্রতিফলন ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপগুলি সাধারণত উদ্দেশ্যমূলক লেন্সের, উচ্চ গতি এবং উচ্চ নির্ভুলতা সহ।
মোট অভ্যন্তরীণ প্রতিফলন ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপি কিছু জৈবিক ক্ষেত্রে ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয় কারণ এটি বস্তুর পৃষ্ঠে খুব পাতলা পরিসরে (100nm এর কম) ফ্লুরোসেন্স পর্যবেক্ষণ উপলব্ধি করতে পারে। যেমন নিম্নলিখিত অ্যাপ্লিকেশন:
কোষের পৃষ্ঠের চিত্রগুলির পর্যবেক্ষণ: কোষের ঝিল্লি পৃষ্ঠের গঠন, কোষের পৃষ্ঠের যোগাযোগ, ঝিল্লি পৃষ্ঠের গতিবিদ্যা/প্রোটিন স্থানীয়করণ।
একক-অণু পর্যবেক্ষণ এবং ম্যানিপুলেশন: মায়োসিন, অ্যাক্টিন, এবং সাই3-লেবেলযুক্ত ATP।
কোষের ঝিল্লির পৃষ্ঠের নড়াচড়া: যেমন ভেসিকল অ্যাঙ্গলফমেন্ট, ভেসিকল নিঃশ্বাস এবং ভেসিকল এক্সোক্রাইন। দ্য
কোষের ঝিল্লিতে ক্যালসিয়াম স্পার্কিং প্রপঞ্চের পর্যবেক্ষণ, আয়ন চ্যানেল পর্যবেক্ষণ।
আণবিক মোটর গবেষণা: ঘূর্ণন মোটর, সাইটোস্কেলেটাল প্রোটিন, পলিমার, জি প্রোটিন, রিং প্রোটিন, নিউক্লিওটাইড মোটর।
জীববিজ্ঞানের ক্ষেত্রের পাশাপাশি, রাসায়নিক আণবিক কাঠামোর পর্যবেক্ষণের জন্য রসায়নের ক্ষেত্রেও এর ভাল প্রয়োগ রয়েছে।
