মাইক্রোবিয়াল জনসংখ্যা নির্ধারণ - সরাসরি মাইক্রোস্কোপিক গণনা পদ্ধতি!
I. উদ্দেশ্য প্রয়োজনীয়তা
1, হেমাটোক্রিট প্লেট গণনার নীতিটি স্পষ্ট করতে।
2, হেমাটোক্রিট প্লেট ব্যবহার করে মাইক্রোবিয়াল গণনার পদ্ধতি আয়ত্ত করুন।
২. মৌলিক নীতি
অণুবীক্ষণ যন্ত্রের সরাসরি গণনা পদ্ধতি হল অণুবীক্ষণ যন্ত্রে সরাসরি একটি সহজ, দ্রুত, স্বজ্ঞাত পদ্ধতি গণনা করা একটি নির্দিষ্ট এলাকা এবং আয়তনের (এটি ব্যাকটিরিওলজিক্যাল কাউন্টার নামেও পরিচিত) সহ একটি বিশেষ স্লাইডে পরীক্ষা করার জন্য নমুনার অল্প পরিমাণ সাসপেনশন। বর্তমানে, দেশী এবং বিদেশী সাধারণত ব্যবহৃত ব্যাকটেরিওলজিকাল কাউন্টারগুলি হল: রক্তকণিকা গণনা প্লেট, পিটারফ-হাউসার ব্যাকটিরিওলজিকাল কাউন্টার এবং হকসলে ব্যাকটেরিওলজিকাল কাউন্টার, ইত্যাদি, যা খামির, ব্যাকটেরিয়া, ছাঁচের স্পোর এবং গণনার অন্যান্য সাসপেনশনের জন্য ব্যবহার করা যেতে পারে, মূল নীতি। একই. পরের দুই ধরনের কাউন্টারের মোট আয়তন আছে 0৷{4}}কভারস্লিপ লাগানোর পর 2mm3, এবং কভারস্লিপ এবং ক্যারিয়ার স্লাইসের মধ্যে দূরত্ব মাত্র 0.02mm, তাই ছোট কোষ যেমন ব্যাকটেরিয়া পর্যবেক্ষণ এবং একটি তেল নিমজ্জন উদ্দেশ্য সঙ্গে গণনা করা যেতে পারে. এই কাউন্টারগুলির ব্যবহার ছাড়াও, অনুবীক্ষণ যন্ত্রের নীচে সরাসরি পর্যবেক্ষণ করা smear এরিয়া এবং ফিল্ড অফ ভিউ এরিয়ার অনুপাতের একটি অনুমান পদ্ধতিও রয়েছে, যা সাধারণত গরুর দুধের ব্যাকটিরিওলজিকাল পরীক্ষার জন্য ব্যবহৃত হয়। সরাসরি মাইক্রোস্কোপ গণনা পদ্ধতির সুবিধাগুলি স্বজ্ঞাত, দ্রুত এবং পরিচালনা করা সহজ। যাইহোক, এই পদ্ধতির অসুবিধা হল যে ফলাফল সাধারণত মৃত এবং জীবিত জীবের যোগফল। এই অসুবিধা কাটিয়ে ওঠার জন্য কিছু পদ্ধতি আছে, যেমন জীবন্ত জীবাণু গণনা করার উদ্দেশ্য অর্জনের জন্য লাইভ ব্যাকটেরিয়া স্টেইনড মাইক্রোচেম্বার কালচারের সংমিশ্রণ (স্বল্প সময়) এবং সাইটোকাইনেসিস ইনহিবিটর যোগ করা।
অপারেশন পদক্ষেপ
1, ব্যাকটেরিয়া সাসপেনশন প্রস্তুতি
যথোপযুক্ত ঘনত্বের সাথে ব্রিউয়ারের খামিরের ব্যাকটেরিয়া সাসপেনশন তৈরি করতে জীবাণুমুক্ত স্যালাইন ব্যবহার করুন।
2, মিরর গণনা চেম্বার
নমুনা যোগ করার আগে, গণনা প্লেটের গণনা চেম্বারটি প্রথমে পরিদর্শন করা উচিত। যদি কোন ময়লা থাকে, তবে গণনার আগে এটি পরিষ্কার করা এবং শুকিয়ে ফুঁ দেওয়া দরকার।
3, নমুনা যোগ করা
একটি কভারস্লিপ দিয়ে আচ্ছাদিত পরিষ্কার এবং শুষ্ক রক্তকণিকা গণনা প্লেট, এবং তারপর একটি জীবাণুমুক্ত কৈশিক বুরেট ব্যবহার করে কভারস্লিপের প্রান্ত থেকে ব্রিউয়ারের খামির সাসপেনশনটি একটি ছোট ফোঁটা ফেলে দিন, যাতে ব্যাকটেরিয়া তরল কৈশিক অনুপ্রবেশের মাধ্যমে ফাঁক বরাবর প্রবেশ করে। কাউন্টিং চেম্বার স্বয়ংক্রিয়ভাবে, সাধারণত গণনা চেম্বার ব্যাকটেরিয়া তরল দিয়ে পূর্ণ হতে পারে। নমুনা নেওয়ার সময়, ব্যাকটেরিয়া দ্রবণটি প্রথমে ভালভাবে নাড়াতে হবে; নমুনা যোগ করার সময়, গণনা চেম্বারে বায়ু বুদবুদ থাকা উচিত নয়।
4, মাইক্রোস্কোপ গণনা
নমুনা যোগ করার পরে, এটিকে 5 মিনিটের জন্য বিশ্রাম দিন, তারপরে মাইক্রোস্কোপ ক্যারিয়ার স্টেজে রক্ত কোষ গণনা প্লেটটি রাখুন, প্রথমে কম ম্যাগনিফিকেশন সহ গণনা চেম্বারের অবস্থান খুঁজুন এবং তারপর গণনার জন্য এটিকে উচ্চ বিবর্ধনে পরিবর্তন করুন। অণুবীক্ষণ যন্ত্রের আলোর তীব্রতা যথাযথভাবে সামঞ্জস্য করুন, একটি প্রতিফলক আলো সহ মাইক্রোস্কোপের জন্যও মনোযোগ দেওয়া উচিত আলোর একপাশে পক্ষপাতদুষ্ট হওয়া উচিত নয়, অন্যথায় দৃশ্যের ক্ষেত্রটি জিহ্বা পরিষ্কার গণনা চেম্বার গ্রিড লাইন সহজ নয়, অথবা শুধুমাত্র উল্লম্ব লাইন দেখুন বা শুধুমাত্র অনুভূমিক লাইন দেখুন। যদি গণনার আগে ব্যাকটেরিয়াল তরলটি খুব ঘন বা খুব পাতলা পাওয়া যায়, তবে গণনার আগে তরলটি পুনরায় সামঞ্জস্য করা প্রয়োজন। প্রতিটি কোষে প্রায় 5 থেকে 10 ব্যাকটেরিয়ার সাধারণ নমুনা পাতলা করার প্রয়োজনীয়তা উপযুক্ত। প্রতিটি কাউন্টিং চেম্বারের জন্য, 5টি মাঝারি বগিতে (4টি কোণ এবং কেন্দ্রে একটি মধ্যম বগি) মধ্যে থাকা জীবগুলিকে গণনার জন্য নির্বাচন করা হয়। গ্রিড লাইনে অবস্থিত জীবগুলি সাধারণত শুধুমাত্র উপরের এবং ডান লাইনে গণনা করা হয়। ইস্ট বাডিংয়ের ক্ষেত্রে, যখন উদীয়মান দেহ মাতৃ কোষের অর্ধেক আকারে পৌঁছে যায়, তখন এটি দুটি জীব হিসাবে গণনা করা হয়। নমুনার ব্যাকটেরিয়া বিষয়বস্তু গণনা করতে গড় মানের মধ্যে দুটি গণনা চেম্বার থেকে একটি নমুনা গণনা করা।
5. হেমাটোক্রিট প্লেট পরিষ্কার করা
ব্যবহারের পরে, কলের নীচে জল দিয়ে রক্তের কোষ গণনা প্লেটটি ধুয়ে ফেলুন, ধোয়া এবং ব্রাশ করার জন্য শক্ত জিনিস ব্যবহার করবেন না, এটি নিজে শুকিয়ে নিন বা ধোয়ার পরে শুকানোর জন্য একটি হেয়ার ড্রায়ার ব্যবহার করুন। প্রতিটি বগিতে কোন অবশিষ্ট জীব বা অন্যান্য অবক্ষেপ আছে কিনা তা দেখতে মাইক্রোস্কোপিকভাবে প্লেটটি পরিদর্শন করুন। এটি পরিষ্কার না হলে, পরিষ্কার না হওয়া পর্যন্ত ধোয়ার পুনরাবৃত্তি করতে হবে।
