কনফোকাল মাইক্রোস্কোপ এবং সাধারণ অপটিক্যাল মাইক্রোস্কোপের তুলনা
মাইক্রোস্কোপ হল কোষ পর্যবেক্ষণের প্রধান হাতিয়ার। আলোর উৎসের উপর নির্ভর করে, একে দুটি ভাগে ভাগ করা যায়: অপটিক্যাল মাইক্রোস্কোপ এবং ইলেক্ট্রন মাইক্রোস্কোপ। পূর্ববর্তীটি আলোর উত্স হিসাবে দৃশ্যমান আলো (আল্ট্রাভায়োলেট মাইক্রোস্কোপ থেকে অতিবেগুনী রশ্মি) ব্যবহার করে, যখন পরেরটি আলোর উত্স হিসাবে একটি ইলেক্ট্রন রশ্মি ব্যবহার করে। সাধারণ অপটিক্যাল মাইক্রোস্কোপ এবং লেজার কনফোকাল মাইক্রোস্কোপ একই অপটিক্যাল মাইক্রোস্কোপের অন্তর্গত।
I. সাধারণ অপটিক্যাল মাইক্রোস্কোপ
সাধারণ জৈবিক মাইক্রোস্কোপ তিনটি অংশ নিয়ে গঠিত, যথা: ① আলোকসজ্জা ব্যবস্থা, আলোর উৎস এবং কনডেনসার সহ; ② অপটিক্যাল ম্যাগনিফিকেশন সিস্টেম, উদ্দেশ্য এবং আইপিস সমন্বিত, মাইক্রোস্কোপের প্রধান অংশ, গোলাকার বিকৃতি এবং বর্ণময় বিকৃতি দূর করার জন্য, আইপিস এবং উদ্দেশ্যগুলি একটি জটিল লেন্স গ্রুপের সমন্বয়ে গঠিত; ③ যান্ত্রিক ডিভাইস, উপাদান এবং সুবিধার পর্যবেক্ষণ ঠিক করতে ব্যবহৃত.
অণুবীক্ষণ যন্ত্র বস্তু পরিষ্কার না শুধুমাত্র পরিবর্ধন দ্বারা নির্ধারিত হয়, কিন্তু এছাড়াও অণুবীক্ষণ যন্ত্রের মীমাংসা ক্ষমতা (রেজোলিউশন) সঙ্গে, মীমাংসা ক্ষমতা অণুবীক্ষণ যন্ত্র বোঝায় (বা লক্ষ্য 25cm থেকে মানুষের চোখ) বস্তুর zui ছোট ব্যবধান পার্থক্য করতে পারে ক্ষমতা. আলোর তরঙ্গদৈর্ঘ্য এবং মিরর মাউথ রেট এবং মাধ্যমের প্রতিসরাঙ্ক সূচক সূত্রে প্রকাশ করা সমাধানের শক্তির আকারের পার্থক্য করুন:
R=0.61λ /NANA=nsin /2 যেখানে: n=মাধ্যমের প্রতিসরণ সূচক;=আয়নার মুখের কোণ (টেনশন কোণের উদ্দেশ্যমূলক লেন্সের মুখের নমুনা), NA=আয়নার মুখের হার (সংখ্যাসূচক অ্যাপারচার)। আয়নার মুখের কোণ সর্বদা 180? এর কম হতে হবে, তাই sina/2 এর জুই মান অবশ্যই 1 এর কম হবে।
অপটিক্যাল লেন্স তৈরিতে ব্যবহৃত কাচের প্রতিসরণ সূচক হল 1.65 ~ 1.78, মাধ্যমটির প্রতিসরাঙ্ক সূচকটি কাচের যত কাছাকাছি ব্যবহার করা হয় তত ভাল। শুষ্ক অবজেক্টিভ লেন্সের জন্য, বাতাসের মাধ্যম, আয়নার মুখের হার সাধারণত 0 হয়৷{6}}5 ~ 0.95; তেলের লেন্সের সাথে সিডার তেল মাঝারি হিসাবে, আয়নার মুখের হার 1.5 এর কাছাকাছি হতে পারে।
সাধারণ আলোর তরঙ্গদৈর্ঘ্য 400~700nm, তাই মাইক্রোস্কোপের সমাধান করার শক্তির মান 0.2μm এর কম হবে না, মানুষের চোখের সমাধান করার ক্ষমতা 0.2mm, তাই মাইক্রোস্কোপের জুই ম্যাগনিফিকেশনের সাধারণ নকশা সাধারণত 1000X হয়।
দ্বিতীয়ত, লেজার কনফোকাল স্ক্যানিং মাইক্রোস্কোপ
লেজার কনফোকাল স্ক্যানিং মাইক্রোস্কোপ (লেজার কনফোকাল স্ক্যানিং মাইক্রোস্কোপ), একটি স্ক্যানিং আলোর উত্স হিসাবে একটি লেজার সহ, বিন্দু দ্বারা বিন্দু, লাইন দ্বারা, পৃষ্ঠ দ্বারা পৃষ্ঠ দ্রুত স্ক্যানিং ইমেজিং, স্ক্যানিং লেজার এবং ফ্লুরোসেন্স সংগ্রহ একটি সাধারণ উদ্দেশ্য, উদ্দেশ্য স্ক্যানিং লেজার ফোকাসিং পয়েন্ট। , কিন্তু বস্তুর বিন্দুর তাত্ক্ষণিক ইমেজিং। লেজার রশ্মির সংক্ষিপ্ত তরঙ্গদৈর্ঘ্যের কারণে, রশ্মিটি খুব সূক্ষ্ম, তাই কনফোকাল লেজার স্ক্যানিং মাইক্রোস্কোপের উচ্চ রেজোলিউশন রয়েছে, যা একটি সাধারণ অপটিক্যাল মাইক্রোস্কোপের চেয়ে প্রায় 3 গুণ বেশি। সিস্টেমটি একবার ফোকাস করা হয় এবং স্ক্যানটি নমুনার একটি প্লেনে সীমাবদ্ধ থাকে। যখন ফোকাসিং গভীরতা একই না হয়, তখন নমুনার বিভিন্ন গভীরতার স্তরের চিত্রগুলি পাওয়া যায় এবং এই চিত্র তথ্যগুলি কম্পিউটারে সংরক্ষণ করা হয়, কম্পিউটার বিশ্লেষণ এবং সিমুলেশনের মাধ্যমে, এটি কোষের নমুনার ত্রিমাত্রিক গঠন দেখাতে পারে। .
