ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ সম্পর্কিত জ্ঞান
কনফোকাল ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপির মূল নীতি: নমুনাকে বিকিরণ করতে একটি বিন্দু আলোর উৎস ব্যবহার করা হয় এবং ফোকাল সমতলে একটি সু-সংজ্ঞায়িত ছোট আলোর স্পট তৈরি হয়। স্প্লিটার দিয়ে গঠিত। বিম স্প্লিটার ফ্লুরোসেন্সকে সরাসরি ডিটেক্টরে পাঠায়। আলোর উৎস এবং ডিটেক্টরের সামনে একটি পিনহোল রয়েছে, যাকে যথাক্রমে আলোকসজ্জা পিনহোল এবং সনাক্তকরণ পিনহোল বলা হয়। দুটির জ্যামিতিক আকার একই, প্রায় 100-200nm; ফোকাল সমতলে আলোর দাগের সাপেক্ষে, দুটিই একত্রিত হয়, অর্থাৎ, আলোক স্থানটি লেন্সের একটি সিরিজের মধ্য দিয়ে যায় এবং অবশেষে একই সময়ে আলোকসজ্জা পিনহোল এবং সনাক্তকরণ পিনহোলের উপর ফোকাস করা যেতে পারে। এইভাবে, ফোকাল সমতল থেকে আলো সনাক্তকরণ গর্তের সুযোগের মধ্যে একত্রিত হতে পারে, যখন ফোকাল প্লেনের উপরে বা নীচে থেকে বিক্ষিপ্ত আলো সনাক্তকরণ গর্তের বাইরে অবরুদ্ধ থাকে এবং চিত্রিত করা যায় না। লেজার বিন্দুতে নমুনা বিন্দু স্ক্যান করে এবং পিনহোল শনাক্ত করার পর ফটোমাল্টিপ্লায়ার টিউব বিন্দুতে সংশ্লিষ্ট আলোক বিন্দু বিন্দুর কনফোকাল ইমেজও পায়, যা একটি ডিজিটাল সংকেতে রূপান্তরিত হয় এবং কম্পিউটারে প্রেরণ করা হয় এবং অবশেষে একত্রিত করে পরিষ্কার করে। স্ক্রিনে পুরো ফোকাল প্লেনের কনফোকাল চিত্র।
প্রতিটি ফোকাল প্লেন ইমেজ আসলে নমুনার একটি অপটিক্যাল ক্রস-সেকশন, এবং এই অপটিক্যাল ক্রস-সেকশনের সবসময় একটি নির্দিষ্ট বেধ থাকে, এটি একটি অপটিক্যাল পাতলা বিভাগ নামেও পরিচিত। যেহেতু ফোকাল পয়েন্টে আলোর তীব্রতা নন-ফোকাস পয়েন্টের তুলনায় অনেক বেশি, এবং নন-ফোকাল প্লেন লাইট পিনহোল দ্বারা ফিল্টার করা হয়, কনফোকাল সিস্টেমের ক্ষেত্রের গভীরতা প্রায় শূন্য এবং Z বরাবর স্ক্যান করা হয়। -অক্ষ অপটিক্যাল টমোগ্রাফি উপলব্ধি করতে পারে, নমুনার ফোকাসকৃত স্থানে দ্বি-মাত্রিক অপটিক্যাল বিভাগটি পর্যবেক্ষণ করে। Z-অক্ষ (অপটিক্যাল অক্ষ) স্ক্যানিংয়ের সাথে XY সমতল (ফোকাল প্লেন) স্ক্যানিংকে একত্রিত করে, নমুনার ত্রিমাত্রিক চিত্রটি ক্রমাগত স্তরগুলির দ্বি-মাত্রিক চিত্র সংগ্রহ করে এবং বিশেষ কম্পিউটার সফ্টওয়্যার দ্বারা প্রক্রিয়াজাত করে প্রাপ্ত করা যেতে পারে।
অর্থাৎ, সনাক্তকরণ পিনহোল এবং আলোর উত্স পিনহোল সর্বদা একই বিন্দুতে ফোকাস করা হয়, যাতে ফোকাল সমতলের বাইরে উত্তেজিত ফ্লুরোসেন্স সনাক্তকরণ পিনহোলে প্রবেশ করতে না পারে।
লেজার কনফোকালের কাজের নীতির সহজ অভিব্যক্তি হল যে এটি আলোর উত্স হিসাবে লেজার আলো ব্যবহার করে। ঐতিহ্যগত ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ ইমেজিংয়ের ভিত্তিতে, এটি একটি লেজার স্ক্যানিং ডিভাইস এবং একটি কনজুগেট ফোকাসিং ডিভাইস যোগ করে এবং এটি কম্পিউটার নিয়ন্ত্রণের মাধ্যমে ডিজিটাল ইমেজ অধিগ্রহণ এবং প্রক্রিয়াকরণের জন্য একটি সিস্টেম।
