লেজার স্ক্যানিং মাল্টিফোটন মাইক্রোস্কোপের অগ্রগতি সুবিধা
লেজার স্ক্যানিং মাল্টিফোটন মাইক্রোস্কোপ অপটিক্যাল মাইক্রোস্কোপির একটি উল্লেখযোগ্য উন্নতি, যা প্রধানত জীবিত কোষ, স্থির কোষ এবং টিস্যুগুলির গভীর কাঠামো পর্যবেক্ষণ করার ক্ষমতা এবং স্পষ্ট এবং তীক্ষ্ণ বহু{0}}স্তর জেড-প্লেন স্ট্রাকচার, অর্থাৎ অপটিক্যাল স্লাইস, যা তিন{2} কঠিন কাঠামো তৈরি করতে ব্যবহার করা যেতে পারে। নমুনা কনফোকাল মাইক্রোস্কোপ একটি লেজার আলোর উত্স ব্যবহার করে, যা অবজেক্টিভ লেন্সের পুরো ফোকাল প্লেনটি পূরণ করতে প্রসারিত হয় এবং তারপর অবজেক্টিভ লেন্সের লেন্স সিস্টেমের মাধ্যমে নমুনার ফোকাল প্লেনে খুব ছোট বিন্দুতে রূপান্তরিত হয়। অবজেক্টিভ লেন্সের সাংখ্যিক অ্যাপারচার অনুযায়ী, উজ্জ্বলতম আলোক বিন্দুর ব্যাস প্রায় 0.25-0.8 μm, এবং গভীরতা প্রায় 0.5-1.5 μm। কনফোকাল পয়েন্টের আকার মাইক্রোস্কোপ ডিজাইন, লেজারের তরঙ্গদৈর্ঘ্য, উদ্দেশ্যমূলক বৈশিষ্ট্য, স্ক্যানিং ইউনিট স্টেট সেটিংস এবং নমুনা বৈশিষ্ট্য দ্বারা নির্ধারিত হয়। একটি ফিল্ড মাইক্রোস্কোপের আলোকসজ্জার পরিসর এবং গভীরতা বড়, যখন একটি কনফোকাল মাইক্রোস্কোপের আলোকসজ্জা ফোকাল সমতলের একটি নিরাপদ কেন্দ্রবিন্দুতে ফোকাস করা হয়। কনফোকাল মাইক্রোস্কোপির সবচেয়ে মৌলিক সুবিধা হল এটি প্রায় 0.5 থেকে 1.5 μm পুরুত্ব সহ পুরু ফ্লুরোসেন্ট নমুনাগুলিতে (50 μm বা তার বেশি) সূক্ষ্ম অপটিক্যাল বিভাগ সম্পাদন করতে পারে। অণুবীক্ষণ যন্ত্রের Z-অক্ষের স্টেপার মোটর ব্যবহার করে নমুনাটিকে উপরে এবং নীচে সরানোর মাধ্যমে অপটিক্যাল স্লাইস চিত্রগুলির সিরিজ প্রাপ্ত করা যেতে পারে। ছবির তথ্য সংগ্রহ একটি নিরাপদ সমতলের মধ্যে নিয়ন্ত্রিত হয় এবং নমুনার অন্যান্য স্থান থেকে নির্গত সংকেত দ্বারা হস্তক্ষেপ করা হবে না। ব্যাকগ্রাউন্ড ফ্লুরোসেন্সের প্রভাব অপসারণ এবং সংকেত-থেকে-শব্দ অনুপাত বাড়ানোর পরে, কনফোকাল চিত্রগুলির বৈসাদৃশ্য এবং রেজোলিউশন ঐতিহ্যগত ক্ষেত্রের আলোকসজ্জা প্রতিপ্রভ চিত্রগুলির তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে উন্নত হয়েছে। অনেক নমুনাতে, জটিল কাঠামোগত উপাদানগুলি জটিল সিস্টেম গঠনের জন্য আন্তঃব্যবহার করে, কিন্তু একবার পর্যাপ্ত অপটিক্যাল বিভাগ সংগ্রহ করা গেলে, আমরা তাদের তিনটি মাত্রায় পুনর্গঠন করতে সফ্টওয়্যার ব্যবহার করতে পারি। এই পরীক্ষামূলক পদ্ধতিটি কোষ বা টিস্যুর মধ্যে জটিল কাঠামোগত এবং কার্যকরী সম্পর্ক ব্যাখ্যা করার জন্য জৈবিক গবেষণায় ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয়েছে।
