মাইক্রোস্কোপিক ইমেজিং ক্লাসরুম丨ওয়াইডফিল্ড ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ
লাইভ সেল ইমেজিং অ্যাপ্লিকেশনগুলিতে, ওয়াইডফিল্ড ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপি মাইক্রোস্কোপ পর্যায়ে স্থাপিত নির্দিষ্ট পরিবেশগত চেম্বারে জন্মানো অনুগত কোষগুলির গতিশীলতা পর্যবেক্ষণের সুবিধা দেয়। এর সবচেয়ে মৌলিক কনফিগারেশনে, ইপিআই ফ্লুরোসেন্স আলোকসজ্জায় সজ্জিত একটি স্ট্যান্ডার্ড ইনভার্টেড টিস্যু কালচার মাইক্রোস্কোপ একটি এরিয়া অ্যারে ডিটেক্টর সিস্টেম (সাধারণত একটি সিসিডি ক্যামেরা), উপযুক্ত ফ্লুরোসেন্স ফিল্টার এবং ক্ষতিকারক উত্তেজনা আলোতে কোষের অত্যধিক এক্সপোজার সীমিত করার জন্য একটি শাটার সিস্টেমের সাথে মিলিত হয়। . বেসিক ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপি আলোকসজ্জা এবং নির্গত আলো সনাক্তকরণের জন্য নির্দিষ্ট ব্যান্ডউইথ নির্বাচন করতে সাবধানে মিলে যাওয়া হস্তক্ষেপ ফিল্টারের উপর নির্ভর করে। আলোর উত্সগুলির মধ্যে রয়েছে পারদ, জেনন এবং মেটাল হ্যালাইড আর্ক ল্যাম্প, বিম এক্সপেন্ডিং লেজার সিস্টেম, এবং লাইট ইমিটিং ডায়োড (এলইডি), যার সবকটির জন্য আলাদা ফিল্টার স্পেসিফিকেশন প্রয়োজন। ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপিতে ব্যবহৃত সিন্থেটিক ফ্লুরোফোরে নিঃসরণ বর্ণালী রয়েছে যা অতিবেগুনী, দৃশ্যমান এবং কাছাকাছি-ইনফ্রারেড অঞ্চলকে আবৃত করে। জেনেটিক্যালি এনকোডেড ফ্লুরোসেন্ট প্রোটিনের ব্যবহার লাইভ-সেল ইমেজিংয়ে ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপির ক্ষমতাকে ব্যাপকভাবে প্রসারিত করেছে, যার ফলে গবেষকরা সুনির্দিষ্টভাবে আগ্রহের উপকোষীয় অঞ্চলগুলিকে লক্ষ্য করতে পারবেন।
Nuohai LS 18, নুওহাই দ্বারা স্বাধীনভাবে তৈরি একটি নতুন ধরনের আলোক-শীট আলোকসজ্জা মাইক্রোস্কোপ, বিশেষভাবে স্বচ্ছ বড় টিস্যুর নমুনার উচ্চ-রেজোলিউশন 3D ইমেজিংয়ের জন্য ডিজাইন করা হয়েছে এবং এটি মস্তিষ্ক, প্লীহা, ছোট অন্ত্রের মতো বিভিন্ন অক্ষত টিস্যু অন্বেষণের জন্য নিবেদিত। , কিডনি, ফুসফুস, হার্ট এবং টিউমার। অঙ্গগুলির 3D সুনির্দিষ্ট গঠন।
ওয়াইডফিল্ড ফ্লুরোসেন্সে, মাইক্রোস্কোপের উদ্দেশ্য দ্বারা সংগৃহীত পূর্ণ-অ্যাপারচার নির্গমন প্রয়োজনীয় এক্সপোজার সময়কে কম করে রেকর্ড করা সংকেতকে সর্বাধিক করে তোলে। এইভাবে, নমুনাগুলি খুব অল্প আলোক সময়ের সাথে চিত্রিত করা যেতে পারে। ওয়াইডফিল্ড ইমেজিংয়ের প্রধান অসুবিধা হল ফোকাল প্লেন থেকে অনেক দূরে অঞ্চল থেকে ফ্লুরোসেন্স, সেইসাথে পটভূমি সংকেত, অবাঞ্ছিত আলো যা প্রায়শই আগ্রহের বৈশিষ্ট্যগুলিকে অস্পষ্ট করে। অতএব, ওয়াইডফিল্ড ইমেজিং সর্বোত্তম ফলাফল দেয় যখন আগ্রহের বৈশিষ্ট্যগুলি বড় হয় (যেমন অর্গানেল) বা প্রকৃতিতে অত্যন্ত বিরামযুক্ত। অনুগত কোষ, ব্যাকটেরিয়া, ইস্ট এবং খুব পাতলা টিস্যু বিভাগ সহ বিভিন্ন ধরণের জীবন্ত কোষের নমুনাগুলি ওয়াইডফিল্ড ফ্লুরোসেন্স ইমেজিংয়ের জন্য আদর্শ প্রার্থী, তবে, আরও উন্নত পদ্ধতি ইমেজিংয়ের সাথে মোটা টিস্যু (5 মাইক্রনের বেশি) সবচেয়ে ভাল ব্যবহার করা হয়।
যদিও সিন্থেটিক ফ্লুরোসেন্ট রঞ্জক, কোয়ান্টাম ডট এবং ফ্লুরোসেন্ট প্রোটিন সহ ফ্লুরোসেন্ট ইমেজিংয়ে অনেক অগ্রগতি হয়েছে, কিছু ক্ষেত্রে এটি অন্যান্য ইমেজিং পদ্ধতির সাথে ফ্লুরোসেন্টকে একত্রিত করা সহায়ক। একটি উদাহরণ হিসাবে, নির্দিষ্ট লেবেলযুক্ত লক্ষ্যগুলির জন্য আগ্রহের ঘটনা অধ্যয়ন করার সময় কোষের কার্যক্ষমতা এবং সাধারণ রূপবিদ্যা নিরীক্ষণের জন্য ডিআইসি ওয়াইডফিল্ড ফ্লুরোসেন্সের সাথে ব্যবহার করা যেতে পারে। একটি একক চিত্রে ডিআইসি এবং ফ্লুরোসেন্স অর্জন করা সাধারণত অব্যবহারিক, তবে একটি সঠিকভাবে কনফিগার করা মাইক্রোস্কোপে দুটি কৌশল ক্রমানুসারে ব্যবহার করা যেতে পারে। এইভাবে, এপিফ্লুরোসেন্স মোডে ইমেজ করার পরে, প্রেরিত আলো ব্যবহার করে ফ্লুরোসেন্টলি লেবেলযুক্ত নমুনাগুলি থেকে ডিআইসি চিত্রগুলি অর্জন করা যেতে পারে। দুটি ছবি পোস্ট-বিশ্লেষণের সময় একত্রিত করা যেতে পারে। DIC এবং ফ্লুরোসেন্স ইমেজ একযোগে অধিগ্রহণ বর্ণালীভাবে পৃথক আলোকসজ্জা (যেমন দৃশ্যমান এবং কাছাকাছি-ইনফ্রারেড) এবং ডুয়াল-ক্যামেরা বা স্প্লিট-ভিউ ক্যামেরা অ্যাডাপ্টার ব্যবহার করে উন্নত ওয়াইডফিল্ড মাইক্রোস্কোপ কনফিগারেশনে সম্ভব। বেশিরভাগ লেজার স্ক্যানিং কনফোকাল মাইক্রোস্কোপে, ছবিগুলি একই সাথে ফ্লুরোসেন্স এবং ডিআইসি উভয় মোডে অর্জিত হতে পারে, অধিগ্রহণ-পরবর্তী প্রক্রিয়াকরণের প্রয়োজনীয়তা দূর করে। ফেজ কনট্রাস্ট এবং হফম্যান মডুলেশন কনট্রাস্টও ওয়াইডফিল্ড ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপির সাথে ব্যবহার করা যেতে পারে। যাইহোক, এই কৌশলগুলিতে, উদ্দেশ্যমূলক লেন্সটি বিশেষ, এটি একটি ফেজ রিং বা হফম্যান মডুলেশন প্লেটই হোক না কেন, এটি 5-15 শতাংশ নির্গমনের তীব্রতা হ্রাস করবে।
নিবন্ধের লিঙ্ক: যন্ত্র সরঞ্জাম নেটওয়ার্ক https://www.instrumentsinfo.com/technology/show-1123.html
