মাইক্রোস্কোপ স্লাইড তৈরির পদ্ধতি
মাইক্রোস্কোপ স্লাইড তৈরির তিনটি পদ্ধতি রয়েছে:
1. স্মিয়ার পদ্ধতি
স্মিয়ার পদ্ধতি হল প্রস্তুতির একটি পদ্ধতি যেখানে উপাদানটি স্লাইডে সমানভাবে ছড়িয়ে দেওয়া হয়।
স্মিয়ার উপাদানগুলির মধ্যে রয়েছে এককোষী জীব, ছোট শৈবাল, রক্ত, ব্যাকটেরিয়া সংস্কৃতি, গাছপালা ও প্রাণীর আলগা টিস্যু, শুক্রাণুর বাসা, অ্যান্থার ইত্যাদি।
দাগ দেওয়ার সময় মনোযোগ দেওয়া উচিত:
(1) স্লাইড পরিষ্কার হতে হবে।
(2) স্লাইড সমতল রাখা উচিত.
3) আবরণ অভিন্ন হতে হবে। স্লাইডের কেন্দ্রের ডানদিকে আবরণের তরলের ফোঁটাটি প্রয়োগ করুন এবং একটি ছিন্নকারী ছুরি বা একটি টুথপিক ইত্যাদির ব্লেড দিয়ে ভালভাবে ছড়িয়ে দিন।
4) আবরণ পাতলা হতে হবে। একটি পুশার হিসাবে আরেকটি স্লাইড ব্যবহার করুন, প্রয়োগ দ্রবণের ড্রপ দিয়ে স্লাইডের পৃষ্ঠ বরাবর ডান থেকে বামে আলতোভাবে ধাক্কা দিন (দুটি স্লাইডের মধ্যে কোণটি 30 ডিগ্রি থেকে 45 ডিগ্রি হওয়া উচিত), এবং একটি সমানভাবে পাতলা স্তর প্রয়োগ করুন।
5) স্থিরকরণ। যদি ফিক্সেশন প্রয়োজন হয়, রাসায়নিক ফিক্সেটিভ বা ডেসিকেশন (ব্যাকটেরিয়াল) ফিক্সেশন ব্যবহার করুন।
6) স্টেনিং। ব্যাকটেরিয়ার জন্য মিথিলিন ব্লু এবং রক্তের জন্য রাহেলের দাগ ব্যবহার করুন। স্টেনিং দ্রবণটি পুরো প্রলিপ্ত পৃষ্ঠকে আবৃত করা উচিত।
7) ধুয়ে ফেলুন। শোষণকারী কাগজে শোষণ করুন বা শুকনো বেক করুন।
8) ফিল্ম সিল. দীর্ঘমেয়াদী স্টোরেজের জন্য, কানাডিয়ান ট্রি ফিল্ম ব্যবহার করুন।
2. ফিল্ম প্রেসিং পদ্ধতি
চাপ ফিল্ম পদ্ধতি হল জৈবিক উপাদান স্লাইড এবং কভার শীট মধ্যে স্থাপন করা হয়, একটি নির্দিষ্ট চাপ প্রয়োগ করে, টিস্যু কোষগুলি প্রস্তুতির একটি পদ্ধতি ছাড়াও চাপা হবে।
(1) উপাদান নিন। কোষ বিভাজন পর্যবেক্ষণ, কোষ বিভাজন উপাদান হিসাবে বিস্তৃত, তাজা টিস্যু কোষ নির্বাচন করা উচিত। যেমন রুট টিপস, স্টেম টিপ মেরিস্টেম্যাটিক টিস্যু, অস্থি মজ্জা কোষ, অ্যান্থার (পরাগ মাদার কোষ)। শুক্রাণু বাসা (spermatogonia) এবং তাই।
(2) স্থিরকরণ। উপাদান স্থিরকরণ প্রয়োজন অনুযায়ী নির্ধারণ করা যেতে পারে, অবিলম্বে উপাদান চাপ ফিল্ম পর্যবেক্ষন গ্রহণ করার পরে, একটি পৃথক স্থায়ী চিকিত্সা করতে পারবেন না (এবং staining সিঙ্ক্রোনাস); উপাদান গ্রহণ অবিলম্বে পরিদর্শন পরে না, উপাদান একটি fixative (সাধারণত অ্যালকোহল অ্যাসিটেট fixative সঙ্গে) সঙ্গে সংশোধন করা যেতে পারে. স্থির 2 ~ 24 ঘন্টা (উপাদানের উপর নির্ভর করে) 95% ইথানল দিয়ে ধোয়ার পরে, 70% ইথানলে সংরক্ষিত, স্ট্যান্ডবাই।
(3) বিয়োজন। কোষগুলিকে হাইড্রোলাইসিস সেপারেশন দ্রবণ (যেমন 1N HCl বা হাইড্রোক্লোরিক অ্যাসিড একটি অ্যালকোহল দ্রবণ) চিকিত্সা, সাধারণ চিকিত্সা 6 ~ 20min, বিচ্ছিন্ন করার পরে এবং দাগ দেওয়ার আগে জল দিয়ে ধুয়ে ফেলার মাধ্যমে উপাদানগুলি ছড়িয়ে দেওয়া সহজ নয়।
(4) দাগ দেওয়া। অনেক ধরনের দাগ আছে। ক্রোমোজোমের পর্যবেক্ষণ সাধারণত ম্যাজেন্টা অ্যাসিটেট স্টেনিং দ্রবণ দিয়ে দাগ দিতে ব্যবহৃত হয়।
(5) ফিল্ম টিপে. উপাদানটিকে একটি স্লাইডে রাখুন, এক ফোঁটা জল বা স্টেনিং দ্রবণ যোগ করুন, কভারস্লিপটি ঢেকে দিন এবং আপনার থাম্ব দিয়ে আলতো করে স্লাইডটি টিপুন।
(6) পর্যবেক্ষণ। ফিল্ম টিপানোর পরে, এটি মাইক্রোস্কোপের নীচে পর্যবেক্ষণ করা যেতে পারে।
