ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপিতে উজ্জ্বল-ক্ষেত্র এবং অন্ধকার-ক্ষেত্রের ইমেজিং পদ্ধতি
(1) উজ্জ্বল ক্ষেত্র ইমেজিং (BFI) পদ্ধতি, যা শুধুমাত্র প্যারাক্সিয়াল অঞ্চলে প্রেরিত ইলেক্ট্রন রশ্মিকে উদ্দেশ্যমূলক অ্যাপারচারের মধ্য দিয়ে যেতে দেয়, একটি উজ্জ্বল পটভূমিতে একটি অন্ধকার চিত্র তৈরি করে। বস্তুনিষ্ঠ অ্যাপারচারের ছিদ্র যত ছোট হবে, উজ্জ্বল ক্ষেত্রের চিত্রের বৈসাদৃশ্য তত বেশি হবে; (2) ডার্ক ফিল্ড ইমেজিং (DFI) হল এমন একটি কৌশল যা ট্রান্সমিটেড বিমকে ব্লক করার সময় বৃহৎ কোণ বিক্ষিপ্ত রশ্মির একটি অংশ বা স্ফটিকের একটি নির্দিষ্ট ডিফ্র্যাকশন বিমকে উদ্দেশ্যমূলক অ্যাপারচারের মধ্য দিয়ে যেতে দেয়। এটি একটি অন্ধকার পটভূমিতে একটি উজ্জ্বল গ্রাফিক চিত্র তৈরি করে। এই অন্ধকার ক্ষেত্রের ইমেজিং পদ্ধতিটি ছবির বৈসাদৃশ্য উন্নত করতে পারে এবং এটি একটি গুরুত্বপূর্ণ ইমেজিং কৌশল।
লাইকা ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ ব্যবহার করে অন্ধকার ক্ষেত্রের চিত্রগুলি অর্জনের জন্য মোটামুটি চারটি পদ্ধতি রয়েছে: (1) বস্তুনিষ্ঠ অ্যাপারচার সরানোর সময় অপটিক্যাল অক্ষ বরাবর উল্লম্ব আলোকসজ্জা বজায় রাখা; (2) অপটিক্যাল অক্ষের দিকে বিক্ষিপ্ত বিমগুলিকে ক্যাপচার করতে তির্যক আলোকসজ্জার ব্যবহারকে সেন্ট্রাল ডার্ক ফিল্ড ইমেজিং (CDFI) বলা হয়; (3) একটি কেন্দ্রীয় মরীচি স্টপ এবং একটি বৃত্তাকার স্বচ্ছ এলাকা সহ একটি বস্তুনিষ্ঠ অ্যাপারচার; (4) আলোক সংবেদনের জন্য একটি বৃত্তাকার স্বচ্ছ কনডেনসার লেন্স এবং উদ্দেশ্যমূলক লেন্সের জন্য একটি কেন্দ্রীয় বৃত্তাকার অ্যাপারচার ব্যবহার করুন। এখানে * পদ্ধতিটি সবচেয়ে সহজ, তবে এটি দূরবর্তী স্লিভ এলাকায় ইলেকট্রনিক ইমেজিং ব্যবহার করে, তাই বিকৃতিটি বড় এবং ছবির গুণমান খুব ভাল নয়। দ্বিতীয় পদ্ধতিটি উপরের ত্রুটিগুলি এড়াতে পারে, তবে লাইকা ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপের উদ্দেশ্য ছিদ্র শুধুমাত্র বিক্ষিপ্ত বিচ্ছুরিত ইলেকট্রনের একটি ছোট অংশ গ্রহণ করে, যার ফলে দক্ষতা কম হয়। অ্যাপারচারের পাশে প্রায়শই প্রচুর পরিমাণে ইলেকট্রন বোমাবাজি হয়, যা সহজেই অসমমিতিক দূষণের কারণ হতে পারে এবং ছবির গুণমানকে প্রভাবিত করতে পারে। এই দিকটিতে অ্যানুলার অবজেক্টিভ লেন্স উন্নত করা হয়েছে, কিন্তু অসুবিধা হল এটি তৈরি করা কঠিন এবং সম্পূর্ণ অক্ষীয় প্রতিসাম্য অর্জন করা কঠিন। আলোক ব্যবস্থার জন্য অপেক্ষাকৃত শিথিল প্রয়োজনীয়তার প্রেক্ষিতে, পরবর্তী সমাধানটি গ্রহণ করা যেতে পারে, যার মধ্যে নমুনার জন্য ফাঁপা রশ্মির আলোকসজ্জা প্রদানের জন্য কনডেন্সারে একটি বৃত্তাকার অ্যাপারচার যোগ করা জড়িত। এই ডিভাইসের প্রভাব। এর ইমেজ রেজোলিউশন উজ্জ্বল ফিল্ড ইমেজের কাছাকাছি হতে পারে, যখন বৈসাদৃশ্যটি ব্যাপকভাবে উন্নত হয়।
