ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ এবং লেজার কনফোকাল মাইক্রোস্কোপের মধ্যে পার্থক্য
ফ্লুরোসেন্ট মাইক্রোস্কোপ
1. ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ আলোর উত্স হিসাবে অতিবেগুনী আলো ব্যবহার করে, যা সনাক্ত করা বস্তুটিকে বিকিরিত করতে ব্যবহৃত হয় যাতে এটি ফ্লুরোসেন্স নির্গত করে এবং তারপর মাইক্রোস্কোপের নীচে বস্তুর আকৃতি এবং অবস্থান পর্যবেক্ষণ করে। ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ কোষে রাসায়নিক পদার্থের শোষণ, পরিবহন, বিতরণ এবং অবস্থান অধ্যয়ন করতে ব্যবহৃত হয়। কোষের কিছু পদার্থ, যেমন ক্লোরোফিল, অতিবেগুনী রশ্মি দ্বারা বিকিরণ করার পরে প্রতিপ্রভ হতে পারে; অন্যান্য পদার্থগুলি নিজেরাই ফ্লুরোসেস করতে পারে না, তবে তারা ফ্লুরোসেন্ট রঞ্জক বা ফ্লুরোসেন্ট অ্যান্টিবডি দিয়ে রঙ্গিন হওয়ার পরে এবং অতিবেগুনী রশ্মি দ্বারা বিকিরণিত হওয়ার পরে প্রতিপ্রভ হতে পারে। ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ এই পদার্থের গুণগত এবং পরিমাণগত গবেষণার জন্য অন্যতম হাতিয়ার।
2, ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ নীতি:
(a) আলোর উৎস: আলোর উৎস বিভিন্ন তরঙ্গদৈর্ঘ্যের আলো বিকিরণ করে (আল্ট্রাভায়োলেট থেকে ইনফ্রারেড পর্যন্ত)।
(b) উত্তেজনা ফিল্টার আলোর উত্স: একটি নির্দিষ্ট তরঙ্গদৈর্ঘ্যের সাথে আলো প্রেরণ করা যা নমুনা ফ্লুরোসেন্স তৈরি করতে পারে, যখন আলোকে ব্লক করে যা উত্তেজনা ফ্লুরোসেন্সের জন্য অকেজো।
(c) ফ্লুরোসেন্ট নমুনা: সাধারণত ফ্লুরোসেন্ট রঙ্গক দিয়ে দাগযুক্ত।
(d) ব্লকিং ফিল্টার: ফ্লুরোসেন্সকে বেছে নেওয়ার জন্য নমুনা দ্বারা শোষিত না হওয়া উত্তেজনা আলো ব্লক করা, এবং ফ্লুরোসেন্সের কিছু তরঙ্গদৈর্ঘ্যও নির্বাচনীভাবে প্রেরণ করা হয়। একটি অণুবীক্ষণ যন্ত্র যা আলোর উৎস হিসেবে অতিবেগুনি রশ্মি ব্যবহার করে বিকিরণিত বস্তুকে প্রতিপ্রভ নির্গত করতে। ইলেক্ট্রন অণুবীক্ষণ যন্ত্রটি প্রথম 1931 সালে বার্লিনে নহল এবং হা রোস্কা দ্বারা একত্রিত হয়েছিল। এই অণুবীক্ষণ যন্ত্রটি হালকা রশ্মির পরিবর্তে একটি উচ্চ-গতির ইলেক্ট্রন রশ্মি ব্যবহার করে। যেহেতু ইলেক্ট্রন প্রবাহের তরঙ্গদৈর্ঘ্য আলোর তরঙ্গের তুলনায় অনেক কম, তাই ইলেকট্রন মাইক্রোস্কোপের বিবর্ধন 800 হাজার বারে পৌঁছাতে পারে এবং সর্বনিম্ন রেজোলিউশন সীমা 0.2 ন্যানোমিটার। স্ক্যানিং ইলেক্ট্রন মাইক্রোস্কোপ, যা 1963 সালে ব্যবহার করা শুরু হয়েছিল, মানুষ বস্তুর পৃষ্ঠের ক্ষুদ্র কাঠামো দেখতে পারে।
3. প্রয়োগের পরিধি: ক্ষুদ্র বস্তুর চিত্রকে বড় করতে ব্যবহৃত হয়। এটি সাধারণত জীববিজ্ঞান, ওষুধ এবং মাইক্রোস্কোপিক কণার পর্যবেক্ষণে প্রয়োগ করা হয়।
কনফোকাল মাইক্রোস্কোপ
1. কনফোকাল মাইক্রোস্কোপ প্রতিফলিত আলোর অপটিক্যাল পথে একটি আধা-প্রতিফলিত আধা-লেন্স যোগ করে, যা লেন্সের মধ্য দিয়ে অন্য দিকে চলে যাওয়া প্রতিফলিত আলোকে প্রতিসরিত করে। এর ফোকাসে, একটি পিনহোল সহ একটি বিভ্রান্তি রয়েছে এবং পিনহোলটি ফোকাসে অবস্থিত। বাফেলের পিছনে একটি ফটোমাল্টিপ্লায়ার টিউব রয়েছে। এটি কল্পনা করা যেতে পারে যে সনাক্তকরণ আলোর ফোকাসের আগে এবং পরে প্রতিফলিত আলো এই কনফোকাল সিস্টেমের মধ্য দিয়ে যায়, এবং ছোট গর্তের উপর ফোকাস করা হবে না, তবে বাফেল দ্বারা অবরুদ্ধ হবে। তাই ফোটোমিটার ফোকাসে প্রতিফলিত আলোর তীব্রতা পরিমাপ করে।
2. নীতি: ঐতিহ্যগত অপটিক্যাল মাইক্রোস্কোপ ফিল্ড আলোর উত্স ব্যবহার করে, এবং নমুনার প্রতিটি বিন্দুর চিত্র সন্নিহিত বিন্দুগুলির বিচ্ছুরণ বা বিক্ষিপ্ত আলো দ্বারা হস্তক্ষেপ করা হবে; লেজার স্ক্যানিং কনফোকাল মাইক্রোস্কোপ আলোকসজ্জা পিনহোলের মধ্য দিয়ে যাওয়া লেজার রশ্মি দ্বারা গঠিত বিন্দু আলোর উত্স ব্যবহার করে নমুনার ফোকাল প্লেনের প্রতিটি বিন্দু স্ক্যান করে। নমুনার বিকিরণ বিন্দু সনাক্তকরণ পিনহোলে চিত্রিত করা হয়, যা পিনহোল সনাক্ত করার পরে ফোটোমালটিপ্লায়ার টিউব (PMT) বা কোল্ড-কাপল্ড ডিভাইস (cCCD) দ্বারা বিন্দু বা লাইন দ্বারা বিন্দু প্রাপ্ত হয় এবং একটি ফ্লুরোসেন্ট চিত্র দ্রুত তৈরি হয় কম্পিউটার মনিটরের পর্দা। আলোকসজ্জা পিনহোল এবং সনাক্তকরণ পিনহোল উদ্দেশ্যমূলক লেন্সের ফোকাল সমতলের সাথে একত্রিত হয় এবং ফোকাল সমতলের বিন্দুগুলি একই সময়ে আলোকসজ্জা পিনহোল এবং নির্গমন পিনহোলের উপর ফোকাস করে এবং ফোকাল সমতলের বাইরের বিন্দুগুলি একত্রিত হবে না। সনাক্তকরণ পিনহোলে চিত্রিত করা, যাতে প্রাপ্ত কনফোকাল চিত্রটি নমুনার অপটিক্যাল ক্রস বিভাগ, যা সাধারণ মাইক্রোস্কোপের অস্পষ্ট চিত্রের ত্রুটিকে অতিক্রম করে।
3. আবেদনের ক্ষেত্র: ওষুধ, প্রাণী ও উদ্ভিদ গবেষণা, জৈব রসায়ন, ব্যাকটেরিয়াবিজ্ঞান, কোষ জীববিদ্যা, টিস্যু এবং ভ্রূণ, খাদ্য বিজ্ঞান, জেনেটিক্স, ফার্মাকোলজি, ফিজিওলজি, অপটিক্স, প্যাথলজি, উদ্ভিদবিদ্যা, স্নায়ুবিজ্ঞান, সামুদ্রিক জীববিজ্ঞান, পদার্থ বিজ্ঞান, ইলেকট্রনিক বিজ্ঞান, মেকানিক্স, পেট্রোলিয়াম ভূতত্ত্ব এবং খনিজবিদ্যা।
