হালকা মাইক্রোস্কোপি জন্য নমুনা প্রয়োজনীয়তা কি?
অপটিক্যাল মাইক্রোস্কোপের নমুনা তৈরির প্রক্রিয়ায়, নমুনার স্লাইসের পুরুত্ব 2 থেকে 25um; ইলেক্ট্রন মাইক্রোস্কোপের স্লাইসের পুরুত্ব 50-100nm এর মধ্যে (উচ্চ-ভোল্টেজ ইলেকট্রন মাইক্রোস্কোপ ব্যতীত, নমুনার পুরুত্ব 1um-এ পৌঁছাতে পারে), তাই ব্যবহৃত স্লাইসিং পদ্ধতিটি একই নয়।
ক্যারিয়ারের ক্ষেত্রে, অপটিক্যাল মাইক্রোস্কোপ বিভাগের বাহক হল একটি গ্লাস স্লাইড এবং ইলেক্ট্রন মাইক্রোস্কোপ বিভাগের বাহক হল ক্যারিয়ার গ্রিড।
ফিক্সেশনের ক্ষেত্রে, অপটিক্যাল মাইক্রোস্কোপ বিভাগগুলি একটি যৌগিক ফিক্সেটিভ দিয়ে স্থির করা হয়, যখন ইলেক্ট্রন মাইক্রোস্কোপ বিভাগগুলি একটি একক ফিক্সেটিভ দিয়ে বারবার স্থির করা হয়।
দাগের ক্ষেত্রে, অপটিক্যাল নমুনাগুলির দাগ তুলনামূলকভাবে সহজ। বিভিন্ন পর্যবেক্ষণ নমুনা এবং অপটিক্যাল অণুবীক্ষণ যন্ত্রের ধরন অনুযায়ী, এটি সাধারণত কিছু নির্দিষ্ট দাগ ব্যবহার করার জন্য যথেষ্ট। ইলেক্ট্রন অণুবীক্ষণ যন্ত্রের নমুনাগুলি পুনরায় দাগ দেওয়ার জন্য অনেকগুলি পদ্ধতি রয়েছে এবং সেগুলিও খুব জটিল, যেমন নেতিবাচক দাগ, সিলভার স্টেনিং এবং আরও অনেক কিছু।
এমবেডিংয়ের ক্ষেত্রে, প্যারাফিন, কোলোডিয়ন, জেলটিন ইত্যাদি অপটিক্যাল মাইক্রোস্কোপ বিভাগের জন্য এমবেডিং এজেন্ট হিসাবে ব্যবহৃত হয়; ইপক্সি রজন, পলিস্টাইরিন রজন, আইসোবিউটিলিন রজন এবং জলে দ্রবণীয় রজন ইলেক্ট্রন মাইক্রোস্কোপ বিভাগের জন্য এমবেডিং এজেন্ট হিসাবে ব্যবহৃত হয়।
মাইক্রোস্কোপের দৃশ্যের ক্ষেত্রটি অভিন্ন এবং পর্যাপ্ত আলোকসজ্জা প্রাপ্ত করার জন্য, যখন মাইক্রোস্কোপটি প্রথম ইনস্টল এবং ডিবাগ করা হয় তখন আলোকসজ্জা অপটিক্যাল পাথ সিস্টেমটি সামঞ্জস্য করা প্রয়োজন। প্রয়োজনীয়তা এছাড়াও, অণুবীক্ষণ যন্ত্র ব্যবহার করার প্রক্রিয়ায় আলোক বাল্ব প্রতিস্থাপনের পরে আলোকসজ্জা অপটিক্যাল পাথ সিস্টেমের সামঞ্জস্যকে সঠিকভাবে উপলব্ধি করা একটি প্রয়োজনীয় পদক্ষেপ, এবং এটি সময়ে সময়ে মাইক্রোস্কোপের কার্যকারিতা পরীক্ষা করার একটি প্রয়োজনীয় উপায়ও। দৈনন্দিন ব্যবহারের প্রক্রিয়া। মাইক্রোস্কোপের আলোকসজ্জা অপটিক্যাল পাথ সিস্টেমের সমন্বয়ে প্রধানত নিম্নলিখিত 4টি আইটেম অন্তর্ভুক্ত রয়েছে: 1. মাইক্রোস্কোপের বাইরে আলোর উত্স ল্যাম্প চেম্বারের প্রাথমিক সমন্বয় ① প্রথমে, ল্যাম্প চেম্বারের শেলটি খুলুন এবং হ্যালোজেন বাল্বটি টিপে সকেটে রাখুন বসন্ত ক্লিপ। বাল্বের উপর রেখে যাওয়া আঙ্গুলের ছাপের মতো ময়লা বাল্বের জীবনকে প্রভাবিত করবে। ②ল্যাম্প রুমটি টেবিলের উপর রাখুন, পাওয়ার চালু করার পরে, একটি বিশেষ স্ক্রু ড্রাইভার ব্যবহার করে বাতির ফোকাসিং নব হোলকে সামঞ্জস্য করুন ("←→" দিয়ে চিহ্নিত), যাতে ফিলামেন্টটি দেয়ালে প্রজেক্ট হয় 1-2 মি দূরে, এবং ফিলামেন্ট ইমেজ সমন্বয় করা হয়. তারপর ফিলামেন্টের অবস্থান উপযুক্ত করতে ফিলামেন্ট গর্ত ("──" দিয়ে চিহ্নিত) সামঞ্জস্য করতে বাতির উচ্চতা সামঞ্জস্য করুন; তারপর ফিলামেন্টের বাম এবং ডান অবস্থানকে উপযুক্ত করার জন্য বাতিটির বাম এবং ডান অবস্থানের সমন্বয় স্ক্রু গর্তগুলি ("──" দিয়ে চিহ্নিত) সামঞ্জস্য করুন।
2. মাইক্রোস্কোপে আলোক উৎস ইলুমিনেটর (ফিলামেন্ট) এর অবস্থান পরিদর্শন এবং সংশোধনের উদ্দেশ্য হল অবজেক্টিভ লেন্সের দৃশ্যের ক্ষেত্রে ইলুমিনেটরের ইমেজ প্রান্তকে সামঞ্জস্য করা এবং দেখার ক্ষেত্রটি নিশ্চিত করা। অণুবীক্ষণ যন্ত্রটি সম্পূর্ণরূপে এবং অভিন্নভাবে আলোর উৎসের দৃষ্টিকোণ থেকে প্রাপ্ত হয়। আলো, যা Kühler আলো ব্যবস্থা সামঞ্জস্য করার জন্য একটি পূর্বশর্ত। প্রয়োজনীয় মৌলিক সরঞ্জাম: সেন্টারিং টেলিস্কোপগুলি মাইক্রোস্কোপ ক্রয়ের সাথে সজ্জিত। ① ল্যাম্প হাউসে ফ্রস্টেড কাচের হাতা খুলে ফেলুন এবং ল্যাম্প হাউসটিকে আবার মাইক্রোস্কোপে রাখুন ② একটি 10× অবজেক্টিভ লেন্স নির্বাচন করুন, নমুনা খুঁজে পেতে আলোর উত্স প্রোগ্রাম চালু করুন এবং স্পষ্টভাবে ফোকাস সামঞ্জস্য করুন এবং তারপরে একটি 40× উদ্দেশ্য ব্যবহার করুন নমুনাকে স্পষ্টভাবে ফোকাস করার জন্য লেন্স (40× অবজেক্টিভ লেন্সে ফিলামেন্টের পুরো ছবি পরিষ্কারভাবে দেখা যায়); ③ কনডেনসারের অ্যাপারচার ডায়াফ্রাম এবং ফিল্ড ডায়াফ্রাম উভয়ই সর্বোচ্চ খুলুন; ④ একটি আইপিস আনপ্লাগ করুন, এটিকে একটি কেন্দ্রীভূত টেলিস্কোপ দিয়ে প্রতিস্থাপন করুন, সাদা অংশটি ধরুন এবং অন্য হাত দিয়ে কালো আইপিসটি প্রসারিত করুন, ফিলামেন্ট চিত্রটি দৃষ্টিক্ষেত্রে দেখা যেতে পারে; ⑤যদি ফিলামেন্টের অবস্থান উপযুক্ত না হয়, "──" গর্ত সামঞ্জস্য করুন, অনুভূমিক দিকে ফিলামেন্ট চিত্র সামঞ্জস্য করুন, "──" গর্ত সামঞ্জস্য করুন, এবং ফিলামেন্ট চিত্রটিকে একটি বৃত্তাকারে সামঞ্জস্য না করা পর্যন্ত উল্লম্ব দিক থেকে ফিলামেন্ট চিত্র সামঞ্জস্য করুন ইমেজ যে শুধু উদ্দেশ্য লেন্সের অ্যাপারচার পূরণ করে; ⑥ সামঞ্জস্যের পরে, ফ্রস্টেড কাচের হাতাটি তার আসল অবস্থানে ঢোকান, কেন্দ্রীভূত টেলিস্কোপটি আনপ্লাগ করুন এবং পরবর্তী সমন্বয়ের জন্য আইপিসটি প্রতিস্থাপন করুন। অণুবীক্ষণ যন্ত্রের বাইরে আলোকিত আলোর উৎস ল্যাম্প রুমের উপরে উল্লিখিত সামঞ্জস্য এবং অণুবীক্ষণ যন্ত্রের ভিতরে আলোর উৎস ইলুমিনেটরের অবস্থানের ক্রমাঙ্কন শুধুমাত্র তখনই সম্পন্ন করতে হবে যখন মাইক্রোস্কোপটি প্রথমবার ইনস্টল করা এবং ডিবাগ করা হয় এবং বাল্বটি সম্পূর্ণ হয়। প্রতিস্থাপিত বিভ্রান্তির ক্ষেত্রে, আপনি উপরের পদক্ষেপগুলি অনুসারে এটিকে মূল অবস্থায় ফিরিয়ে আনতে পারেন।
3. কোহলার ইলুমিনেশন (কোহলার) সিস্টেমের সঠিক সমন্বয় অণুবীক্ষণ যন্ত্রের সঠিক সমন্বয়, প্রধান কাজগুলির মধ্যে একটি হল আলোকসজ্জার আলো পথ ব্যবস্থার সমন্বয় এবং মূলটি হল কোহলার আলোকসজ্জা ব্যবস্থার সমন্বয়। প্রত্যেকের জন্য যারা মাইক্রোস্কোপ ব্যবহার করেন, বিশেষ করে যারা মাইক্রোগ্রাফ নেন, তাদের কুহলার আলোকসজ্জা পদ্ধতির নীতি এবং এর সামঞ্জস্যের পদক্ষেপগুলির একটি নির্দিষ্ট বোঝা এবং দক্ষতা থাকা উচিত, যাতে তারা মাইক্রোস্কোপের কার্যকারিতাগুলি সম্পূর্ণরূপে খেলতে পারে। ফলস্বরূপ ফটোগুলি আরও সামঞ্জস্যপূর্ণ এবং কার্যকর হতে পারে। Kühler আলোকসজ্জা ব্যবস্থার নীতিটি সহজভাবে: আলোক উৎস ইলুমিনেটরের যেকোনো বিন্দু দ্বারা নির্গত আলো মাইক্রোস্কোপের দৃশ্যের ক্ষেত্রকে আলোকিত করতে পারে এবং আলোক উৎস ইলুমিনেটরের প্রতিটি বিন্দু দ্বারা নির্গত আলো সংগ্রহ করা হয়, এবং এটি মাইক্রোস্কোপ দেখার ক্ষেত্র। একটি খুব পর্যাপ্ত এবং অভিন্ন আলোকসজ্জা অর্জন করা হয়। কুহলার আলোকসজ্জা ব্যবস্থা সামঞ্জস্য করার উদ্দেশ্য হল পর্যবেক্ষণের ক্ষেত্রের জন্য অভিন্ন এবং পর্যাপ্ত আলোকসজ্জা প্রাপ্ত করা এবং বিপথগামী আলোকে ইমেজিং সিস্টেমকে প্রভাবিত বা হস্তক্ষেপ করা থেকে বিরত রাখা, যাতে ফটোগ্রাফির সময় নেতিবাচক দিকে কুয়াশা তৈরি হওয়া এড়ানো যায়। একটি উচ্চ-সামঞ্জস্য Kühler আলোকসজ্জা সিস্টেমের অপরিহার্য উপাদান: ফিল্ড ডায়াফ্রাম, অন-অক্ষ সমন্বয় সহ কনডেনসার সিস্টেম। ① 10× অবজেক্টিভ লেন্স এবং 10× আইপিস নির্বাচন করুন ② কনডেন্সারের সামনের লেন্সটি অপটিক্যাল পাথে রাখুন, অ্যাপারচার ডায়াফ্রামকে একটি মাঝারি অবস্থানে সামঞ্জস্য করুন (খুব বড় নয় বা খুব ছোট নয়), তারপর কনডেন্সারটি বাড়ান। উপরের অবস্থানে, এবং কনডেন্সার টার্নটেবলটিকে উজ্জ্বল ক্ষেত্রের "J" অবস্থানে সামঞ্জস্য করুন ③ ফিল্ড ডায়াফ্রামটি সর্বনিম্ন (0.1) এ সামঞ্জস্য করুন
④ মঞ্চে সিল করা জৈবিক নমুনা রাখুন, আলোর উত্সটি চালু করুন এবং স্পষ্টভাবে ফোকাস করুন
⑤ একটি স্থানীয়ভাবে আলোকিত এলাকা বা উজ্জ্বল স্পট দৃশ্যের ক্ষেত্রে প্রদর্শিত হবে, যা ক্ষেত্র ডায়াফ্রামের একটি অস্পষ্ট চিত্র, যেখানে নমুনার বিবরণ স্পষ্টভাবে দেখা যাবে; নমুনার বিবরণ পরিষ্কারভাবে দেখুন
⑥ কনডেন্সারকে কিছুটা কম করুন, যাতে দৃশ্যের ক্ষেত্রের উজ্জ্বল স্থানটি ধীরে ধীরে সরু হয়ে যায় এবং ধীরে ধীরে একটি পরিষ্কার বহুভুজ চিত্রে পরিণত হয়, যা ক্ষেত্রের মধ্যচ্ছদাটির স্পষ্ট চিত্র;
⑦ সাধারণ পরিস্থিতিতে, বহুভুজ চিত্রটি দৃশ্যের ক্ষেত্রের কেন্দ্রে থাকে না। কেন্দ্রের অবস্থানে দৃশ্যের ক্ষেত্রের বহুভুজ চিত্রকে সামঞ্জস্য করার জন্য কনডেন্সারের কেন্দ্রীভূত স্ক্রুগুলির একটি জোড়া সামঞ্জস্য করা প্রয়োজন;
⑧ বহুভুজ চিত্রটি দৃশ্যের ক্ষেত্রের একটি খোদাইকৃত বহুভুজ হয়ে উঠতে ধীরে ধীরে দৃশ্যের ক্ষেত্রটি ডায়াফ্রাম খুলুন এবং আরও সারিবদ্ধ অবস্থা পরীক্ষা করুন। প্রান্তিককরণ আদর্শ না হলে, প্রান্তিককরণ স্ক্রুটি সামান্য সামঞ্জস্য করা চালিয়ে যান;
⑨ দৃশ্যের ক্ষেত্রের প্রান্তে বহুভুজ চিত্রটি অদৃশ্য হয়ে যাওয়ার জন্য ফিল্ড ডায়াফ্রামটি সামান্য খুলুন। এই মুহুর্তে, Kühler আলো সিস্টেমের সমন্বয় সম্পন্ন হয়। Kühler আলোকসজ্জা ব্যবস্থা সামঞ্জস্য করার পরে, দৃশ্যের পুরো ক্ষেত্রটি সমানভাবে আলোকিত হয়েছিল এবং মাইক্রোগ্রাফগুলি স্বাভাবিক বৈপরীত্যের সাথে উজ্জ্বল এবং পরিষ্কার ছিল।
