অপটিক্যাল মাইক্রোস্কোপের ফ্লুরোসেন্স পর্যবেক্ষণ
ফ্লুরোসেন্স বলতে সেই প্রক্রিয়াকে বোঝায় যেখানে একটি ফ্লুরোসেন্ট পদার্থ একটি নির্দিষ্ট তরঙ্গদৈর্ঘ্যের আলো দিয়ে বিকিরণ করলে প্রায় একই সাথে দীর্ঘতর তরঙ্গদৈর্ঘ্যের আলো নির্গত করে (চিত্র 1)। যখন একটি নির্দিষ্ট তরঙ্গদৈর্ঘ্যের (উত্তেজনা তরঙ্গদৈর্ঘ্য) আলো একটি অণুতে আঘাত করে, যেমন একটি ফ্লুরোফোরে, ফোটন শক্তি অণুর ইলেকট্রন দ্বারা শোষিত হয়। এরপরে, ইলেক্ট্রনগুলি স্থল অবস্থা (S0) থেকে উচ্চতর শক্তি স্তরে, উত্তেজিত অবস্থায় (S1') স্থানান্তর করে। এই প্রক্রিয়াটিকে বলা হয় উত্তেজনা①। ইলেকট্রন উত্তেজিত অবস্থায় থাকে 10-9–10-8 সেকেন্ড, এই সময়ে ইলেক্ট্রন কিছু শক্তি হারায়②। ইলেকট্রন উত্তেজিত অবস্থা (S1) ত্যাগ করে এবং স্থল অবস্থায় ফিরে আসার প্রক্রিয়া চলাকালীন, উত্তেজনা প্রক্রিয়া চলাকালীন শোষিত অবশিষ্ট শক্তি নির্গত হয়।
ফ্লুরোসেন্ট জাবলনস্কি ডায়াগ্রাম
উত্তেজিত অবস্থায় ফ্লুরোসেন্ট অণুর বসবাসের সময় হল ফ্লুরোসেন্স লাইফটাইম, যা সাধারণত ন্যানোসেকেন্ড স্তরে থাকে এবং এটি ফ্লুরোসেন্ট অণুরই একটি অন্তর্নিহিত বৈশিষ্ট্য। ফ্লুরোসেন্স লাইফটাইম ইমেজিং (এফএলআইএম), যা ফ্লুরোসেন্স লাইফটাইম ইমেজিং প্রযুক্তি ব্যবহার করে, ফ্লুরোসেন্স ইনটেনসিটি ইমেজিং ছাড়াও আরও গভীরভাবে কার্যকরী পরিমাপ করতে পারে এবং আণবিক গঠন, আন্তঃআণবিক মিথস্ক্রিয়া এবং অণুর মাইক্রোএনভায়রনমেন্ট ইত্যাদি তথ্য পেতে পারে যা কঠিন। প্রচলিত অপটিক্যাল ইমেজিং সঙ্গে প্রাপ্ত.
ফ্লুরোসেন্সের আরেকটি গুরুত্বপূর্ণ বৈশিষ্ট্য হল স্টোকস শিফট, উত্তেজনা এবং নির্গমন শিখরের মধ্যে তরঙ্গদৈর্ঘ্যের পার্থক্য (চিত্র 2)। সাধারণত নির্গমন তরঙ্গদৈর্ঘ্য উত্তেজনা তরঙ্গদৈর্ঘ্যের চেয়ে দীর্ঘ হয়। এর কারণ হল ফ্লুরোসেন্ট পদার্থ উত্তেজিত হওয়ার পরে এবং ফোটন মুক্ত করার আগে শিথিলকরণ প্রক্রিয়ার মাধ্যমে ইলেকট্রনগুলি তাদের শক্তির একটি অংশ হারাবে। বৃহত্তর স্টোকস স্থানান্তর সহ ফ্লুরোসেন্ট পদার্থগুলি ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপের নীচে পর্যবেক্ষণ করা সহজ।
ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ
ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ হল একটি অপটিক্যাল মাইক্রোস্কোপ যা পর্যবেক্ষণ এবং ইমেজিংয়ের জন্য ফ্লুরোসেন্স বৈশিষ্ট্য ব্যবহার করে এবং কোষ জীববিজ্ঞান, নিউরোবায়োলজি, উদ্ভিদবিদ্যা, মাইক্রোবায়োলজি, প্যাথলজি এবং জেনেটিক্সের মতো বিভিন্ন ক্ষেত্রে ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয়। ফ্লুরোসেন্স ইমেজিংয়ের উচ্চ সংবেদনশীলতা এবং উচ্চ নির্দিষ্টতার সুবিধা রয়েছে এবং এটি টিস্যু এবং কোষে নির্দিষ্ট প্রোটিন এবং অর্গানেলের বিতরণ পর্যবেক্ষণ, সমষ্টিকরণ এবং মিথস্ক্রিয়া অধ্যয়ন, আয়ন ঘনত্বের পরিবর্তনের মতো জীবন গতিশীল প্রক্রিয়াগুলির ট্র্যাকিংয়ের জন্য খুব উপযুক্ত। , ইত্যাদি
কোষের বেশিরভাগ অণুগুলি প্রতিপ্রভ হয় না এবং আপনি যদি সেগুলি দেখতে চান তবে আপনি তাদের ফ্লুরোসেন্টলি লেবেল করেন। ফ্লুরোসেন্ট লেবেলিংয়ের অনেক পদ্ধতি রয়েছে, যেমন সরাসরি লেবেলিং (যেমন ডিএনএ লেবেল করতে DAPI ব্যবহার করা), বা অ্যান্টিবডিগুলির অ্যান্টিজেন-বাইন্ডিং বৈশিষ্ট্য ব্যবহার করে ইমিউনোস্টেইন করা, বা লক্ষ্য প্রোটিন লেবেল করতে ফ্লুরোসেন্ট প্রোটিন (যেমন GFP, সবুজ ফ্লুরোসেন্ট প্রোটিন) ব্যবহার করা। , এবং বিপরীত বাইন্ডিং। সিন্থেটিক রং (যেমন ফুরা-2), ইত্যাদি।
ইনভার্টেড ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ MF53-N
বর্তমানে, ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ বিভিন্ন পরীক্ষাগার এবং ইমেজিং প্ল্যাটফর্মের মানক ইমেজিং সরঞ্জাম হয়ে উঠেছে এবং এটি আমাদের দৈনন্দিন পরীক্ষার জন্য একটি ভাল সহায়ক। ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপগুলি প্রধানত তিনটি বিভাগে বিভক্ত: খাড়া ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ (বিভাগ করার জন্য উপযুক্ত), ইনভার্টেড ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ (জীবন্ত কোষের জন্য উপযুক্ত, বিভাগ বিবেচনা করে), ফ্লুরোসেন্ট স্টেরিওস্কোপ (বৃহত্তর নমুনার জন্য উপযুক্ত, যেমন গাছপালা, জেব্রাফিশ) ), মেদাকা, ইঁদুর/ইঁদুরের অঙ্গ ইত্যাদি)।
ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপি ইমেজিং প্রযুক্তি ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয় এবং প্রকারে সমৃদ্ধ, এবং নতুন প্রযুক্তি এখনও উদ্ভূত হচ্ছে। আপনি আপনার নিজস্ব গবেষণা সম্পূর্ণ করতে প্রযুক্তি চয়ন করতে পারেন।
