ফ্লুরোসেন্ট মাইক্রোস্কোপ নমুনা উৎপাদনের জন্য প্রয়োজনীয়তা
(1) কাচের স্লাইড
স্লাইডের পুরুত্ব 0.8 এবং 1.2 মিমি এর মধ্যে হওয়া উচিত। যদি স্লাইডটি খুব পুরু হয়, একদিকে, এটি আরও আলো শোষণ করে, এবং অন্যদিকে, এটি নমুনার উপর উত্তেজনাপূর্ণ আলো সংগ্রহ করতে পারে না। স্লাইডটি অবশ্যই মসৃণ, বেধে অভিন্ন এবং সুস্পষ্ট স্বতঃস্ফূর্ত ফ্লুরোসেন্স থেকে মুক্ত হতে হবে। কখনও কখনও কোয়ার্টজ গ্লাস স্লাইড প্রয়োজন হয়।
(2) কাচের স্লাইড কভার করুন
কভার গ্লাসের বেধ প্রায় 0.17 মিমি, যা মসৃণ এবং পরিষ্কার। উত্তেজনা বাড়ানোর জন্য, হস্তক্ষেপ কভার গ্লাসও ব্যবহার করা যেতে পারে। এটি একটি বিশেষভাবে ডিজাইন করা কভার গ্লাস যেখানে পদার্থের বিভিন্ন স্তর রয়েছে (যেমন ম্যাগনেসিয়াম ফ্লোরাইড) যার আলোর বিভিন্ন তরঙ্গদৈর্ঘ্যের উপর বিভিন্ন হস্তক্ষেপের প্রভাব রয়েছে। এটি ফ্লুরোসেন্সকে মসৃণভাবে পাস করতে দেয়, যখন প্রতিফলন উত্তেজনা নমুনাটিকে উত্তেজিত করতে পারে।
(3) নমুনা
টিস্যু স্লাইস বা অন্যান্য নমুনাগুলি খুব বেশি পুরু হওয়া উচিত নয়, কারণ উত্তেজনা আলো বেশিরভাগই নমুনার নীচের অংশে গ্রাস করা হয়, যখন উদ্দেশ্যমূলক লেন্স দ্বারা সরাসরি পর্যবেক্ষণ করা উপরের অংশটি পুরোপুরি উত্তেজিত হয় না। উপরন্তু, সেল ওভারল্যাপ বা অপবিত্রতা মাস্কিং রায় প্রভাবিত করতে পারে।
(4) সিলিং এজেন্ট
গ্লিসারিন সাধারণত একটি মাউন্টিং এজেন্ট হিসাবে ব্যবহৃত হয় এবং এটি অবশ্যই স্বতঃস্ফূর্ত প্রতিপ্রভ, বর্ণহীন এবং স্বচ্ছ থেকে মুক্ত হতে হবে। ফ্লুরোসেন্সের উজ্জ্বলতা pH 8.5~9.5-এ উজ্জ্বল, এবং এটি দ্রুত বিবর্ণ হওয়া সহজ নয়। তাই, pH 9 এ গ্লিসারল এবং 0.5mol/l কার্বনেট বাফারের সমান মিশ্রণ৷{7}}.5 সাধারণত সিলিং এজেন্ট হিসাবে ব্যবহৃত হয়৷
(5) আয়নার তেল
একটি অন্ধকার ক্ষেত্রের ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ এবং একটি তেল মাইক্রোস্কোপ ব্যবহার করে নমুনাগুলি পর্যবেক্ষণ করার সময়, লেন্স তেল ব্যবহার করা প্রয়োজন। এটি একটি বিশেষভাবে তৈরি নন ফ্লুরোসেন্ট লেন্স তেল ব্যবহার করা ভাল, যা উপরে উল্লিখিত হিসাবে গ্লিসারল দিয়ে প্রতিস্থাপন করা যেতে পারে। তরল প্যারাফিনও ব্যবহার করা যেতে পারে, তবে প্রতিসরণ সূচক কম এবং ছবির মানের উপর সামান্য প্রভাব ফেলে।
ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ ব্যবহার করার জন্য সতর্কতা
(1) ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপের ফ্যাক্টরি ম্যানুয়াল প্রয়োজনীয়তাগুলি কঠোরভাবে অনুসরণ করুন এবং যথেচ্ছভাবে প্রোগ্রামটি পরিবর্তন করবেন না।
(2) একটি অন্ধকার ঘরে পরিদর্শন করা উচিত। অন্ধকার ঘরে প্রবেশ করার পরে, পাওয়ার সাপ্লাই সংযোগ করুন এবং 5 থেকে 15 মিনিটের জন্য অতি-উচ্চ চাপের পারদ বাতি জ্বালান। আলোর উত্স শক্তিশালী আলো নির্গত করার পরে এবং স্থিতিশীল হওয়ার পরে, নমুনাটি পর্যবেক্ষণ করা শুরু করার আগে চোখ সম্পূর্ণরূপে অন্ধকার ঘরে খাপ খায়।
(3) চোখের UV ক্ষতি রোধ করতে, আলোর উত্স সামঞ্জস্য করার সময় প্রতিরক্ষামূলক চশমা পরা উচিত।
(4) প্রতিবার পরিদর্শনের সময় 1-2 ঘণ্টা হওয়া উচিত। যদি এটি 90 মিনিটের বেশি হয়, অতি-উচ্চ চাপ পারদ বাতির আলোকিত তীব্রতা ধীরে ধীরে হ্রাস পায় এবং প্রতিপ্রভা দুর্বল হয়; 3-5 মিনিটের জন্য অতিবেগুনী বিকিরণের সংস্পর্শে আসার পর, নমুনার ফ্লুরোসেন্সও উল্লেখযোগ্যভাবে কমে যায়; সুতরাং, এটি সর্বাধিক 2-3 ঘণ্টার বেশি হওয়া উচিত নয়।
(5) ফ্লুরোসেন্ট মাইক্রোস্কোপ আলোর উত্সের আয়ুষ্কাল সীমিত, এবং সময় বাঁচাতে এবং আলোর উত্স রক্ষা করতে নমুনাটি কেন্দ্রীয়ভাবে পরিদর্শন করা উচিত। আবহাওয়া গরম হলে, তাপ নষ্ট করতে এবং ঠান্ডা করার জন্য একটি বৈদ্যুতিক পাখা যোগ করতে হবে। একটি নতুন আলোর বাল্ব প্রতিস্থাপন করার সময়, ব্যবহারের সময় শুরু থেকে রেকর্ড করা উচিত। যখন বাতিটি বন্ধ হয়ে যায় এবং আবার ব্যবহার করতে চায়, তখন এটি প্রজ্বলিত হওয়ার আগে বাল্বটি সম্পূর্ণ ঠান্ডা হওয়ার জন্য অপেক্ষা করতে হবে। আলোর উৎস একাধিকবার জ্বালানো এড়িয়ে চলুন।
(6) দাগ লাগার পরপরই নমুনাটি পর্যবেক্ষণ করুন, কারণ সময়ের সাথে সাথে ফ্লুরোসেন্স ধীরে ধীরে হ্রাস পায়। যদি নমুনাটি একটি পলিথিন প্লাস্টিকের ব্যাগে 4 ডিগ্রিতে সংরক্ষণ করা হয়, তবে এটি ফ্লুরোসেন্স অ্যাটেন্যুয়েশন সময়কে বিলম্বিত করতে পারে এবং মাউন্টিং এজেন্টের বাষ্পীভবন রোধ করতে পারে।
(7) ফ্লুরোসেন্স উজ্জ্বলতার বিচারের মানকে সাধারণত চারটি স্তরে বিভক্ত করা হয়, যথা "এক" - নেই বা দৃশ্যমান দুর্বল ফ্লুরোসেন্স। প্লাস - শুধুমাত্র স্পষ্টভাবে দৃশ্যমান ফ্লুরোসেন্স দেখা যায়। প্লাস প্লাস - উজ্জ্বল ফ্লুরোসেন্স সহ দৃশ্যমান। 'প্লাস প্লাস প্লাস' - দৃশ্যমান এবং জমকালো ফ্লুরোসেন্স।
