ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপের মৌলিক এবং কাঠামোগত উপাদান
ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপি একটি নির্দিষ্ট তরঙ্গদৈর্ঘ্যের (যেমন অতিবেগুনী আলো 3650 ইঞ্চি বা বেগুনি নীল আলো 4200 ইঞ্চি) আলো নির্গত করার জন্য উচ্চ উজ্জ্বল দক্ষতার একটি বিন্দু ব্যবহার করে ফিল্টার সিস্টেমের মাধ্যমে উত্তেজনা আলো হিসাবে ফ্লুরোসেন্স নির্গত করার নমুনায় ফ্লুরোসেন্ট পদার্থকে উত্তেজিত করতে। বিভিন্ন রং এর পরে, অবজেক্টিভ লেন্স এবং আইপিসের বিবর্ধনের মাধ্যমে পর্যবেক্ষণ করুন। এইভাবে, একটি শক্তিশালী বৈসাদৃশ্য পটভূমির অধীনে, এমনকি যদি ফ্লুরোসেন্স খুব দুর্বল হয়, এটি সনাক্ত করা সহজ এবং উচ্চ সংবেদনশীলতা রয়েছে। এটি প্রধানত কোষের গঠন এবং ফাংশন এবং রাসায়নিক গঠন গবেষণার জন্য ব্যবহৃত হয়। একটি ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপের মৌলিক কাঠামো একটি সাধারণ অপটিক্যাল মাইক্রোস্কোপ এবং কিছু আনুষাঙ্গিক (যেমন একটি ফ্লুরোসেন্ট আলোর উৎস, একটি উত্তেজনা ফিল্টার, একটি দুই রঙের বিম স্প্লিটার এবং একটি ব্লকিং ফিল্টার ইত্যাদি) দিয়ে গঠিত। ফ্লুরোসেন্ট আলোর উৎস—সাধারণত অতি-উচ্চ চাপ পারদ বাতি (50-200W) ব্যবহার করে, যা বিভিন্ন তরঙ্গদৈর্ঘ্যের আলো নির্গত করতে পারে, কিন্তু প্রতিটি ফ্লুরোসেন্ট পদার্থের একটি উত্তেজনা তরঙ্গদৈর্ঘ্য থাকে যা সবচেয়ে শক্তিশালী ফ্লুরোসেন্স তৈরি করে, তাই একটি উত্তেজনা ফিল্টার (সাধারণত, অতিবেগুনী, বেগুনি, নীল এবং সবুজ উত্তেজনা ফিল্টার আছে), যা শুধুমাত্র একটি নির্দিষ্ট তরঙ্গদৈর্ঘ্যের উত্তেজনা আলোকে অন্য আলো শোষণ করার সময় নমুনাকে বিকিরণ করতে দেয়। প্রতিটি পদার্থ উত্তেজনা আলো দ্বারা বিকিরণিত হওয়ার পরে, এটি খুব অল্প সময়ের মধ্যে বিকিরণ তরঙ্গদৈর্ঘ্যের চেয়ে দীর্ঘতর তরঙ্গদৈর্ঘ্য সহ দৃশ্যমান প্রতিপ্রভ নির্গত করে। ফ্লুরোসেন্স নির্দিষ্ট এবং উত্তেজনা আলোর তুলনায় সাধারণত দুর্বল। নির্দিষ্ট ফ্লুরোসেন্স পর্যবেক্ষণ করার জন্য, অবজেক্টিভ লেন্সের পিছনে ব্লকিং (বা দমন) যোগ করতে হবে এবং এটির সাথে একত্রে ব্যবহার করতে হবে।
ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ এবং সাধারণ মাইক্রোস্কোপের মধ্যে পার্থক্য
1. আলোকসজ্জা পদ্ধতিটি সাধারণত এপিস্কোপিক হয়, অর্থাৎ, আলোর উত্সটি উদ্দেশ্যমূলক লেন্সের মাধ্যমে নমুনার উপর প্রক্ষিপ্ত হয়;
2. আলোর উৎস হল অতিবেগুনী রশ্মি, তরঙ্গদৈর্ঘ্য ছোট, এবং রেজোলিউশন সাধারণ মাইক্রোস্কোপের চেয়ে বেশি;
3. দুটি বিশেষ ফিল্টার আছে, আলোর উৎসের সামনের একটি দৃশ্যমান আলোকে ফিল্টার করার জন্য ব্যবহার করা হয় এবং আইপিস এবং অবজেক্টিভ লেন্সের মধ্যবর্তী একটিটি মানুষের চোখের সুরক্ষার জন্য অতিবেগুনী রশ্মি ফিল্টার করতে ব্যবহৃত হয়।
ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপও এক ধরনের অপটিক্যাল মাইক্রোস্কোপ, প্রধান পার্থক্য হল দুটির উত্তেজনা তরঙ্গদৈর্ঘ্য ভিন্ন। এটি গঠন এবং ব্যবহারের ক্ষেত্রে ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ এবং সাধারণ অপটিক্যাল মাইক্রোস্কোপের মধ্যে পার্থক্য নির্ধারণ করে।
ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপি ইমিউনোফ্লোরসেন্ট সাইটোকেমিস্ট্রির একটি অপরিহার্য হাতিয়ার। এটি প্রধান উপাদান যেমন আলোর উৎস, ফিল্টার প্লেট সিস্টেম এবং অপটিক্যাল সিস্টেমের সমন্বয়ে গঠিত। এটি হল ফ্লুরোসেন্স নির্গত করার জন্য নমুনাকে উত্তেজিত করার জন্য আলোর একটি নির্দিষ্ট তরঙ্গদৈর্ঘ্য ব্যবহার করা, এবং উদ্দেশ্যমূলক লেন্স এবং আইপিস সিস্টেমকে প্রশস্ত করে নমুনার ফ্লুরোসেন্স ইমেজ পর্যবেক্ষণ করা।
