মাল্টিফোটন লেজারস্ক্যানিং মাইক্রোস্কোপির সুবিধা বৃদ্ধি করা
লেজার স্ক্যানিং মাল্টিফোটন মাইক্রোস্কোপি অপটিক্যাল মাইক্রোস্কোপির তুলনায় একটি বড় উন্নতি। এটি জীবন্ত কোষ, স্থির কোষ এবং টিস্যুগুলির গভীর কাঠামো পর্যবেক্ষণ করতে পারে এবং স্পষ্ট এবং তীক্ষ্ণ বহু-স্তর জেড-প্লেন কাঠামো, অর্থাৎ অপটিক্যাল বিভাগগুলি পেতে পারে, যেখান থেকে এটি নমুনার ত্রিমাত্রিক কঠিন কাঠামো তৈরি করতে পারে। কনফোকাল মাইক্রোস্কোপি একটি লেজার আলোর উত্স ব্যবহার করে যা সম্প্রসারণের পরে, অবজেক্টিভ লেন্সের পুরো পিছনের ফোকাল প্লেনটি পূরণ করে এবং তারপরে নমুনার ফোকাল সমতলে একটি খুব ছোট বিন্দুতে একত্রিত হতে উদ্দেশ্য লেন্সের লেন্স সিস্টেমের মধ্য দিয়ে যায়। অবজেক্টিভ লেন্সের সাংখ্যিক অ্যাপারচারের উপর নির্ভর করে, উজ্জ্বলতম আলোকসজ্জার স্থানটির ব্যাস প্রায় 0.25 ~ 0.8μm, এবং গভীরতা প্রায় 0.5 ~ 1.5μm . কনফোকাল স্পটটির আকার মাইক্রোস্কোপের নকশা, লেজারের তরঙ্গদৈর্ঘ্য, উদ্দেশ্যমূলক লেন্সের বৈশিষ্ট্য, স্ক্যানিং ইউনিটের স্থিতি সেটিংস এবং নমুনার বৈশিষ্ট্যের উপর নির্ভর করে। একটি ফিল্ড মাইক্রোস্কোপের আলোকসজ্জার পরিসর এবং আলোকসজ্জার গভীরতা বড়, যখন একটি কনফোকাল মাইক্রোস্কোপের আলোকসজ্জা ফোকাল সমতলে একটি সুনির্দিষ্ট ফোকাসের উপর কেন্দ্রীভূত হয়। কনফোকাল মাইক্রোস্কোপির সবচেয়ে মৌলিক সুবিধা হল এটি পুরু ফ্লুরোসেন্ট নমুনার (যা 50 μm বা তার বেশি হতে পারে) সূক্ষ্ম অপটিক্যাল সেকশনিং করতে পারে এবং স্লাইসগুলির পুরুত্ব প্রায় 0.5 থেকে 1.5 μm। একটি অত্যাধুনিক মাইক্রোস্কোপ জেড-অ্যাক্সিস স্টেপার মোটর ব্যবহার করে নমুনাকে উপরে এবং নীচে সরিয়ে সিরিয়াল অপটিক্যাল বিভাগের চিত্রগুলি প্রাপ্ত করা যেতে পারে। নমুনার অন্যান্য স্থান থেকে নির্গত সংকেত দ্বারা হস্তক্ষেপ না করেই চিত্র তথ্য সংগ্রহ একটি সুনির্দিষ্ট সমতলে নিয়ন্ত্রিত হয়। ব্যাকগ্রাউন্ড ফ্লুরোসেন্সের প্রভাব অপসারণ এবং সংকেত-থেকে-শব্দ অনুপাত বাড়ানোর পরে, প্রথাগত ক্ষেত্র-আলোকিত ফ্লুরোসেন্স চিত্রগুলির তুলনায় কনফোকাল চিত্রগুলির বৈসাদৃশ্য এবং রেজোলিউশন উল্লেখযোগ্যভাবে উন্নত হয়েছে। অনেক নমুনায়, জটিল সিস্টেম গঠনের জন্য অনেক জটিল কাঠামোগত উপাদান একে অপরের সাথে সংযুক্ত থাকে, কিন্তু একবার পর্যাপ্ত অপটিক্যাল বিভাগ সংগ্রহ করা গেলে, আমরা সফ্টওয়্যারের মাধ্যমে তাদের তিনটি মাত্রায় পুনর্গঠন করতে পারি। এই পরীক্ষামূলক পদ্ধতিটি কোষ বা টিস্যুর মধ্যে জটিল কাঠামোগত এবং কার্যকরী সম্পর্ক ব্যাখ্যা করার জন্য জৈবিক গবেষণায় ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয়েছে।
