অণুজীব কোষের আকৃতি দেখতে কী ধরনের মাইক্রোস্কোপ ব্যবহার করা হয়

অণুজীব কোষের আকৃতি দেখতে কী ধরনের মাইক্রোস্কোপ ব্যবহার করা হয়

সমস্ত ক্ষুদ্র জীবের জন্য একটি সমষ্টিগত শব্দ যা ব্যক্তিদের জন্য খালি চোখে পর্যবেক্ষণ করা কঠিন। অণুজীবের মধ্যে রয়েছে ব্যাকটেরিয়া, ভাইরাস, ছত্রাক এবং কয়েকটি শেওলা। (তবে, কিছু অণুজীব খালি চোখে দেখা যায়, যেমন ছত্রাকের অন্তর্গত মাশরুম, গ্যানোডার্মা লুসিডাম ইত্যাদি) ভাইরাস হল এক ধরনের "নন-সেলুলার অর্গানিজম" যা কিছু উপাদান যেমন নিউক্লিক অ্যাসিড এবং প্রোটিন দ্বারা গঠিত, কিন্তু তাদের বেঁচে থাকা অবশ্যই জীবিত কোষের উপর নির্ভর করবে। বিদ্যমান বিভিন্ন পরিবেশ অনুসারে, এগুলিকে প্রোক্যারিওটিক অণুজীব, মহাকাশ অণুজীব, ছত্রাক অণুজীব, খামির অণুজীব, সামুদ্রিক অণুজীব ইত্যাদিতে ভাগ করা যেতে পারে।

অণুজীবের ভূমিকা এবং ক্ষতি:
মানুষের উপর অণুজীবের সবচেয়ে গুরুত্বপূর্ণ প্রভাবগুলির মধ্যে একটি হল সংক্রামক রোগের প্রাদুর্ভাব। মানুষের 50 শতাংশ রোগ ভাইরাস দ্বারা সৃষ্ট। মানুষের রোগ সৃষ্টিকারী জীবাণুর ইতিহাস হল তাদের সাথে মানুষের অবিরাম সংগ্রামের ইতিহাস। মানুষ রোগ প্রতিরোধ ও চিকিৎসায় দারুণ অগ্রগতি করেছে, কিন্তু নতুন এবং পুনঃআবির্ভূত জীবাণু সংক্রমণ ঘটতে থাকে, যেমন বিপুল সংখ্যক ভাইরাল রোগে কার্যকর থেরাপিউটিক ওষুধের অভাব রয়েছে। কিছু রোগের প্যাথোজেনিক প্রক্রিয়া স্পষ্ট নয়। বিপুল সংখ্যক ব্রড-স্পেকট্রাম অ্যান্টিবায়োটিকের অপব্যবহারের ফলে নির্বাচনের প্রবল চাপ সৃষ্টি হয়েছে, যার ফলে অনেক স্ট্রেইন পরিবর্তিত হয়েছে, যার ফলে ড্রাগ প্রতিরোধের উত্থান ঘটেছে এবং মানব স্বাস্থ্য নতুন হুমকির সম্মুখীন হয়েছে। কিছু বিভাগীয় ভাইরাস পুনর্মিলন বা পুনর্বিন্যাসের মাধ্যমে পরিবর্তিত হতে পারে। সবচেয়ে সাধারণ উদাহরণ হল ইনফ্লুয়েঞ্জা ভাইরাস।

অণুজীবের সুনির্দিষ্ট সংজ্ঞা জানার পর, অণুজীবের অধ্যয়ন করার সময় পরীক্ষককে কী ধরনের অণুবীক্ষণ যন্ত্র ব্যবহার করা উচিত, এবং কোন অণুবীক্ষণ যন্ত্রটি ভালোভাবে দেখতে এবং সাধারণ অণুজীবের রূপগুলি পর্যবেক্ষণ ও বিশ্লেষণ করতে ব্যবহার করা যেতে পারে।

অণুবীক্ষণ যন্ত্রের উদ্ভাবন হল হাস্যোজ্জ্বল বস্তু দেখতে পারা যা খালি চোখে দেখা যায় না। অণুজীবের আকার খুবই ছোট, তাই তাদের অবশ্যই অণুবীক্ষণ যন্ত্রের সাহায্যে বড় করে দেখতে হবে। এছাড়াও, অনেক ধরনের অণুজীব রয়েছে, তাই মূলত বেশিরভাগ অপটিক্যাল মাইক্রোস্কোপ অণুজীব পর্যবেক্ষণ করতে পারে, পরবর্তী প্রশ্ন হল অণুজীব পর্যবেক্ষণ ও বিশ্লেষণের জন্য কোন ধরনের অণুবীক্ষণ যন্ত্র ব্যবহার করা উচিত। অণুজীব আকারবিদ্যা পর্যবেক্ষণের জন্য সাধারণ অণুবীক্ষণ যন্ত্রের মধ্যে রয়েছে জৈবিক অণুবীক্ষণ যন্ত্র, ফেজ কন্ট্রাস্ট অণুবীক্ষণ যন্ত্র, উল্টানো অণুবীক্ষণ যন্ত্র, ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ এবং কনফোকাল অণুবীক্ষণ যন্ত্র। মাইক্রোস্কোপ এবং তাই।

নিম্নলিখিত অণুজীব পর্যবেক্ষণ করতে ব্যবহৃত বিভিন্ন মাইক্রোস্কোপ বর্ণনা করে:

1. সাধারণ হালকা মাইক্রোস্কোপ

প্রাকৃতিক আলো বা আলো আলোর উৎস হিসেবে ব্যবহৃত হয় এবং এর তরঙ্গদৈর্ঘ্য প্রায় {{0}}.4 μm। মাইক্রোস্কোপের রেজোলিউশন হল তরঙ্গদৈর্ঘ্যের অর্ধেক, অর্থাৎ 0.2 μm, এবং খালি চোখে দৃশ্যমান ক্ষুদ্রতম চিত্রটি হল 0.2 মিমি। অতএব, 1000 বার বড় করার জন্য একটি তেল (নিমজ্জন) আয়না ব্যবহার করলে খালি চোখে দৃশ্যমান 0.2μm কণাগুলিকে 0.2mm-এ বড় করা যায়৷ ব্যাকটেরিয়া, অ্যাক্টিনোমাইসেট এবং ছত্রাক পর্যবেক্ষণের জন্য সাধারণ অপটিক্যাল মাইক্রোস্কোপ ব্যবহার করা যেতে পারে।

2. ডার্কফিল্ড মাইক্রোস্কোপি সাধারণত দাগহীন মাইক্রোবিয়াল অঙ্গসংস্থান এবং গতিবিধি পর্যবেক্ষণ করতে ব্যবহৃত হয়। সাধারণ অণুবীক্ষণ যন্ত্রে ডার্ক ফিল্ড কনডেন্সার ইনস্টল করার পরে, আলো সরাসরি মাঝখান থেকে প্রবেশ করতে পারে না এবং দেখার ক্ষেত্রটি অন্ধকার। যখন নমুনাটি কনডেনসারের প্রান্ত থেকে তির্যক আলো পায়, তখন এটি বিক্ষিপ্ত হতে পারে, তাই ব্যাকটেরিয়া বা স্পিরোকেটের মতো অন্ধকার ক্ষেত্রের পটভূমিতে উজ্জ্বল অণুজীব লক্ষ্য করা যায়।

3. ফেজ কন্ট্রাস্ট মাইক্রোস্কোপ ফেজ কন্ট্রাস্ট মাইক্রোস্কোপ ফেজ ডিফারেন্স প্লেটের হালকা প্রভাব ব্যবহার করে সরাসরি আলোর আলোর ফেজ এবং প্রশস্ততা পরিবর্তন করে এবং আলোর তীব্রতার পার্থক্যে আলো ফেজের পার্থক্যকে রূপান্তর করে। একটি ফেজ-কন্ট্রাস্ট মাইক্রোস্কোপের অধীনে, যখন আলো একটি দাগহীন নমুনার মধ্য দিয়ে যায়, তখন আলোক পর্যায়ের পার্থক্যটি নমুনার বিভিন্ন অংশের ঘনত্বের অসামঞ্জস্যতার কারণে ঘটে এবং অণুজীবের আকারবিদ্যা, অভ্যন্তরীণ গঠন এবং গতিবিধি লক্ষ্য করা যায়।

4. ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ মূলত সাধারণ অপটিক্যাল মাইক্রোস্কোপের মতই, প্রধান পার্থক্য হল আলোর উৎস, ফিল্টার এবং কনডেনসার। বর্তমানে, তাদের বেশিরভাগই এপি-লাইট ডিভাইস ব্যবহার করে এবং উচ্চ-চাপের পারদ বাতিগুলি সাধারণত আলোর উত্স হিসাবে ব্যবহৃত হয়, যা অতিবেগুনি বা নীল-বেগুনি আলো নির্গত করতে পারে। দুটি ধরণের ফিল্টার রয়েছে: উত্তেজনা ফিল্টার এবং শোষণ ফিল্টার। সাধারণ উজ্জ্বল-ক্ষেত্র কনডেন্সার ছাড়াও, অন্ধকার-ক্ষেত্রের কনডেন্সারগুলি ফ্লুরোসেন্স এবং ব্যাকগ্রাউন্ডের মধ্যে বৈপরীত্য বাড়ানোর জন্য নীল আলো ব্যবহার করে ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপেও ব্যবহার করা যেতে পারে। এই পদ্ধতিটি ফ্লুরোসেন্ট পিগমেন্টের সাথে দাগযুক্ত বা ফ্লুরোসেন্ট অ্যান্টিবডিগুলির সাথে মিলিত ব্যাকটেরিয়া সনাক্তকরণ বা সনাক্তকরণের জন্য প্রযোজ্য।

5. ইলেক্ট্রন মাইক্রোস্কোপ আলোর উৎস হিসেবে ইলেক্ট্রন প্রবাহ ব্যবহার করে। দৃশ্যমান আলোর সাথে তুলনা করে, তরঙ্গদৈর্ঘ্য কয়েক হাজার গুণ ভিন্ন, যা রেজোলিউশনকে ব্যাপকভাবে উন্নত করে। চৌম্বকীয় কুণ্ডলী অপটিক্যাল পরিবর্ধন সিস্টেম হিসাবে ব্যবহৃত হয়, এবং বিবর্ধন হাজার হাজার বা কয়েক হাজার বার পৌঁছতে পারে। এটা প্রায়ই ভাইরাস কণা ব্যবহার করা হয়. এবং ব্যাকটেরিয়া আল্ট্রাস্ট্রাকচারের পর্যবেক্ষণ।

দাগহীন জীবাণুর নমুনা পর্যবেক্ষণ:
দাগহীন নমুনাগুলি সাধারণত ব্যাকটেরিয়া আকারবিদ্যা, শক্তি এবং গতিবিধি পর্যবেক্ষণ করতে ব্যবহার করা যেতে পারে। দাগ না থাকলে ব্যাকটেরিয়া বর্ণহীন এবং স্বচ্ছ হয় এবং প্রধানত ব্যাকটেরিয়ার প্রতিসরণ সূচক এবং পার্শ্ববর্তী পরিবেশের মধ্যে পার্থক্য দ্বারা একটি মাইক্রোস্কোপের নীচে পর্যবেক্ষণ করা হয়। ফ্ল্যাজেলা সহ ব্যাকটেরিয়া জোরালোভাবে চলাচল করে, যখন ফ্ল্যাজেলা ছাড়া ব্যাকটেরিয়া অনিয়মিত ব্রাউনিয়ান গতি দেখায়। ট্রেপোনেমা প্যালিডাম, লেপ্টোস্পিরা এবং ক্যাম্পাইলোব্যাক্টারের মতো কার্যকর ব্যাকটেরিয়াগুলির স্বতন্ত্র আকার এবং চলাফেরার ধরণ রয়েছে, যা ডায়াগনস্টিক তাৎপর্যপূর্ণ। সাধারণভাবে ব্যবহৃত পদ্ধতি হল চাপ ড্রপ পদ্ধতি, দুল ড্রপ পদ্ধতি এবং কৈশিক পদ্ধতি।

1. ঝুলন্ত ড্রপ পদ্ধতি পরিষ্কার অবতল কাচের স্লাইডের অবতল গর্তের চারপাশে ভ্যাসলিন প্রয়োগ করুন, একটি ইনোকুলেশন লুপ দিয়ে ব্যাকটেরিয়াল সাসপেনশনের একটি রিং নিন এবং এটি কভার গ্লাসের মাঝখানে রাখুন, তারপর অবতল কাচের স্লাইডের অবতল গর্তটিকে সারিবদ্ধ করুন। কভার গ্লাসের মাঝখানে ফোঁটাটি রাখুন এবং কভারটি রাখুন, তারপরে এটিকে দ্রুত উল্টে দিন, কভার স্লিপটি হালকাভাবে টিপুন যাতে এটি অবতল গর্তের প্রান্তে ভ্যাসলিনের সাথে শক্তভাবে লেগে থাকে এবং তারপরে একটি উচ্চ শক্তির নীচে পর্যবেক্ষণ করুন। মাইক্রোস্কোপ (বা অন্ধকার ক্ষেত্র)।

2. একটি ইনোকুলেশন লুপ সহ ব্যাকটেরিয়াল সাসপেনশনের একটি রিং নিন এবং চাপ ড্রপ পদ্ধতিতে একটি পরিষ্কার গ্লাস স্লাইডের মাঝখানে রাখুন এবং ব্যাকটেরিয়া সাসপেনশনটিকে একটি কভার গ্লাস দিয়ে আলতো করে ঢেকে দিন, যাতে বায়ু বুদবুদ তৈরি না হয় এবং প্রতিরোধ করা যায়। উপচে পড়া থেকে ব্যাকটেরিয়া সাসপেনশন। একটি উচ্চ-পাওয়ার লেন্সের অধীনে ব্রাইটফিল্ড (বা ডার্কফিল্ড) পর্যবেক্ষণ।

3. কৈশিক পদ্ধতিটি মূলত অ্যানেরোবিক ব্যাকটেরিয়ার গতিবিদ্যা পরীক্ষার জন্য ব্যবহৃত হয়। সাধারণত 60~70মিমি লম্বা বেছে নিন। 05-1.0 মিমি অ্যাপারচার সহ একটি কৈশিকের মাধ্যমে অ্যানেরোবিক ব্যাকটেরিয়া সাসপেনশন সিফন করার পরে, একটি শিখা দিয়ে কৈশিকটির দুটি প্রান্ত সিল করুন। কৈশিকটি প্লাস্টিকের কাগজ দিয়ে কাচের স্লাইডে স্থির করা হয়েছিল এবং অন্ধকার ক্ষেত্রে একটি উচ্চ-শক্তি লেন্সের নীচে পর্যবেক্ষণ করা হয়েছিল।

একটি মাইক্রোস্কোপ দিয়ে দাগযুক্ত জীবাণুর নমুনা পর্যবেক্ষণ:
ব্যাকটেরিয়ার নমুনা দাগ হওয়ার পরে, ব্যাকটেরিয়া এবং আশেপাশের পরিবেশের মধ্যে রঙের তীব্র বৈপরীত্যের কারণে, ব্যাকটেরিয়াগুলির আকারগত বৈশিষ্ট্য (যেমন আকার, আকৃতি, বিন্যাস ইত্যাদি) এবং কিছু বিশেষ কাঠামো হতে পারে। একটি সাধারণ অপটিক্যাল মাইক্রোস্কোপের (যেমন ক্যাপসুল, ফ্ল্যাজেলা, স্পোর ইত্যাদি) এর অধীনে পরিষ্কারভাবে পর্যবেক্ষণ করা হয় এবং ব্যাকটেরিয়াগুলিকে স্টেনিং রিঅ্যাকটিভিটি অনুসারে শ্রেণীবদ্ধ এবং চিহ্নিত করা যেতে পারে।
(1) ব্যাকটেরিয়া দাগের সাধারণ পদ্ধতি ব্যাকটেরিয়া দাগের সাধারণ পদ্ধতি হল: স্মিয়ার (শুকানো)—স্থিরকরণ—দাগ দেওয়া।

1. রক্ত, নিঃসরণ, নিঃসরণ, পাংচার তরল এবং তরল কালচার এবং কাচের স্লাইডে সরাসরি পাতলা ফিল্ম স্মিয়ারের স্মিয়ার প্রস্তুত করা; ময়নাতদন্ত বা সংক্রামিত প্রাণীর টিস্যু, নমুনা নেওয়ার জন্য একটি তুলো দিয়ে ক্ষত ছিটিয়ে দিন। কঠিন মাধ্যমে ব্যাকটেরিয়া উপনিবেশ বা লন তৈরির জন্য, প্রথমে একটি ইনোকুলেশন লুপ ব্যবহার করুন যাতে একটি সাধারণ স্যালাইনের একটি রিং নিন এবং এটি স্লাইডের কেন্দ্রে রাখুন, তারপর একটি জীবাণুমুক্ত ইনোকুলেশন লুপ ব্যবহার করে অল্প পরিমাণে কালচার নিন এবং এটি পিষুন। সাধারণ স্যালাইনে সমানভাবে, এবং এটিকে 1cm2 বড় বা ছোট আঁকা পৃষ্ঠে ছড়িয়ে দিন, ঘরের তাপমাত্রায় স্বাভাবিকভাবে শুকাতে দিন বা দূরত্বে ধীরে ধীরে শুকাতে দিন।

2. ফিক্সেশনের উদ্দেশ্য হল ব্যাকটেরিয়া মেরে ফেলা, ব্যাকটেরিয়া প্রোটিন এবং গঠন জমাট করা এবং দাগ পড়া সহজ করা; ব্যাকটেরিয়াকে স্লাইডের সাথে লেগে থাকতে উৎসাহিত করুন যাতে ধোয়ার সময় পানিতে ধুয়ে না যায়; ব্যাকটেরিয়ার ব্যাপ্তিযোগ্যতা পরিবর্তন করে রঞ্জক, যা স্টেনিংয়ের ব্যাকটেরিয়া কোষের গঠনের জন্য উপকারী। এটি সাধারণত একটি শিখা দিয়ে গরম করে স্থির করা হয় এবং শুকনো স্মিয়ারটি দ্রুত 3 বার শিখার মধ্য দিয়ে চলে যায়। স্লাইড স্পর্শ করলে হাতের পেছনের ত্বকে পুড়ে না যাওয়াই ভালো।

3. রঞ্জনবিদ্যা বিভিন্ন পরিদর্শন উদ্দেশ্য অনুযায়ী, রঞ্জনবিদ্যা জন্য বিভিন্ন রঞ্জনবিদ্যা পদ্ধতি নির্বাচন করুন. রং করার সময়, কভারেজ বাড়ানোর জন্য ডাই দ্রবণটি ড্রপওয়াইজে যোগ করুন।

4. মর্ডান্ট যে কোনও পদার্থ যা রঞ্জক এবং রঙ্গিন বস্তুর মধ্যে সম্পর্ক বাড়াতে পারে, রঞ্জক বস্তুর উপর রঞ্জক স্থির করতে পারে এবং কোষের ঝিল্লির ব্যাপ্তিযোগ্যতার পরিবর্তন ঘটাতে পারে তাকে মর্ড্যান্ট বলে। সাধারণত ব্যবহার করা হয় অ্যালুম, ট্যানিক অ্যাসিড, ধাতব লবণ এবং আয়োডিন ইত্যাদি, এবং গরম করার জন্যও রঙ প্রচার করা হয়। মর্ডান্টগুলি প্রাথমিক স্টেনিং এবং কাউন্টারস্টেইনিংয়ের মধ্যে ব্যবহার করা যেতে পারে এবং ফিক্সেশনের পরেও ব্যবহার করা যেতে পারে বা ফিক্সেটিভ এবং স্টেনিংয়ের মধ্যেও থাকতে পারে।

5. রঙিনকরণ যে কোনো রাসায়নিক এজেন্ট যা রঙ্গিন বস্তুর রঙ অপসারণ করতে পারে তাকে ডিকলোরাইজার বলে। ইথানল, অ্যাসিটোন ইত্যাদি সাধারণত ডিকলোরাইজার হিসেবে ব্যবহৃত হয়। ডিকলারাইজিং এজেন্ট ব্যাকটেরিয়া এবং রঞ্জকগুলির সংমিশ্রণের স্থিতিশীলতার ডিগ্রি সনাক্ত করতে পারে, যা ডিফারেনশিয়াল স্টেনিংয়ের জন্য ব্যবহার করা যেতে পারে।

6. কাউন্টারস্টেইনিং ব্যাকটেরিয়া বা তাদের গঠনগুলি যেগুলিকে বিবর্ণ করা হয়েছে তা প্রায়শই সহজ পর্যবেক্ষণের জন্য একটি কাউন্টারস্টেইন দ্রবণ দিয়ে প্রতিরোধ করা হয়। একটি তীক্ষ্ণ বৈসাদৃশ্য গঠনের জন্য কাউন্টারস্টেইনিং দ্রবণের রঙ প্রাথমিক ডাইং দ্রবণ থেকে ভিন্ন। কাউন্টারস্টেইনিং খুব শক্তিশালী হওয়া উচিত নয়, যাতে প্রাথমিক দাগের রঙ ঢেকে না যায়।