লেজার স্ক্যানিং মাল্টিফোটন মাইক্রোস্কোপির উন্নত সুবিধা
লেজার স্ক্যানিং মাল্টিফোটন মাইক্রোস্কোপি অপটিক্যাল মাইক্রোস্কোপির একটি বড় উন্নতি, প্রধানত জীবিত কোষ, স্থির কোষ এবং টিস্যুগুলির গভীর গঠন পর্যবেক্ষণের জন্য এবং পরিষ্কার এবং তীক্ষ্ণ মাল্টি-লেয়ার জেড-প্লেন স্ট্রাকচার, অর্থাৎ অপটিক্যাল স্লাইস, এবং গঠন করতে পারে। নমুনার ত্রিমাত্রিক কঠিন গঠন। কনফোকাল মাইক্রোস্কোপ একটি লেজার আলোর উত্স ব্যবহার করে, যা অবজেক্টিভ লেন্সের পুরো পিছনের ফোকাল প্লেনটি পূরণ করতে প্রসারিত হয় এবং তারপর অবজেক্টিভ লেন্সের লেন্স সিস্টেমের মাধ্যমে নমুনার ফোকাল প্লেনে একটি খুব ছোট বিন্দুতে রূপান্তরিত হয়। অবজেক্টিভ লেন্সের সাংখ্যিক অ্যাপারচারের উপর নির্ভর করে, উজ্জ্বলতম আলোক বিন্দুর ব্যাস প্রায় 0.25 ~ 0.8 μm, এবং গভীরতা প্রায় 0.5 ~ 1.5 μm কনফোকাল স্পটটির আকার মাইক্রোস্কোপের ডিজাইন, লেজারের তরঙ্গদৈর্ঘ্য, অবজেক্টিভ লেন্সের বৈশিষ্ট্য, স্ক্যানিং ইউনিটের স্টেট সেটিং এবং নমুনার প্রকৃতির উপর নির্ভর করে। ফিল্ড মাইক্রোস্কোপগুলিতে আলোকসজ্জার একটি বৃহৎ পরিসর এবং আলোকসজ্জার একটি বৃহৎ গভীরতা থাকে, যখন কনফোকাল মাইক্রোস্কোপগুলিতে আলোকসজ্জা থাকে যা ফোকাল সমতলের একটি কেন্দ্রবিন্দুতে কেন্দ্রীভূত হয়। কনফোকাল মাইক্রোস্কোপির সবচেয়ে মৌলিক সুবিধা হল যে এটি প্রায় 0.5 থেকে 1.5 μm পুরুত্বের সাথে পুরু ফ্লুরোসেন্ট নমুনার (50 μm বা তার বেশি) সূক্ষ্ম অপটিক্যাল বিভাগ করতে পারে। অণুবীক্ষণ যন্ত্র জেড-অক্ষ স্টেপার মোটর দিয়ে নমুনাটিকে উপরে এবং নীচে সরানোর মাধ্যমে অপটিক্যাল বিভাগের চিত্রগুলির একটি সিরিজ প্রাপ্ত করা যেতে পারে। ইমেজ তথ্যের অধিগ্রহণ প্লেনের মধ্যে নিয়ন্ত্রিত হয় এবং নমুনার অন্যান্য অবস্থান থেকে সংকেত দ্বারা হস্তক্ষেপ করা হবে না। ব্যাকগ্রাউন্ড ফ্লুরোসেন্সের প্রভাব অপসারণ এবং সংকেত-থেকে-শব্দ অনুপাত বাড়ানোর পরে, কনফোকাল চিত্রগুলির বৈসাদৃশ্য এবং রেজোলিউশন ঐতিহ্যগত ক্ষেত্রের আলোকসজ্জা প্রতিপ্রভ চিত্রগুলির তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে উন্নত হয়েছে। অনেক নমুনায়, জটিল সিস্টেম গঠনের জন্য অনেক জটিল কাঠামোগত উপাদান একে অপরের সাথে সংযুক্ত থাকে, কিন্তু একবার পর্যাপ্ত অপটিক্যাল বিভাগ সংগ্রহ করা গেলে, আমরা সফ্টওয়্যারের মাধ্যমে 3D তে তাদের পুনর্গঠন করতে পারি। কোষ বা টিস্যুগুলির মধ্যে জটিল কাঠামোগত এবং কার্যকরী সম্পর্ক ব্যাখ্যা করার জন্য এই পরীক্ষামূলক পদ্ধতিটি জৈবিক গবেষণায় ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয়েছে।
