টিস্যু ব্লকের আয়তন সম্পর্কিত জৈবিক মাইক্রোস্কোপ
জৈবিক মাইক্রোস্কোপি এখন পর্যন্ত, টিস্যু এবং কোষের এক্স-রে মাইক্রো-সেকশনের জন্য কোল্ড ফিক্সেশন, হিমায়িত আল্ট্রাথিন সেকশনিং এবং ফ্রিজ-ড্রাইং হল রুটিন পদ্ধতি। এই পদ্ধতির বিশদ বিবরণ নিম্নরূপ:
জৈবিক মাইক্রোস্কোপ। একটি কনডেন্সার সহ মাইক্রোস্কোপের জন্য, মাঝারি উজ্জ্বলতা অর্জনের জন্য কনডেন্সারটি উপরে এবং নীচে সরানো যেতে পারে। উপরন্তু, পরিবর্তনশীল আলো নির্গত ডায়োডের অ্যাপারচার পরিবর্তন করা যেতে পারে মাঝারি 9b উজ্জ্বলতা অর্জন করতে। আলো উজ্জ্বল হলে কনডেন্সারকে যথাযথভাবে বাড়ানো যায় এবং পরিবর্তনশীল আলোর অ্যাপারচার যথাযথভাবে বড় করা যায়। আলো খুব শক্তিশালী হলে, কনডেন্সারটি যথাযথভাবে কমানো যেতে পারে এবং ক্রস-লাইট বিমের অ্যাপারচার যথাযথভাবে হ্রাস করা যেতে পারে। যদি আপনি এখনও এই পরিস্থিতিতে চমকপ্রদ বোধ করেন তবে আপনি একটি উপযুক্ত ফিল্টার চয়ন করতে পারেন এবং এটি কনডেন্সারের নীচে বন্ধনীতে রাখতে পারেন। এইভাবে আপনি উজ্জ্বলতা পেতে পারেন যা আপনাকে সন্তুষ্ট করে। অবশ্যই, পরিবর্তনশীল অ্যাপারচার আকার অর্জন করতে এবং উপযুক্ত ফিল্টার নির্বাচন করতে কনডেন্সারের উপরে এবং নীচের অবস্থান সামঞ্জস্য করার অভিজ্ঞতা অর্জনের জন্য অনুশীলনের একটি নির্দিষ্ট সময় লাগে।
জৈবিক অণুবীক্ষণ যন্ত্রের একটি অত্যন্ত গুরুত্বপূর্ণ বিষয় হল কোষ সংগ্রহ ও পৃথক করার প্রক্রিয়া চলাকালীন, ফ্রিজ-ড্রাইং এবং রজন এমবেডিং (FD), অতি-পাতলা বৃক্ষগুলিকে হিমায়িত করার পরে এবং হিমায়িত-শুকানোর পরে, প্রতিটি অংশের 65টি উপাদান উপাদান অবশ্যই থাকতে হবে। খুব সাবধানে বিশ্লেষণ করা হবে, এবং একেবারে বিশ্লেষণ করা কোষ ক্ষতি করবেন না. কারণ এক্স-রে মাইক্রো-এরিয়া বিশ্লেষণে শুধুমাত্র অনেক ধাপই জড়িত নয়, অনেক খরচও হয়। যদি দীর্ঘ সময় এবং একাধিক পদক্ষেপের পরে, বিশ্লেষণ করা কোষগুলি ক্ষতিগ্রস্ত কোষ বা মৃত কোষ হয়, তাহলে ভুল সিদ্ধান্তে আঁকতে দুঃখজনক হবে। উদাহরণস্বরূপ, কোলাজেনেস চিকিত্সার পরে বিচ্ছিন্ন কার্ডিওমায়োসাইটগুলির দুটি আকার রয়েছে, একটি লম্বা রড-আকৃতির এবং অন্যটি গোলাকার। পরেরটি হল মৃত কোষ যা কোষ বিচ্ছিন্নতার সময় ক্ষতিগ্রস্ত হয়।
জৈবিক মাইক্রোস্কোপি এই দুই ধরনের কোষে ইলেক্ট্রোলাইটের বিষয়বস্তু এবং বন্টন খুবই ভিন্ন। বৃত্তাকার কার্ডিওমায়োসাইটগুলিতে Na খুব বেশি এবং K খুব কম, এবং রৈখিক শাখাগুলিতে Ca ঘনত্ব খুব বেশি। অন্যান্য বিশ্লেষণ পদ্ধতির সাথে পরীক্ষা করার পরে, এটি প্রমাণিত হয়েছিল যে গোলাকার কোষগুলিতে উচ্চ Na এবং নিম্ন K এবং মাইটোকন্ড্রিয়াতে উচ্চ ca কোষ বিচ্ছেদ প্রক্রিয়ার সময় কোষের ঝিল্লির ক্ষতির কারণে হয়েছিল। কোষ এবং টিস্যুগুলির ঠান্ডা স্থিরকরণ পদ্ধতিটি প্রায়শই প্রথমে সেগুলিকে নিভিয়ে ঠিক করা এবং তারপরে তরল নাইট্রোজেনে সংরক্ষণ করা। সংরক্ষণের প্রভাবের জন্য quenching এবং fixation খুবই গুরুত্বপূর্ণ। জীবন্ত কোষ বা তাজা টিস্যুতে প্রচুর পরিমাণে পানি থাকে। নিভানোর সময়, কোষ বা টিস্যুগুলির অংশগুলি যেগুলি ক্রায়োজেনের সাথে সরাসরি যোগাযোগ করে (বিশেষত যখন তরল নাইট্রোজেন দিয়ে নিভিয়ে দেওয়া হয়) প্রথমে হিমায়িত এবং স্থির হয়, এইভাবে একটি "শেল" গঠন করে, যা কোষের কেন্দ্রীয় অংশকে চূর্ণ করে দেয়। এবং ঠান্ডা স্থির। অতএব, এক্স-লাইন মাইক্রো-এরিয়া বিশ্লেষণ করার সময়, এটি প্রায়শই পাওয়া যায় যে বড় কোষগুলির কেন্দ্রে বরফের স্ফটিক রয়েছে। এটি যাতে না ঘটে তার জন্য, তরল নাইট্রোজেনের চেয়ে উচ্চতর গলনাঙ্কের কিন্তু -806c এর কম শুষ্কতাযুক্ত পদার্থকে চূর্ণ রেফ্রিজারেন্ট হিসাবে ব্যবহার করা হয়। এরকম অনেক পদার্থ আছে, কিন্তু সবচেয়ে সহজ এবং সস্তা হল ঘনীভূত প্রোপেন (স্ফুটনাঙ্ক - 42.120c, গলনাঙ্ক - 187.10c, আণবিক ওজন 44.1), এবং শীতল হওয়ার হারও দ্রুততম। কিন্তু এর অসুবিধা হল এটি দাহ্য।
জৈবিক মাইক্রোস্কোপ পেশী ফাইবারকে একটি বিশেষ ফ্রেমে রাখতে পারে। যখন পেশী ফাইবার সংকোচন একটি নির্দিষ্ট পর্যায়ে পৌঁছায় এবং এটি ঠিক করার প্রয়োজন হয়, তখন অগ্রভাগটি অবিলম্বে পেশী ফাইবারে তরল প্রোপেন স্প্রে করতে শুরু করা হয় যাতে এটি নিভিয়ে যায়। তারপর ফ্রেমের সাথে পেশীর তন্তুগুলো বের করে তরল নাইট্রোজেনে রাখা হয়। যদি রক্তকণিকা বা পৃথক কোষগুলি স্থির থাকে, তবে কোষগুলিকে ঘনীভূত করার জন্য প্রথমে কম গতিতে সেন্ট্রিফিউজ করুন, কোষগুলিকে ভাল তাপ পরিবাহিতা সহ একটি ছোট রূপালী টিউবে স্থানান্তর করুন, টিউবটিকে তরল প্রোপেনে রাখুন এবং এটিকে ঠিক করতে হিমায়িত করুন। হলের পরীক্ষাগারে ইঁদুরের অগ্ন্যাশয় ঠিক করার সময়, প্রথমে তরল হিলিয়াম (বা তরল নাইট্রোজেন) দিয়ে দুটি ইস্পাতের ব্লককে পূর্ব-ঠান্ডা করুন, দুটি তামার ব্লককে ফোর্সেপ দিয়ে আটকে দিন এবং অগ্ন্যাশয়ের আগে এবং পরে জরায়ু গ্রন্থিটি নিভিয়ে দেওয়ার জন্য রাখুন। . টিস্যু বা কোষগুলিকে নিভিয়ে স্থির করা যায় এবং তারপর দীর্ঘমেয়াদী স্টোরেজের জন্য তরল নাইট্রোজেনে স্থানান্তর করা যায়।
