কিভাবে ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপি লেজার কনফোকাল মাইক্রোস্কোপি থেকে আলাদা
ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ
1, ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ হল অতিবেগুনী রশ্মিকে আলোর উৎস হিসাবে ব্যবহার করা, যা পরীক্ষা করার জন্য বস্তুটিকে বিকিরণ করতে ব্যবহৃত হয়, যাতে এটি প্রতিপ্রভ নির্গত করে এবং তারপর মাইক্রোস্কোপের নীচে বস্তুর আকৃতি এবং তার অবস্থান পর্যবেক্ষণ করে। ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ কোষে রাসায়নিক পদার্থের শোষণ, পরিবহন, বিতরণ এবং স্থানীয়করণ অধ্যয়ন করতে ব্যবহৃত হয়। কোষের কিছু পদার্থ, যেমন ক্লোরোফিল, অতিবেগুনী রশ্মি দ্বারা বিকিরণ করার পরে প্রতিপ্রভ হতে পারে; কিছু পদার্থ আছে যেগুলি নিজেরাই ফ্লুরোসেন্ট হতে পারে না, তবে ফ্লুরোসেন্ট রঞ্জক বা ফ্লুরোসেন্ট অ্যান্টিবডি দিয়ে দাগ দিলে, তারা অতিবেগুনী রশ্মি দ্বারা বিকিরণ করার পরেও প্রতিপ্রভ হতে পারে এবং ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপি এই ধরণের পদার্থের গুণগত এবং পরিমাণগত গবেষণার অন্যতম হাতিয়ার।
2, ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ নীতি:
(ক) আলোর উৎস: আলোর উৎস আলোর বিভিন্ন তরঙ্গদৈর্ঘ্য বিকিরণ করে (আল্ট্রাভায়োলেট থেকে ইনফ্রারেডে)।
(খ) উত্তেজনা ফিল্টার উত্স: নমুনার মাধ্যমে আলোর একটি নির্দিষ্ট তরঙ্গদৈর্ঘ্যের ফ্লুরোসেন্স তৈরি করতে পারে, যখন ফ্লুরোসেন্স অকেজো আলোর উত্তেজনাকে অবরুদ্ধ করে।
(C) ফ্লুরোসেন্ট নমুনা: সাধারণত একটি ফ্লুরোক্রোম দিয়ে দাগযুক্ত।
(D) ব্লকিং ফিল্টার: উত্তেজনা আলোকে ব্লক করে যা নমুনা দ্বারা শোষিত হয় না বাছাই করে ফ্লুরোসেন্স প্রেরণ করার জন্য, এবং ফ্লুরোসেন্সের কিছু তরঙ্গদৈর্ঘ্যও নির্বাচনীভাবে প্রেরণ করা হয়। একটি অণুবীক্ষণ যন্ত্র যা আলোর উৎস হিসেবে অতিবেগুনি রশ্মি ব্যবহার করে বিকিরণিত বস্তুকে ফ্লুরোসেস তৈরি করতে। ইলেক্ট্রন মাইক্রোস্কোপ প্রথম 1931 সালে জার্মানির বার্লিনে নর এবং হারোস্কা দ্বারা একত্রিত হয়েছিল। এই অণুবীক্ষণ যন্ত্রটি হালকা রশ্মির পরিবর্তে একটি উচ্চ-গতির ইলেকট্রন রশ্মি ব্যবহার করে। কারণ ইলেকট্রন প্রবাহের তরঙ্গদৈর্ঘ্য আলোক তরঙ্গের তুলনায় অনেক কম, তাই ইলেকট্রন মাইক্রোস্কোপের বিবর্ধন 800,000 বার পর্যন্ত হতে পারে, ন্যূনতম 0.2 ন্যানোমিটারের রেজোলিউশন . 1963 সালে স্ক্যানিং ইলেক্ট্রন মাইক্রোস্কোপ ব্যবহার শুরু করে বস্তুটির পৃষ্ঠের উপর দেখা যায় ক্ষুদ্র কাঠামো।
3, প্রয়োগের সুযোগ: ক্ষুদ্র বস্তুর চিত্রকে বড় করতে ব্যবহৃত হয়। সাধারণত জীববিজ্ঞান, ঔষধ, মাইক্রোস্কোপিক কণা এবং অন্যান্য পর্যবেক্ষণে ব্যবহৃত হয়।
কনফোকাল মাইক্রোস্কোপ
1, রাস্তায় প্রতিফলিত আলোতে কনফোকাল মাইক্রোস্কোপ প্লাস একটি অর্ধ-প্রতিফলিত অর্ধ-লেন্স, প্রতিফলিত আলোর লেন্সের মধ্য দিয়ে অন্য দিকে ভাঁজ করা হবে, একটি পিনহোল সহ একটি বাফেলের উপর ফোকাসে, গর্তটি অবস্থিত ফোকাস, বাফেলের পিছনে একটি ফটোমাল্টিপ্লায়ার টিউব। এটা কল্পনা করা যেতে পারে যে কনফোকাল সিস্টেমের এই সেটের মাধ্যমে ডিটেক্টর লাইটের ফোকাল পয়েন্টের আগে এবং পরে প্রতিফলিত আলো, ছোট গর্তের উপর ফোকাস করতে সক্ষম হবে না, বাফেল দ্বারা অবরুদ্ধ হবে। তাই ফোকাল বিন্দুতে প্রতিফলিত আলোর তীব্রতা ফোটোমিটার পরিমাপ করে।
2, নীতি: ঐতিহ্যগত অপটিক্যাল মাইক্রোস্কোপ একটি ক্ষেত্র আলোর উত্স ব্যবহার করে, নমুনার প্রতিটি বিন্দুর চিত্র প্রতিবেশী বিন্দু থেকে আলোর বিচ্ছুরণ বা বিচ্ছুরণ দ্বারা হস্তক্ষেপ করা হবে; লেজার স্ক্যানিং কনফোকাল মাইক্রোস্কোপ আলোকিত পিনহোলের মাধ্যমে একটি লেজার রশ্মি ব্যবহার করে নমুনার প্রতিটি বিন্দুর স্ক্যানিংয়ের ফোকাল প্লেনে নমুনার উপর আলোর একটি বিন্দু উৎস তৈরি করে, নমুনাটি বিকিরণ করা হয়, ইমেজিং এ পিনহোল সনাক্তকরণে , ফটোমাল্টিপ্লায়ার টিউব (PMT) বা কোল্ড ইলেক্ট্রোকপলিং ডিভাইস (cCCD) পয়েন্ট বাই পয়েন্ট বা পয়েন্ট বাই পয়েন্ট বা পয়েন্ট বাই পয়েন্টের পরে পিনহোল সনাক্ত করার মাধ্যমে আলোর তীব্রতা একটি ফটোমিটার দ্বারা পরিমাপ করা হয়। cCCD) পয়েন্ট বাই পয়েন্ট বা লাইন বাই লাইন গ্রহণ করে এবং কম্পিউটার মনিটরের স্ক্রিনে দ্রুত একটি ফ্লুরোসেন্ট ইমেজ তৈরি করে। অবজেক্টিভ লেন্সের ফোকাল প্লেনের সাপেক্ষে ইলুমিনেশন পিনহোল এবং ডিটেকশন পিনহোল হল কনজুগেট, ফোকাল প্লেনের বিন্দু একই সময়ে আলোকসজ্জা পিনহোল এবং নির্গমন পিনহোলের উপর ফোকাস করে, ফোকাল প্লেনের বাইরের পয়েন্টটি সনাক্তকরণ পিনহোলে থাকবে না ইমেজিং, যাতে কনফোকাল চিত্রটি অপটিক্যাল ক্রস-সেকশনের নমুনা, সাধারণ মাইক্রোস্কোপের অস্পষ্ট চিত্রগুলির ত্রুটিগুলি অতিক্রম করে।
3,অ্যাপ্লিকেশনের ক্ষেত্র: ঔষধ, প্রাণী ও উদ্ভিদ গবেষণা, জৈব রসায়ন, ব্যাকটিরিওলজি, কোষ জীববিদ্যা, টিস্যু ভ্রূণবিদ্যা, খাদ্য বিজ্ঞান, জেনেটিক্স, ফার্মাকোলজি, ফিজিওলজি, অপটিক্স, প্যাথলজি, উদ্ভিদবিদ্যা, স্নায়ুবিজ্ঞান, সামুদ্রিক জীববিদ্যা, পদার্থ বিজ্ঞান, ইলেকট্রনিক বিজ্ঞান, বলবিদ্যা, পেট্রোলিয়াম ভূতত্ত্ব, খনিজবিদ্যা।
